PloS one
2020
Ullrich T, Weirich S, Jeltsch A
细菌活细胞传感器是检测环境毒素的有力工具。本研究建立并验证了基于DNA甲基化记忆功能的大肠杆菌阿拉伯糖传感器系统的流式细胞术读出方法。流式细胞术操作便捷,可实现多参数分析,并提供单细胞异质性信息,有利于此类传感器系统的进一步发展。鉴于抗生素污染与多重耐药病原体的重要性,作者设计了一种四环素传感器系统:通过用编码四环素阻遏蛋白的tet...
Environmental science & technology
2020
Ma Z, Liu J, Li H, Zhang W 等 10 人
土壤可提取抗生素的定量对评估其生物可利用性、迁移性及生态毒理和健康风险具有重要意义。本研究建立了一种基于全细胞生物传感器检测土壤(Alfisol、Mollisol 和 Ultisol)中可提取四环素的方法。该传感器采用携带报告质粒 pMTGFP 或 pMTmCherry 的大肠杆菌 DH5α,质粒中的绿色荧光蛋白(GFP)或单体红色...
Applied microbiology and biotechnology
2013
Song W, Pasco N, Gooneratne R, Weld RJ
细菌呼吸基因 nuoA 曾被用作安培法全细胞生物传感器中检测四环素(Tet)的报告基因。该检测对 Tet 响应灵敏,但高 Tet 浓度下信号下降,可能部分源于转基因过表达;零 Tet 时背景信号也较高,可能因 nuoA 表达未完全抑制。为降低过表达,将传感器细胞在 15 °C 下与 Tet 孵育,并用低拷贝质粒 pBR322 替代高...
Biosensors & bioelectronics
2012
Song W, Pasco N, Gooneratne R, Weld RJ
本研究比较了三种基于基因诱导表达的工程化大肠杆菌生物传感器菌株,用于在SciTox检测体系中安培法测定抗生素四环素(Tet)。三种策略均利用Tn10 tetA启动子响应Tet,分别诱导表达lacZ、selA和nuoA基因。结果表明,lacZ和nuoA生物传感器对亚抑制浓度Tet具有特异且灵敏的响应,而selA体系灵敏度不足。lacZ...
Food additives & contaminants. Part A, Chemistry, analysis, control, exposure & risk assessment
2010
Pikkemaat MG, Rapallini ML, Karp MT, Elferink JW
四环素在兽医领域广泛使用,动物源性食品中残留监测需要快速、低成本的高通量筛查方法。本文对一种已建立的发光细菌细胞生物传感器方法进行了大规模现场评价,使用超过300份常规禽肉样品,并与微生物抑制法平行比较。细胞生物传感器法检出的可疑样品比例明显更高,为10.2%,而抑制法为2%;所有可疑样品均经液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)确...
Journal of agricultural and food chemistry
2008
Virolainen NE, Pikkemaat MG, Elferink JW, Karp MT
本研究采用四环素特异性发光细菌生物传感器 TetLux,建立了一种快速检测鸡肉肌肉组织中四环素类残留的方法,并通过膜通透剂多粘菌素B(PMB)和螯合剂EDTA对检测体系进行增敏,使其满足欧盟对禽肉肌肉中四环素类残留100 µg/kg最大残留限量(MRL)的筛查要求。优化后,多西环素(DC)检出限为5 ng/g,金霉素(CTC)为7....