Applied microbiology and biotechnology
2018
Zhang C, Parrello D, Brown PJB, Wall JD 等 5 人
本研究构建了一种新型铜绿假单胞菌 PAO1 全细胞生物传感器,用于非侵入性、同时监测其体内 las、rhl、pqs 和 iqs 四个群体感应(QS)网络的基因表达。该传感器以 PAO1 为宿主,携带 pSEVA-QSGEF 质粒,将 lasI、rhlI、pqsA 和 ambB 的启动子分别连接 Turbo YFP、mTag BFP2...
Biotechnology journal
2018
Hashi H, Nakamura Y, Ishii J, Kondo A
神经紧张素受体1(NTSR1)是G蛋白偶联受体(GPCR)家族成员,可被神经紧张素肽激活并引发多种生理效应。酿酒酵母是检测人GPCR激动激活的成熟宿主体系。前期研究表明,酵母可功能表达人NTSR1,并利用ZsGreen荧光报告基因检测神经紧张素诱导的信号;但相比表达其他人GPCR(如生长抑素受体)的酵母,NTSR1表达酵母的荧光强度...
Biotechnology and bioengineering
2018
Woolston BM, Roth T, Kohale I, Liu DR 等 5 人
甲醛是常见环境毒素,也是单碳代谢中的关键中间体。监测甲醛浓度对环境监测和天然或合成甲基营养微生物的代谢工程均具有重要意义,但现有方法存在灵敏度低、流程复杂或依赖昂贵分析设备等问题。本文基于大肠杆菌 FrmR 阻遏蛋白及其同源启动子开发了一种甲醛生物传感器。通过优化天然阻遏蛋白结合位点和调控架构,该传感器可检测低至 1 μM 的甲醛。...
Sensors (Basel, Switzerland)
2017
Schuller A, Rödel G, Ostermann K
双氯芬酸是一种广泛使用的非甾体抗炎药,也是水环境中受关注的人为污染物,现有检测多依赖化学和物理方法。本文报道一种基于酿酒酵母 PDR5 启动子的全细胞生物传感器,用于检测双氯芬酸。PDR5 编码参与细胞解毒的多药转运体,其启动子可被双氯芬酸诱导。作者将 PDR5 天然或人工 5′ 上游调控序列与荧光蛋白报告基因 TGFP/TRFP ...
Methods in molecular biology (Clifton, N.J.)
2017
Bernard E, Wang B
细菌生活在不断变化环境中,为适应生理状态必须感知环境变化。当前对信号检测与处理机制及元件的理解,使我们能够利用一系列遗传元件处理环境信息。类似工程师使用电子元件构建电路,可重新连接细胞元件,构建数字逻辑和模拟基因电路,以编程方式使细胞对特定刺激产生设计行为。本文介绍设计和实现合成细胞基生物传感器的方法与协议,这些传感器利用工程化遗传...
Sheng wu gong cheng xue bao = Chinese journal of biotechnology
2016
Wang W, Ji S, Huang Z, Lu B 等 5 人
为构建一种高灵敏、高特异性的砷离子荧光报告大肠杆菌菌株,本研究利用基因敲除技术敲除大肠杆菌中负责向胞外转运砷离子的 arsB 基因,获得对 As3+ 敏感的突变株;同时构建含砷检测元件 Pars-arsR-egfp 的融合载体 pET28b-Pars-arsR-egfp,并将其转化至 arsB 敲除菌中,完成敏感型 As3+ 检测菌...
Lab on a chip
2016
Buffi N, Beggah S, Truffer F, Geiser M 等 7 人
活细菌或酵母细胞常作为生物报告细胞用于检测特定化学分析物或样品毒性。特别是携带合成基因线路、可在特定靶标诱导下产生可靠非天然信号(如荧光蛋白或生物发光)的细菌或酵母,可构建稳健灵活的检测平台。本文报道了主要用于批量样品分析的荧光报告细菌(bactosensor)如何被部署到单一紧凑型生物芯片中,实现自动半连续靶标分析。基于大肠杆菌的...
Molecular biotechnology
2015
Espinosa-Urgel M, Serrano L, Ramos JL, Fernández-Escamilla AM
有毒有机化合物和抗菌药物污染是多重耐药病原菌增多的原因之一,因此监测污染是控制抗菌药物耐药性的首要步骤,需要开发能够广谱、简单、灵敏且定量检测有毒化合物的工具。本研究基于假单胞菌 Pseudomonas putida 中 TtgR 阻遏蛋白调控的 ttgABC 外排泵启动子,构建了新型微生物生物传感器,并将绿色荧光蛋白(GFP)报告...
Methods in molecular biology (Clifton, N.J.)
2013
Prow TW, Sundh D, Lutty GA
非侵入检测体内对活性氧(ROS)的生物反应,有助于阐明发育动态、治疗效果、药物发现、致病过程及疾病预防等机制。ROS 研究通常依赖缺乏转化意义的体外模型。纳米级(<100 nm)颗粒因尺寸小、组装灵活、毒性谱良好,是生物传感器技术的理想载体和平台。ROS 激活的细胞内信号通路已有充分记录,且存在大量可利用荧光蛋白进行非侵入监测的遗传...
Developmental biology
2012
Moro E, Ozhan-Kizil G, Mongera A, Beis D 等 15 人
在细胞迁移、分化与形态发生过程中,能够解析特定细胞信号事件在活体内时空激活的分子工具对发育细胞生物学具有重要意义。本文报道了两种用于 Wnt/β-catenin 信号通路的转基因报告品系 TCFsiam 的构建、验证与应用,并证明它们是可靠且敏感的 Wnt 生物传感器,可用于活体研究。结果显示,这些品系能在多种细胞背景下敏感检测 W...
Applied and environmental microbiology
2012
Choe SI, Gravelat FN, Al Abdallah Q, Lee MJ 等 6 人
砷污染地下水是全球重大公共卫生问题,亟需安全、快速的现场检测方法。为开发真菌砷生物传感器,作者基于基因组同源性在黑曲霉(Aspergillus niger)中鉴定出7个候选砷代谢与转运基因。实时RT-PCR显示,在砷酸盐诱导下,编码质膜亚砷酸盐外排泵的acrA基因表达上调超过200倍,且低浓度砷酸盐即可显著诱导。通过基因敲除、互补实...
Environmental pollution (Barking, Essex : 1987)
2012
Liu P, Huang Q, Chen W
本研究通过 lacZ 基因融合研究了假单胞菌 Pseudomonas putida X4 中不同 czcRS 操纵子的诱导性与特异性。β-半乳糖苷酶活性结果表明,czcR3 启动子可定量响应锌。作者将无启动子增强型绿色荧光蛋白(egfp)基因与 czcR3 启动子融合并整合到 P. putida X4 染色体中,构建了锌特异性全细胞...
Journal of applied microbiology
2011
Power B, Liu X, Germaine KJ, Ryan D 等 6 人
本文评估藻酸盐微球作为储存、递送和包容系统,用于多氯联苯(PCBs)降解菌Pseudomonas fluorescens F113Rifpcb及两个PCB生物传感器菌株F113Rifgfp和F113L::1180gfp在污染土壤中的应用。F113Rifpcb为工程根际菌,可降解PCBs;F113Rifgfp和F113L::1180g...