Development of FRET Biosensor to Characterize CSK Subcellular Regulation.
C-terminal Src kinase（CSK）是Src家族激酶（SFKs）的主要抑制性激酶，通过磷酸化其C端酪氨酸位点调控多种细胞活动。作为胞质蛋白，CSK需被招募至质膜以调控SFKs活性，但其活性调控机制和亚细胞定位仍不清楚。本研究开发了一种基于荧光共振能量转移（FRET）的基因编码生物传感器，用于在活细胞中可视化CSK活性...
Genetically Encoded FRET Biosensor for Visualizing EphA4 Activity in Different Compartments of the Plasma Membrane.
EphA4 受体酪氨酸激酶在发育、癌症进展和神经疾病中发挥关键作用，但其激酶活性在时间和空间上的调控机制仍不清楚。为可视化细胞质膜不同微区中的 EphA4 活性，作者开发了一种基于 Förster 共振能量转移（FRET）的高灵敏 EphA4 生物传感器，并通过脂质修饰将其靶向至脂筏样微区内部或外部。结果表明，该传感器在体外和活细胞...
Sensitive FRET Biosensor Reveals Fyn Kinase Regulation by Submembrane Localization.
Fyn 激酶在血液系统和 T 细胞信号转导中发挥关键作用，但目前缺乏在活细胞中直接可视化其动态活性的工具。本研究开发并表征了一种基于荧光共振能量转移（FRET）的高灵敏 Fyn 激酶生物传感器，用于在活细胞中监测 Fyn 活性。结果显示，配体结合可在小鼠胚胎成纤维细胞（MEF）和 T 细胞中诱导 Fyn 激酶活性。进一步引入两种不同...
FRET-based Visualization of PDGF Receptor Activation at Membrane Microdomains.
血小板衍生生长因子受体（PDGFR）感知胞外生长因子并将信号转入细胞内，调控细胞增殖、迁移和存活。关于 PDGFR 位于哪些膜微区以及如何在不同微区调控多种胞内信号通路，仍存在争议。本研究开发了一种基于荧光共振能量转移（FRET）的新型 PDGFR 生物传感器，可在活细胞中以高时空分辨率实时检测 PDGFR 活性。为研究膜微区中的亚...
Role of membrane microdomains in compartmentation of cAMP signaling.
将 cAMP 生成限制在特定亚细胞位置可选择性调控功能反应，但 cAMP 信号如何被限制仍不清楚。负责 cAMP 生成的不同受体和腺苷酸环化酶亚型在质膜脂筏与非脂筏区室中分布不均。本研究在 HEK293 细胞中考察膜微区对 cAMP 反应的组织作用。使用自由扩散的 FRET 型生物传感器 Epac2-camps 测量全局 cAMP ...
Detection of focal adhesion kinase activation at membrane microdomains by fluorescence resonance energy transfer.
细胞黏附激酶（FAK）的正确亚细胞定位对细胞黏附、迁移和力学转导等过程至关重要，但其在不同膜微区中的活性调控机制仍不清楚。为在活细胞中可视化不同膜微区的 FAK 活性，作者开发了一种基于荧光共振能量转移（FRET）的 FAK 生物传感器，并通过脂质修饰将其靶向至去垢剂抵抗膜（DRM）区域或非 DRM 区域。结果显示，在细胞黏附到细胞...