Journal of cell science
2017
Gallo E, Jarvik JW
本文报道一种新型双组分荧光平台,利用抗体支架的高亲和力和选择性捕获并激活小分子荧光原。作者研究单一单链抗体对多种青素族荧光原的多选择性激活,通过荧光筛选鉴定出三种细胞不可通透荧光原,分别具有蓝、绿、红独特发射光谱和纳摩尔级亲和力。将该抗体作为蛋白融合标签连接至 G 蛋白偶联受体后,生物传感器保留完整活性,在活细胞表面产生明亮荧光且背...
ACS synthetic biology
2016
Ford NR, Hecht KA, Hu D, Orr G 等 8 人
本研究通过遗传改造硅藻 Thalassiosira pseudonana,使其表达靶向生物硅的融合蛋白,包括增强型绿色荧光蛋白(EGFP)或带四半胱氨酸标签(Cy3TAG)的单链抗体。研究重点考察两类位点特异性结合:一是细胞可穿透荧光双砷探针 AsCy3 与 Cy3TAG 标记融合蛋白的结合;二是高、低分子抗原——炭疽杆菌表面层蛋白...
The Analyst
2014
Vistas CR, Soares SS, Rodrigues RM, Chu V 等 6 人
本研究开发了一种基于氢化非晶硅(a-Si:H)光电二极管的微流控生物传感器芯片,用于定量检测 HIV-1 病毒颗粒感染因子(Vif)。芯片集成 23 个 200 μm×200 μm 的 a-Si:H PIN 光电二极管和 a-SiC:H 滤光层,可将 605 nm 荧光转换为光电流,同时阻挡 405 nm 激发光。微流控 PDMS ...
PloS one
2013
Cassimeris L, Guglielmi L, Denis V, Larroque C 等 5 人
GFP标记蛋白常被用作研究蛋白定位与功能的生物传感器,但GFP结构域可能干扰蛋白性质。胞内重组抗体(scFv)可间接标记蛋白,但多数抗体片段在胞质还原环境中不溶。作者从合成超稳定人源scFv文库中筛选出抗微管蛋白scFv 2G4,其以GFP融合蛋白形式在哺乳动物细胞中可溶。本文报道利用2G4-GFP在固定和活细胞中标记微管。结果显示...
Biosensors & bioelectronics
2013
Jeong HJ, Ohmuro-Matsuyama Y, Ohashi H, Ohsawa F 等 7 人
蛋白磷酸化是细胞内信号转导的关键事件,能够特异性识别目标蛋白特定磷酸化位点的荧光生物传感器对细胞生物学研究和药物筛选具有重要价值。波形蛋白(vimentin)是最丰富的中间丝蛋白,其特定丝氨酸残基在细胞周期依赖方式下发生磷酸化,磷酸化会改变蛋白结构与功能特性,进而影响细胞生物学性质。本文报道利用新型荧光生物传感器 Quenchbod...
Journal of the American Chemical Society
2011
Abe R, Ohashi H, Iijima I, Ihara M 等 7 人
本文报道一种新型无试剂荧光生物传感器策略,其原理是抗体结构域上荧光团的淬灭效应随抗原结合而被解除。作者利用无细胞翻译介导的位置特异性蛋白标记系统,将荧光团定点引入抗体单链可变区(scFv)N端,发现 N端标记的 scFv 在结合抗原后出现显著荧光增强。以羧基四甲基罗丹明(TAMRA)标记的抗骨钙素 scFv 为模型,通过突变分析发现...
Biotechnology journal
2009
Falco CN, Dykstra KM, Yates BP, Berget PB
单链抗体(scFv)是由免疫球蛋白重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)通过柔性肽链连接子连接而成的工程蛋白。本研究对从酵母表面展示文库中分离的多个 scFv 荧光激活蛋白(FAP)的单个 VH 或 VL 域活性进行了表征,考察其结合环境敏感荧光染料并使其发荧光的能力。结果显示,许多 scFv 需要 VH 和 VL 两个域共同作用才...