REV, A BRET-Based Sensor of ERK Activity.
细胞信号网络在环境刺激下被激活，其特异性取决于下游通路在时间和空间上的动态整合。为解析单一信号通路的动态调控，研究者开发了多种活细胞生物传感器。生物发光共振能量转移（BRET）技术因无需荧光激发、信噪比高，特别适合监测活细胞中的蛋白互作或构象变化。细胞外调节激酶（ERK）广泛表达并参与增殖、分化、神经可塑性、存活和凋亡等多种功能，其...
BRET Biosensor Analysis of Receptor Tyrosine Kinase Functionality.
生物发光共振能量转移（BRET）是用于分析生物分子蛋白相互作用的改进型共振能量转移技术。BRET可应用于多种跨膜受体，但早期文献多集中于G蛋白偶联受体（GPCR），而用于受体酪氨酸激酶（RTK）活性研究的报道相对有限。这一现象令人意外，因为RTK常以二聚化作为激活关键，并且是癌症、糖尿病、神经退行性和呼吸系统疾病的重要治疗靶点。本综...
BRET approaches to characterize dopamine and TAAR1 receptor pharmacology and signaling.
本文介绍基于生物发光共振能量转移（BRET）的新型生物传感器在活细胞中实时表征多巴胺D2受体（D2R）与痕量胺相关受体1（TAAR1）药理学和信号转导的方法。D2R和TAAR1等G蛋白偶联受体既可介导G蛋白依赖的cAMP信号，也可介导G蛋白非依赖的β-arrestin2募集信号。利用EPAC cAMP生物传感器可实时监测细胞内cAM...
Advantages of substituting bioluminescence for fluorescence in a resonance energy transfer-based periplasmic binding protein biosensor.
本研究构建了一种遗传编码麦芽糖生物传感器，由麦芽糖结合蛋白（MBP）N端融合绿色荧光蛋白（GFP2）、C端融合海肾荧光素酶变体（RLuc2）组成，形成生物发光共振能量转移（BRET2）检测系统。麦芽糖结合诱导 MBP 构象变化，使供体 RLuc2 与受体 GFP2 距离缩短，BRET 比率升高。与等效 FRET 传感器相比，BRET...