基于熵驱动 toehold 介导发夹置换（ETHDA），提出一种简便、敏感的一步荧光传感平台，用于评估甲基转移酶（MTase）催化的 DNA 甲基化过程。在该体系中，发夹探针先被 DNA 腺嘌呤甲基化（Dam）MTase 甲基化，再被 DpnI 内切酶切割，释放催化链以启动信号放大。催化链触发 ETHDA 循环过程，使荧光强度增加。...
可逆蛋白质乙酰化是重要的翻译后修饰，主要由组蛋白乙酰转移酶（HATs）和组蛋白去乙酰化酶（HDACs）催化。本文建立了一种无标记荧光均相检测方法，用于检测 HAT/HDAC 活性及其抑制剂。该方法基于 G-四联体（G4）与乙酰化相关肽之间的静电相互作用，引起 G4/硫黄素 T（ThT）复合物荧光强度显著变化。HAT（p300）活性检...
本文报道了一种无标记且灵敏的电化学方法，用于检测柠檬酸合酶（CS）活性。该方法基于对由辅酶A（CoA）-Ag(I)重复单元形成的核酸模拟配位聚合物（CP）的详细研究。其检测机制为：CS可催化乙酰辅酶A（Ac-CoA）与草酰乙酸（OAA）之间的关键缩合反应，生成柠檬酸和CoA；在Ag(I)存在下，由于CoA巯基对Ag(I)的强配位能力...
DNA甲基转移酶（MTase）活性与癌症发生发展密切相关。本文报道一种基于DNA超结构的电化学方法，以M.SssI为例实现DNA甲基转移酶活性的信号放大检测。首先，在金电极表面固定巯基己醇（MCH），形成低密度自组装层，再固定硫醇化DNA双链。无DNA超结构时，该双链可被BstUI限制性内切酶切割；当M.SssI催化CpG甲基化后，...
石墨相氮化碳（g-C3N4）纳米片是一类新兴类石墨烯碳基二维纳米材料，具有高荧光量子产率和较大比表面积，在生物传感器领域具有应用潜力。然而，现有基于g-C3N4的生物传感器多局限于金属离子配位检测，面向通用生物标志物的新设计具有重要意义。本文报道了一种基于g-C3N4纳米片的新颖纳米传感策略，用于高灵敏、单步、无标记检测酪氨酸酶（T...
本文利用含锌四(羧基苯基)卟啉（ZnTCPP）基团的锆基金属有机框架 MOF-525-Zn，构建了一种用于高灵敏蛋白激酶活性检测的新型电化学发光（ECL）生物传感器。作者首次通过 ECL 测量和循环伏安法系统研究了 MOF-525-Zn 在水相中的阴极 ECL 行为。MOF-525-Zn 框架上的光电活性基团 ZnTCPP 可经一系...
本文开发了一种简单灵敏的电化学发光（ECL）生物传感器，用于监测基质金属蛋白酶2（MMP-2）。以特异性肽段CGPLGVRGK作为分子识别底物，将双(2,2′-联吡啶)-4′-甲基-4-羧基联吡啶-钌N-琥珀酰亚胺酯-双(六氟磷酸盐)（Ru1）作为ECL发光物种，通过肽段中赖氨酸残基的氨基经酰化反应共价标记到肽段上，形成Ru1-肽E...
DNA甲基转移酶（MTase）催化DNA甲基化，与癌症和细菌疾病密切相关，其活性检测及抑制剂筛选对疾病诊断和药物研发具有重要意义。本文报道了一种基于Dpn I消化触发多聚腺苷酸（polyA）DNA与金纳米颗粒修饰玻璃碳电极（AuNPs/GCE）结合的电化学策略，用于DNA MTase和抑制剂的简便高效检测。该方法仅使用一条亚甲基蓝（...
本文开发了一种灵敏、通用的电化学发光（ECL）生物传感平台，用于监测蛋白激酶活性与抑制。平台以Ru(bpy)3^2+功能化金纳米颗粒（Ru(bpy)3^2+-AuNPs）介导信号转导；Ru(bpy)3^2+通过静电作用修饰AuNPs，形成硫醇通用信号探针。以酪蛋白激酶II（CK2）和cAMP依赖性蛋白激酶（PKA）为模型，分别用CK...
本文报道了一种基于局域表面等离子体共振（LSPR）增强和染料敏化的可见光光电化学生物传感器，用于超低背景的高灵敏蛋白激酶活性分析。该策略中，DNA偶联金纳米颗粒（DNA@AuNPs）通过Zr4+离子与磷酸基团的螯合作用，组装到磷酸化kemptide修饰的TiO2/ITO电极上，随后[Ru(bpy)3]2+嵌入DNA沟槽。可见光照射下...
本研究开发了一种基于未修饰金纳米颗粒（AuNPs）的比色传感器，用于灵敏检测α-葡萄糖苷酶活性并筛选α-葡萄糖苷酶抑制剂（AGIs）。传感策略基于α-葡萄糖苷酶触发的三重催化反应。在α-葡萄糖苷酶存在时，体系中半胱氨酸被氧化为胱氨酸，从而抑制AuNPs聚集；加入AGIs后，酶活性受抑，半胱氨酸诱导的AuNPs聚集恢复。通过紫外-可见...
监测蛋白激酶活性和筛选抑制剂对激酶相关药物发现、疾病早期诊断及疗效评价具有重要意义。本文开发了一种基于羧肽酶Y（CPY）消化触发信号放大的简单电化学方法，用于检测酪蛋白激酶II（CK2）活性。在该策略中，CK2催化底物肽发生磷酸化，磷酸化位点保护底物肽免受CPY从C端水解，使电极表面保留带负电的肽片段，从而维持对氧化还原探针Fe(C...
本文描述了用于富亮氨酸重复激酶2（LRRK2）的选择性活性探针的设计、合成与评价。LRRK2是帕金森病治疗的潜在分子靶点。作者的最优化学传感器设计称为Nictide-S2，其在底物序列的工程化半胱氨酸位点引入磷酸化敏感的磺酰胺-8-羟基喹啉荧光团。该设计允许对LRRK2激酶活性进行直接、实时分析，检测限为2.5 nM。在优化条件下，...
乙酰胆碱酯酶（AChE）在神经信号传递中通过水解乙酰胆碱发挥关键作用，其活性检测与抑制研究对阿尔茨海默病诊断、药物筛选及有机磷农药检测具有重要意义。现有方法常存在灵敏度不足、耗时长、假阳性或操作不便等问题。本文发展了一种基于特异性硫醇—马来酰亚胺加成反应与光子多孔结构协同的反应型光子检测策略，用于高效测定AChE活性及抑制。该策略可...
本文报道一种创新安培生物传感器，用于体外测定大肠杆菌转酮醇酶（transketolase from Escherichia coli, TKec）活性，使用商品化 TK 底物：D-果糖-6-磷酸（D-F6P，生理供体）和乙二醛（glycolaldehyde, GA，最佳非磷酸化受体）。基于将半乳糖氧化酶（galactose oxid...
本文报道了一种基于酶功能化金纳米粒子多功能纳米探针的电化学发光（ECL）生物传感器，用于高灵敏监测蛋白激酶活性及其抑制。该传感器以金电极为工作电极，表面自组装半胱氨酸终止肽并用硫醇己醇封闭；蛋白激酶A（PKA）与ATP孵育后催化肽磷酸化，生物素化抗磷酸丝氨酸抗体识别磷酸丝氨酸，亲和素桥接GOx/Au NPs/DNA-biotin纳米...
端粒酶是重要的肿瘤生物标志物，在超过85%的人类肿瘤中过表达，可用于早期癌症诊断和治疗靶点研究。本文报道了一种基于结构转换DNA探针的电化学生物传感器，用于灵敏检测端粒酶活性。该传感器以金电极为基底，将巯基修饰探针S1自组装固定于电极表面，S1包含端粒酶引物序列、识别区和胸腺嘧啶间隔序列；二茂苯（Fc）标记探针S2与S1杂交，使Fc...
DNA甲基化在基因调控和多种疾病（尤其癌症）中具有重要作用，其催化酶DNA甲基转移酶（MTase）活性检测具有重要意义。本文报道了一种可见光激活的光电化学生物传感器，用于检测DNA MTase活性。该传感器以氧化铋碘（BiOI）纳米片作为光活性电极材料，以M. SssI MTase作为甲基化试剂，以甲基结合域蛋白（MBD1）作为甲基...
本文报道了一种基于金纳米颗粒（AuNPs）荧光偏振增强效应和λ核酸酶（λ exo）切割反应的荧光偏振（FP）纳米传感器，用于检测T4多聚核苷酸激酶（T4 PNK）活性及其抑制。该传感器以3'端修饰AuNPs的DNA发夹探针为T4 PNK底物，在ATP存在下，T4 PNK将DNA 5'-羟基磷酸化，λ exo随即切割5'-磷酸化末端，...
本文报道了一种基于石墨烯修饰玻璃碳电极（G/GCE）的简单、超灵敏、无标记电化学方法，用于评价蛋白酪氨酸激酶（PTK）活性及其抑制。石墨烯可通过电催化氧化反应增强酪氨酸（Tyr）残基的电化学响应；激酶催化磷酸化后，磷酸化酪氨酸（pTyr）呈电不活性，使 Tyr 氧化电流降低。因此，肽中 Tyr 残基的电化学信号可作为内源信号报告物，...