Lateral Flow Test for Visual Detection of Multiple MicroRNAs.
本文报道了一种基于侧流核酸生物传感器(LFNAB)的快速、低成本多重microRNA(miRNA)检测方法。该方法以夹心型核酸杂交反应为基础:样品中的目标miRNA先与结合垫释放的金纳米颗粒(GNP)标记单链DNA探针杂交,再被硝酸纤维素膜测试区固定的捕获探针捕获,形成ssDNA-miRNA-ssDNA/GNP复合物并聚集显色。通过...
本文报道了一种基于侧流核酸生物传感器(LFNAB)的快速、低成本多重microRNA(miRNA)检测方法。该方法以夹心型核酸杂交反应为基础:样品中的目标miRNA先与结合垫释放的金纳米颗粒(GNP)标记单链DNA探针杂交,再被硝酸纤维素膜测试区固定的捕获探针捕获,形成ssDNA-miRNA-ssDNA/GNP复合物并聚集显色。通过...
本文提出对一种用于短非编码 RNA 检测的核酸生物传感器进行结构改造与化学修饰,以解决复杂生物基质中 RNA 分析面临的非特异结合和内源核酸酶降解问题。该传感器由 Reporter 和 Probe 两条部分互补核酸链组成,通过链置换与 FRET 荧光增强机制检测目标 RNA。研究在 Probe 3'端引入 DNA 茎区,提高 Rep...
基因组编辑技术已应用于食品与生物产品,亟需快速、低成本的分析方法。本文提出一种用于检测基因组编辑诱导缺失的快速低成本策略,将快速多重连接依赖性探针扩增(rapid-MLPA)与双侧流核酸生物传感器(dual-LFNAB)级联,用于单拷贝案例。rapid-MLPA 以左右探针杂交、Ligase-65 连接和带标签引物 PCR 取代常规...
利用高灵敏且高选择性的分析装置检测生物标志物,对疾病的早期诊断和治疗具有重要意义。核酸识别单元的高特异性与电化学信号转导的高灵敏度相结合,已展现出构建高效生物传感平台的巨大潜力。然而,基于核酸的电化学生物传感器通常需要依赖目标扩增策略(如聚合酶链式反应)才能在临床相关浓度范围内检测分析物;这些扩增方法复杂且耗时,限制了该类传感器从实...
本文提出一种无酶电化学传感策略,用于敏感检测 DNA 和 miRNA。该策略将 Mg2+ 依赖型 DNAzyme 的循环切割反应与二茂铁标记发夹探针 H-1 和氮掺杂还原氧化石墨烯/β-环糊精聚合物(NRGO/β-CDP)纳米复合材料之间的主客体包合相结合。NRGO/β-CDP 修饰玻璃碳电极构建传感平台。无目标时,S-1 茎区杂交...
microRNA(miRNA)是多种疾病的重要生物标志物,准确定量分析其表达水平对生物医学研究和临床诊疗具有重要意义。本研究建立了一种基于双链特异性核酸酶(DSN)和杂交链式反应(HCR)双信号放大的miRNA敏感、特异性检测方法。设计并合成报告探针(RP),其3'端生物素修饰的识别序列可结合miR-21,5'端Fam修饰的捕获序列...
本研究开发一种基于杂交链反应(HCR)信号放大的侧流核酸生物传感器(LFNAB),用于低成本、高灵敏的核酸可视化检测。采用“夹心型”策略,构建捕获探针(CP)/靶DNA/报告探针(RP)-HCR复合物作为传感平台。RP作为起始链,引发两个生物素修饰发夹探针之间的链式杂交,形成带生物素的长缺口双链DNA聚合物;该聚合物通过链霉亲和素(...
已报道的DNA甲基化诊断技术通常需要标准曲线定量或准确性有限,且难以同时获得特定连续多位点的甲基化水平,操作也较繁琐。本文提出一种级联策略,将比例竞争定量PCR(PCQ-PCR)与侧流核酸生物传感器(LFNAB)结合,用于准确且易用的甲基化评估。研究以具有多个甲基化位点的P16抑癌基因为模型。PCQ-PCR基于比例原则扩增出含多甲基...
本研究首次报道了一种干试剂核酸传感平台,将热稳定指数后线性(LATE)PCR检测与一步杂交型核酸侧流生物传感器相结合。该平台旨在克服试剂运输或储存过程中对严格温控的需求,并通过降低整体检测复杂性和操作时间减少对有经验人员的依赖。研究以易引起霍乱流行和大流行的产毒霍乱弧菌为模型生物。该生物传感器可产生肉眼可见结果,检出限为1 pg纯基...
本文报道了首批基于量子点(QD)作为报告物的试纸条型核酸生物传感器。该侧流装置可省去移液、孵育和洗涤等步骤,通过目标DNA与互补序列杂交实现序列确认,并在紫外灯下以肉眼观察QD发射的荧光。诊断膜包含检测区(TZ)和控制区(CZ):CZ始终显色以确认试纸功能正常,TZ仅在特定核酸序列存在时显色。作者开发了I型和II型传感器,其TZ分别...
本文报道了一种基于DNA-金纳米颗粒(DNA-GNP)的侧流核酸生物传感器,用于在水溶液和生物样品中低成本、快速视觉检测microRNA-215(miRNA-215)。该传感器利用金纳米颗粒标记的DNA探针、miRNA-215与生物素修饰DNA探针在侧流试纸条上发生夹心型杂交反应;当目标miRNA存在时,GNP-DNA/miRNA复...
本文提出一种基于蓝色染料掺杂乳胶微球的干试剂侧流核酸生物传感器(LFNB),并考察其检测血浆中脱氧核糖核酸(DNA)的可行性。研究选用一段60碱基DNA序列(T1)作为模型靶标。携带DNA探针的蓝色染料掺杂乳胶微球在目标DNA存在时被捕获于试纸条检测线,形成明显蓝色条带;定性结果可通过观察检测区颜色变化获得,定量数据则通过便携式试纸...
基于表面等离子共振(SPR)的生物传感器已成为研究并定量生物分子及其相互作用的核心工具。核酸(NA)在遗传信息存储、传递、表达及调控等生物过程中发挥关键作用,因此一直是SPR生物传感器的重要检测对象。本文综述了核酸SPR传感技术的发展进展,系统讨论了其在涉及核酸的分子相互作用研究中的应用,包括核酸–核酸、核酸–蛋白和核酸–小分子相互...
核酸生物传感器在遗传学和生物医学中的应用日益增多。本文系统评述了核酸类似物,尤其是肽核酸(PNA)和锁核酸(LNA)用于开发高性能亲和生物传感器的研究现状。PNA和LNA对天然核酸具有突出亲和力,且含PNA或LNA的杂合双链中碱基错配导致的去稳定化效应显著高于双链DNA或RNA,因此基于PNA和LNA的生物传感器具有前所未有的灵敏度...
本文开发了一种基于18-mer单链核酸探针吸附固定在活化铅笔石墨电极上的生物传感器,用于检测登革病毒1型特异性寡核苷酸序列。通过差分脉冲伏安法(DPV)监测鸟嘌呤氧化,研究探针与互补寡核苷酸靶标之间的杂交。工作电极采用普通4B铅笔芯,抛光表面经1.8 V、5 min活化;随后在0.5 M醋酸缓冲液(pH 5.0)中施加0.5 V、5...
核酸传感在基础与应用化学研究中备受关注,成功构建核酸传感器的关键之一是探针设计及其在芯片表面的固定。本文证明,理性选择生物探针会显著影响传感器的分析性能。作者采用一种简单且免费可用的计算程序,对给定靶序列进行探针设计,并将结果直接应用于核酸传感。研究建立了一套优化且可重复的计算机辅助探针设计策略,并以光学换能实验加以验证。其中,表面...
本文报道了一种基于辣根过氧化物酶(HRP)–金纳米颗粒(Au-NP)双标记和侧流层析试纸条生物传感器(LFSB)的超灵敏核酸生物传感器(NAB)。该工作在前人研究基础上优化了HRP–Au-NP–DNA偶联物的制备,发现十二烷基硫酸钠(SDS)以及巯基化DNA和HRP在Au-NP表面的固定顺序对提高检测灵敏度具有重要作用。经系统优化后...
铜是多种酶和蛋白质的必需辅因子,但过量摄入可致胃肠不适、肝肾损伤及认知障碍,美国环保署规定饮用水中铜离子最大污染浓度为20 μM。传统ICP、原子吸收等方法依赖昂贵仪器和专业技术人员。本文报道一种基于铜依赖DNA切割DNAzyme和金纳米颗粒(Au-NP)的侧流核酸生物传感器(LFNAB),用于水溶液中Cu2+的视觉检测。作者设计4...
登革热是由埃及伊蚊传播的病毒性疾病,现有诊断技术复杂、耗时且昂贵,难以在疾病高发的发展中国家推广。本文报道了一种用于快速识别登革病毒基因组相关序列的模块化生物传感器。该传感器由寡核苷酸连接子模块、适配体/限制性内切酶信号转导模块和荧光信号分子组成。连接子具有茎环结构,环区含目标互补序列,茎区含触发序列;与目标核酸结合后,变性茎区的触...
本文报道了一种一次性核酸生物传感器(DNAB),可在15 min内低成本、高灵敏地检测核酸样品。该传感器结合金纳米颗粒(Au-NP)的独特光学性质与层析分离的高效性,在侧流试纸条上实现夹心型DNA杂交反应,避免了传统核酸生物传感器中多次孵育、分离和洗涤步骤。检测区和控制区捕获的Au-NP探针产生特征红色条带,无需仪器即可目视检测核酸...