Intracellular Ionic Strength Sensing Using NanoLuc.
细胞内离子强度通过调节蛋白质活性、聚集、相分离和细胞体积等过程，影响细胞存活与增殖，并可因离子通道活性或微环境渗透压改变而变化，因此需要实时监测工具。本文开发了一种基于 NanoLuc 荧光素酶的生物发光细胞内离子强度传感策略。重组纯化蛋白实验表明，NanoLuc 生物发光在宽范围缓冲液离子强度条件下具有离子强度依赖性；高离子强度下...
A novel luminescent biosensor for rapid monitoring of IP3 by split-luciferase complementary assay.
肌醇1,4,5-三磷酸（IP3）是调控多种生理信号过程的关键第二信使，其含量异常与多种疾病相关，因此需要快速、灵敏且可高通量监测IP3动态变化的方法。本文报道了一种基于分裂荧光素酶互补策略的新型发光生物传感器，用于直接检测IP3。该传感器将人源IP3受体2型（IP3R2）的IP3结合核心域（IBC）融合于萤火虫荧光素酶（FLuc）两...
Ligand-directed tosyl chemistry for protein labeling in vivo.
本文报道了配体导向甲苯磺酰（LDT）化学方法，用于在活体条件下将合成分子位点选择性地连接到特定内源蛋白。该方法利用蛋白配体与靶蛋白高亲和结合，通过邻近效应驱动亲电苯磺酸酯与蛋白表面亲核氨基酸发生SN2反应，在标记探针的同时释放配体，避免活性位点被永久占据。作者以碳酸酐酶（CA）为模型，合成含苯磺酰胺配体和荧光、生物素或19F NMR...