Protein sensing by nanofluidic crystal and its signal enhancement.
纳米流体学具有独特性质:纳米尺度受限空间中的离子电导受表面电荷密度强烈影响,可用于构建电读出生物传感器。基于该原理,本文报道了一种新型蛋白质传感器及其三明治信号增强策略。将表面修饰有特定适配体的纳米颗粒组装于悬空微孔中,形成具有纳米级间隙的三维网络,称为纳米流体晶体,作为基本传感单元。适配体捕获蛋白质后,会改变纳米颗粒表面电荷密度,...
纳米流体学具有独特性质:纳米尺度受限空间中的离子电导受表面电荷密度强烈影响,可用于构建电读出生物传感器。基于该原理,本文报道了一种新型蛋白质传感器及其三明治信号增强策略。将表面修饰有特定适配体的纳米颗粒组装于悬空微孔中,形成具有纳米级间隙的三维网络,称为纳米流体晶体,作为基本传感单元。适配体捕获蛋白质后,会改变纳米颗粒表面电荷密度,...
本文报道了一种用于凝血酶检测的新型高灵敏三明治型伪双酶电化学适配体传感器。该传感器以介孔二氧化硅-多壁碳纳米管(mSiO2@MWCNT)纳米复合材料作为信号放大标签,并结合伪双酶电催化体系实现信号增强。mSiO2@MWCNT 具有良好的生物相容性和适宜微环境,可稳定适配体组装,并能负载大量电子介质硫黄素(Thi)、铂纳米颗粒(PtN...
本研究基于多功能双发夹DNA结构,建立了一种简单、快速且高灵敏的电化学检测方法,用于检测DNA、凝血酶和三磷酸腺苷(ATP)。以亚甲基蓝(MB)标记的DNA序列作为与目标DNA、凝血酶或ATP适配体匹配的单链DNA,与辅助探针杂交并在电极表面形成双发夹结构。辅助探针与发夹捕获探针的茎区杂交后形成内外发夹;当目标探针与外发夹中的辅助探...
适配体是体外筛选的 DNA 配体,可靶向蛋白质等生物分子。近年来,它们作为潜在治疗分子或生物传感器识别元件受到日益关注。在这两种应用中,迫切需要表征靶标与适配体在溶液中或固定于表面时的结合。在此背景下,我们开发了一种由微阵列化抗凝血酶适配体组成的动力学生物传感器,以评估该相互作用的动力学参数。无标记凝血酶与生物传感器的结合通过表面等...
本文报道了一种基于控释递送系统的无标记电化学发光(ECL)目标蛋白检测方法。作者采用通用程序制备了氧化铁磁性介孔二氧化硅纳米容器(MMSNs),将三(2,2′-联吡啶)钌(II)([Ru(bpy)3]2+)作为客体分子负载于介孔孔道中,并以凝血酶结合适配体作为孔口门控元件。无目标蛋白时,适配体以无序单链形式通过静电作用吸附于带正电的...
本文报道了一种基于金纳米颗粒/硫黄素-石墨烯(AuNPs/Th–G)纳米复合修饰玻璃碳电极的电化学凝血酶适配体传感器。石墨烯通过硫黄素(Th)的π-π堆积作用进行非共价功能化,随后在Th–G表面电沉积金纳米颗粒(AuNPs),形成高导电、低噪声且比表面积大的传感界面。乙硫醇修饰的凝血酶结合适配体(TBA)通过金-硫化学固定在AuNP...
本文提出一种新型电化学适配体传感器构建策略,用于检测凝血酶浓度。该策略以两条精心设计的寡核苷酸为核心元件,其序列同时包含凝血酶适配体(Apt15和Apt29)以及可重组的G-四联体半区。在无凝血酶存在时,电极表面的G-四联体半区可在K+存在下与血红素(hemin)结合形成G-四联体–血红素复合物,产生可检测的电化学信号;当凝血酶与适...
通过玻璃基底沉积金纳米棒并固定特异性结合凝血酶的 DNA 适配体,构建了局域表面等离子共振(LSPR)传感器表面。该 LSPR 适配体传感器在蛋白结合时呈现 6 nm 的 λmax 位移,检测限至少达 10 pM,表明其是光学消光 LSPR 检测凝血酶中灵敏度最高的体系之一。作者还测试了金双锥制备的 LSPR 传感器,其折射率灵敏度...
本文首次报道了一种基于磷光能量转移(PET)的敏感、选择性且稳定的磷光生物传感器,用于通过凝血酶–适配体识别事件检测凝血酶。作者构建了由标记凝血酶结合适配体(TBA)的锰掺杂硫化锌量子点(Mn-ZnS QDs)作为能量供体、碳纳米点(CNDs)作为能量受体的高效 PET 供体–受体对。由于适配体与 CNDs 之间的 π–π 堆积作用...
适配体对生物大分子、病毒和细胞等靶标的识别是适配体生物传感器平台及蛋白功能研究的关键。然而,对于难以纯化和定量、甚至尚未明确定义的靶标,评价适配体与其靶标之间的结合常数十分困难。为此,作者开发了一种基于改进毛细管电泳(CE)的方法,用于测定靶标难以定量时适配体的解离常数(Kd)。以人凝血酶及其已知适配体(TBA)为模型验证该方法,结...
RNA 是具有多种功能的生物大分子,可衍生出大量具有优异结合亲和力与特异性的 RNA 适配体,是生物传感器开发的理想识别元件。然而 RNA 易发生自发水解和核酸酶降解,导致 RNA 适配体传感器易产生假阳性信号。本文提出一种利用内部质量控制元件区分目标结合与假阳性信号的 RNA 适配体生物传感器设计策略。所选 RNA 适配体序列被扩...
本文设计了一种用于灵敏检测凝血酶的新型电化学发光(ECL)检测方法,采用CdSe/ZnS量子点作为ECL标记。该传感器构建于石墨烯修饰的玻碳电极上,并在其表面原位还原低表面覆盖度的金纳米颗粒(AuNPs)。以适配体作为选择性识别元件:先将巯基末端适配体固定于AuNPs/石墨烯修饰电极,再引入凝血酶形成适配体–凝血酶复合物;用6-巯基...
本文报道了一种基于表面增强拉曼散射(SERS)和酶促反应的“关闭型”凝血酶检测平台。以约30 nm金纳米粒子(AuNPs)为SERS基底,表面修饰4-巯基苯甲酸(4-MBA)作为拉曼报告分子。多精氨酸肽Arg9(RRRRRRRRR)因带正电可静电诱导带负电的AuNPs聚集,在颗粒间隙形成电磁“热点”,显著增强4-MBA在1077 c...
本文报道了一种简便、通用的适配体无标记荧光检测策略,利用SYBR Green I(SGI)染料选择性、灵敏地检测蛋白质和小分子生物分子。该生物传感方法基于目标诱导的适配体结构转换引起SGI荧光关闭:适配体与目标结合后,从互补DNA/适配体双链中解离,使嵌入双链DNA的SGI释放到溶液中,导致相应荧光强度淬灭。这种目标诱导的构象变化及...
本文报道了一种用于检测人α-凝血酶的高灵敏、高选择性光学传感器体系。制备了表面功能化的发光[Ru(dpsphen)3]4−(dpsphen为4,7-二苯基-1,10-菲啰啉二磺酸盐)掺杂二氧化硅纳米颗粒(SiNPs),粒径约70 nm。以双(磺基琥珀酰亚胺)己酸酯(BS3)为交联剂,将DABCYL(2-(4-二甲氨基苯基)重氮基苯甲...
适配体因高稳定性和低成本,正日益受到生物传感器应用关注,可作为抗体的替代识别元件。凝血酶是凝血级联中的关键酶,已有两种分别结合其不同外位点的适配体被筛选获得。近期凝血酶监测生物传感器研究常利用凝血酶与两种适配体之间可能形成的三明治结构进行信号放大,但多数方法因报告适配体需标记而只能进行终点分析,无法获得复合物形成的实时动力学。本文采...
本文报道了一种基于羧基功能化石墨烯和CdSe纳米粒子的新型光电化学(PEC)生物传感器。首先通过氮烯环加成反应制备羧基功能化石墨烯,将其与氨基化CdSe量子点组装,构建高灵敏度光电化学传感界面。该界面利用双猝灭效应检测凝血酶:一方面,联吡啶鎓(V2+)作为电子转移中继捕获CdSe光生电子;另一方面,金纳米粒子(AuNPs)与CdSe...
蛋白酶在癌症、退行性疾病、凝血障碍、炎症和感染性疾病等多种疾病中发挥关键作用,因此亟需快速、灵敏的蛋白酶检测方法。本文首次报道了一种基于碳纳米管(CNT)的蛋白酶生物传感平台,并采用肽作为荧光探针。以单壁碳纳米角(SWCNHs)和凝血酶(thrombin)为例验证该策略:经硝酸氧化引入羧基的 SWCNHs 可吸附荧光素标记肽(FAM...
本文报道了一种通过π–π相互作用合成3,4,9,10-菲四羧酸(PTCA)/血卟啉(hemin)纳米复合物的简单湿化学策略。hemin 成功将 PTCA 的氧化还原活性协调为一对定义明确的氧化还原峰,并赋予其固有的类过氧化物酶活性,使 PTCA 自身衍生的氧化还原活性可作为氧化还原探针使用。此外,PTCA/hemin 纳米复合物具有...
为改变典型分子适配体信标(MAB)以检测不同分析物,目前需要更换整个传感单元,包括昂贵的荧光标记物。本研究开发了一种基于DNA的可重构分子适配体信标。该传感器由可变部分和恒定部分组成:可变部分包含适配体链及其互补链,恒定部分为双标记Förster共振能量转移(FRET)对的寡核苷酸,两部分通过DNA杂交连接。传感器存在折叠(高FRE...