Methods in molecular biology (Clifton, N.J.)
2014
Colombo S, Martegani E
Ras蛋白在进化中高度保守,是真核细胞多条信号通路的汇聚点,参与糖异生与发酵生长转换、储存碳水化合物分解、胁迫耐受、生长控制、寿命决定、形态发生与发育等过程。它们属于小GTP酶超家族,GTP结合态为活性形式,GDP结合态为失活形式。为研究Ras蛋白激活状态以阐明Ras介导信号转导机制,本文提供一种简单、灵敏且可靠的方法,基于Ras-...
Journal of visualized experiments : JoVE
2011
Mijaljica D, Prescott M, Devenish RJ
自噬在多种条件下参与细胞组分周转,既是稳态维持机制,也是质量控制机制,可选择性降解包括细胞器在内的细胞物质。若受损或多余线粒体未被清除,可能威胁细胞稳态与存活。在酿酒酵母中,营养缺乏(如氮饥饿)或损伤可诱导线粒体选择性自噬,即线粒体自噬。本文描述一种简单荧光显微镜方法,用于评估酵母细胞中的自噬,并重点展示监测线粒体自噬。该方法使用双...
Sensors (Basel, Switzerland)
2009
Kormes DJ, Cortón E
本文提出一种类生物传感器方法,用于在活细胞水平表征固定在装置上的酿酒酵母细胞。作者将酿酒酵母细胞包埋于硝酸纤维素滤膜上,并置于自制二氧化碳电位电极上,在不同温度和葡萄糖浓度下研究葡萄糖的跨膜转运与降解动力学。当葡萄糖浓度为15 mM和1.5 mM时,由Arrhenius图计算得到的活化能分别为25.2和18.4 kcal mol-1...
Biosensors & bioelectronics
2008
Benton MG, Glasser NR, Palecek SP
真核酵母DNA损伤细胞传感器相比传统原核致突变试验具有优势。HUG1P-GFP启动子报告构建体可有效筛选多种DNA损伤。为提高系统对不同DNA损伤的敏感性和选择性,作者删除了两个参与不同DNA损伤应答的基因。删除MAG1(编码DNA糖基化酶,属碱基切除修复BER通路)使生物传感器对烷基化剂甲基甲烷磺酸(MMS,敏感性阈值降至0.00...
Talanta
2007
Nakamura H, Suzuki K, Ishikuro H, Kinoshita S 等 8 人
本文报道了一种基于双介体(DM)系统的生化需氧量(BOD)快速测定方法,采用铁氰化钾(ferricyanide, FC)与脂溶性介体甲萘醌(menadione)以及真核微生物酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)。作者构建了体积为560 μL、带微搅拌的两电极微生物传感器。计时电流响应在1 μM至10 mM六氰...