本文报道了一种用于检测单链病原DNA的无标记生物传感器。该传感器利用金纳米线（AuNW）与接枝在AuNW表面的引物DNA之间发生的目标增强凝胶化实现检测。目标DNA能够与线性DNA模板两端互补，使线性DNA环化；随后，固定在AuNW上的引物DNA通过滚环扩增（RCA）被连续延伸。在目标DNA存在时，延伸产生的长链DNA与作为支架纤维...
由于疾病标志物在体液或组织中含量极低，超灵敏蛋白检测方法对基础研究和实际应用至关重要。本文报道了一种基于金纳米颗粒（AuNPs）和滚环扩增（RCA）的灵敏比色生物传感器，用于蛋白检测。当目标蛋白存在时，生物素化引物/环状模板通过生物素-链霉亲和素作用结合到链霉亲和素标记的夹心酶联免疫复合物上，随后生物素化引物在等温条件下延伸，生成单...
本文报道了一种用于监测滚环扩增（RCA）的比色方法，以检测 H5N1 流感病毒。首先，H5N1 目标序列与锁式探针（PLP）杂交，随后在 T4 DNA 连接酶作用下使 PLP 环化。环化探针作为模板，在大片段 Bst DNA 聚合酶催化下进行超支滚环扩增（HRCA）。反应过程中 DNA 聚合产生焦磷酸（PPi），PPi 螯合缓冲液中...
本研究构建了一种基于Pb2+诱导DNAzyme辅助靶标循环和滚环扩增（RCA）的双放大“off-on”电化学发光（ECL）生物传感器，用于microRNA（miRNA）检测。首先，引物探针与辅助探针和miRNA形成Y型连接，加入Pb2+后发生切割并释放miRNA。随后，释放的miRNA可启动下一轮循环，产生大量中间DNA序列（S2）...
本研究开发了一种基于目标引物滚环扩增（RCA）的表面等离子共振（SPR）DNA生物传感器阵列，用于等温、快速检测结核分枝杆菌复合群（MTBC）和鸟分枝杆菌复合群（MAC）两种致病分枝杆菌。针对16S–23S rRNA基因内部转录间隔区（ITS）设计种特异性锁探针（PLP）。PLP与目标序列杂交后经连接环化，目标序列可作为引物启动RC...
本文报道了一种基于光磁读出和体积放大磁性纳米珠的霍乱弧菌DNA序列检测方法。该方法在垂直于光路的弱单轴交流磁场作用下，测量含有寡核苷酸标记磁性纳米珠和单链DNA大分子线圈的样品中激光透射强度的调制。目标DNA与锁式探针（padlock probe）两端互补配对并经连接酶连接成环，随后通过滚环扩增（RCA）形成长单链DNA线圈。目标存...
本文报道了一种基于滚环扩增（RCA）的单色量子点–钌配合物（QDs–Ru）组装二聚体均相荧光DNA生物传感器。该策略包括三步：首先，目标DNA启动RCA反应并产生线性RCA产物；其次，互补DNA与RCA产物杂交形成长双链DNA（dsDNA）；最后，[Ru(phen)2(dppx)]2+嵌入长dsDNA并发出强荧光。由于该钌配合物与长...
本文报道一种新型石英晶体微天平（QCM）蛋白检测平台，以溶菌酶为模型蛋白。为提升 QCM 灵敏度，首次将生物催化沉淀（BCP）反应与链断裂循环（nicked circling/strand-scission cycle）及滚环扩增（RCA）联合用于适配体传感器。首先，固定在羧基磁珠上的溶菌酶适配体与互补寡核苷酸 S1 杂交；加入溶菌...
本研究建立了一种结合滚环扩增（RCA）与DNA-金纳米颗粒（DNA-AuNPs）探针的新型电化学传感策略，用于快速超灵敏检测沙门氏菌。目标DNA首先被传感界面上的捕获探针1特异性捕获，随后加入环化混合物形成典型三明治结构。在dNTP和phi29 DNA聚合酶存在下启动RCA，产生微米级长单链DNA，其重复序列可结合大量DNA-AuN...
本研究建立了一种基于滚环扩增（RCA）和金纳米颗粒（AuNPs）表面的表面等离子共振（SPR）DNA生物传感器，用于病原菌DNA的等温快速鉴定。该传感器探针包括特异性锁式探针（padlock probe, PLP）、生物素化捕获探针（capture probe, CP）以及与RCA产物杂交的金纳米颗粒修饰探针（AuNP-MP）。线性...
本文报道了一种基于分子信标介导环状链置换与滚环扩增的新型电化学生物传感策略，用于靶DNA的超灵敏特异检测。该策略将分子信标（MB）介导的环状链置换（CSD）、滚环扩增（RCA）、生物素-链霉亲和素系统和酶促放大级联。靶DNA与固定于金电极上的MB探针环部杂交，触发CSD，产生多个生物素标记DNA双链。随后通过生物素-链霉亲和素相互作...
本研究利用ATP依赖性酶促反应（ATP-DER）、滚环扩增（RCA）的强信号放大能力以及羟胺放大的金纳米颗粒（Au NPs），构建了一种高灵敏、高选择性检测三磷酸腺苷（ATP）的化学发光（CL）生物传感器。该策略基于ATP作为T4 DNA连接酶的辅因子，可触发连接–RCA反应。在ATP存在时，T4 DNA连接酶催化锁式探针两端连接，...
基于内切酶（NEase）辅助目标循环和滚环扩增（RCA）原位生成大量G-四链体/血红素（hemin）复合物，本文开发了一种双放大、超灵敏电化学生物传感器，用于检测人p53基因突变DNA。目标突变DNA与自组装在金电极上的双硫醇修饰发夹探针（HP）环区杂交，形成NEase识别位点；NEase切割HP并释放目标DNA，释放的目标DNA再...
本文首次将滚环扩增（RCA）应用于硅纳米线场效应晶体管（SiNW-FET），提出一种快速、无标记且高特异性的DNA检测方法。作者采用与CMOS兼容的各向异性自停止刻蚀工艺制备高响应SiNW阵列，避免混合工艺。探针DNA固定于SiNW表面后，与完全匹配的靶DNA及RCA引物进行夹心杂交；RCA引物进一步与RCA模板杂交，经DNA连接酶...
本研究开发了一种表面等离子共振（SPR）DNA 生物传感器方法，利用表面锚定滚环扩增（RCA）和金纳米粒子修饰探针（AuNPs），等温检测多药耐药结核分枝杆菌（MDRTB）中与耐药相关的多个点突变。探针组包含等位基因特异性锁探针（PLP）、捕获探针和 AuNPs。线性 PLP 在识别 DNA 靶标上的点突变后，经连接酶环化，并通过特...
本研究建立了一种基于滚环扩增（RCA）和纳米颗粒聚集的电化学生物传感器，用于高灵敏度识别DNA和癌细胞。首先，在磁性微球表面构建含目标DNA的“三明治型”DNA复合物；随后，该复合物中的引物部分在体系中诱导RCA反应；接着，将长链RCA产物酶切消化，构建用于电化学检测的另一“三明治型”DNA复合物。差分脉冲伏安法（DPV）获得高信号...
本文报道了一种稳健、选择性且高灵敏的化学发光（CL）蛋白检测平台。该方法以滚环扩增（RCA）作为信号增强策略，以96孔板作为固定与分离载体。典型流程中，先将抗体固定于96孔板表面，再与目标蛋白及适配体–引物序列形成夹心复合物；该适配体–引物序列随后作为RCA引物。基于此设计，可在孔板表面捕获大量生物素化探针及链霉亲和素–辣根过氧化物...
本文首次对功能化磁性纳米珠与DNA线圈之间的相互作用进行实空间表征。研究以滚环扩增（RCA）形成的DNA线圈为识别/放大元件，将氨基修饰的磁赤铁矿纳米珠（Nanomag-D NH2，40和130 nm）表面偶联硫醇化寡核苷酸探针，使其与DNA线圈互补序列杂交固定。作者结合复杂磁化测量与透射电子显微镜（TEM），统计每个DNA线圈上结...
本文报道一种无需荧光或放射性标记的自组装光学衍射生物传感器，利用滚环扩增（RCA）和磁性微珠实现信号放大。在镀金玻璃片上用PDMS印章微接触印刷15 μm宽交替链霉亲和素线条，固定生物素化捕获适配体，特异性捕获血小板衍生生长因子B链（PDGF-BB）。二级适配体-引物复合物结合目标蛋白后，垫锁探针杂交并经DNA连接酶环化，形成RCA...
本文研究体积放大磁性纳米珠检测法中珠尺寸、珠表面探针寡核苷酸覆盖度、珠浓度和滚环扩增（RCA）时间对检测机制的影响，以改进对该生物传感器微观机制的理解。该检测法将锁探针（padlock probe）靶标识别、RCA信号放大与布朗弛豫磁性纳米珠读出相结合。主要发现包括：（i）小尺寸磁性珠交叉连接多个RCA产物的倾向显著降低，因此可同时...