Shedding new light on RhoA signalling as a drug target
小GTP酶RhoA是细胞与细胞外基质相互作用信号的关键调控因子，参与迁移、机械转导等过程，并在癌变中常发生紊乱。传统生化方法难以在天然组织环境中评估RhoA活性。作者开发了一种RhoA-FRET生物传感器小鼠，利用活体成像的高时空分辨能力监测RhoA活性。该小鼠采用改造型Raichu-RhoA报告蛋白，以EGFP和mRFP替代原CF...
Aβ modulates actin cytoskeleton via SHIP2-mediated phosphoinositide metabolism.
新兴证据表明，磷脂代谢在阿尔茨海默病（AD）中发生改变，但其如何影响神经退行性变的分子机制尚不清楚。SHIP2 是一种磷脂酰肌醇代谢酶，可将 PI(3,4,5)P3 去磷酸化为 PI(3,4)P2，且已有研究报道 Aβ 可直接增强 SHIP2 活性。本研究利用荧光 SHIP2 生物传感器，实时监测了 Aβ 处理 HT22 细胞后含 ...
Neurodevelopmental disease-associated de novo mutations and rare sequence variants affect TRIO GDP/GTP exchange factor activity.
双相情感障碍、精神分裂症、自闭症和智力障碍等神经发育疾病严重影响数百万患者，但治疗进展受限于对分子机制认识不足。本研究通过靶向检索发现，编码330 kDa三重功能结构域（TRIO）蛋白的基因在神经发育疾病中存在新发突变富集。作者制备多种TRIO抗体，证明较小TRIO9亚型是脑内主要蛋白产物，且出生后水平下降。TRIO9含两个鸟苷酸交...
A FRET Biosensor for ROCK Based on a Consensus Substrate Sequence Identified by KISS Technology.
基于 Förster/荧光共振能量转移（FRET）的基因编码生物传感器是研究细胞和组织内信号分子时空调控的通用工具。开发蛋白激酶 FRET 生物传感器最困难的任务之一是鉴定可用于 FRET 探针的激酶特异性底物肽。为解决该问题，我们利用激酶相互作用底物筛选（KISS）技术推导目标蛋白激酶的共识底物序列。本文表明，由 KISS 鉴定的...
RhoA and membrane fluidity mediates the spatially polarized Src/FAK activation in response to shear stress.
Src 激酶在剪切应力诱导的血管细胞反应中起关键作用，但高剪切应力（HSS）诱导 Src 激活的亚细胞时空模式仍不清楚。本研究对牛主动脉内皮细胞（BAECs）施加 65 dyn/cm2 的 HSS，利用基于荧光共振能量转移（FRET）的膜靶向 Src 生物传感器 Kras-Src，在亚细胞水平实时可视化 Src 激酶活性。结果显示，...
A RhoC biosensor reveals differences in the activation kinetics of RhoA and RhoC in migrating cells.
RhoA 与 RhoC GTP 酶氨基酸序列相似度达 92%，但在细胞迁移和形态调控中发挥不同作用。为解析二者差异，作者开发并验证了一种 RhoC 激活生物传感器 RhoC FLARE，并与已有 RhoA 生物传感器联合使用，比较细胞突起/回缩和巨胞饮过程中 RhoA 与 RhoC 活性的时空动态。结果显示，两种 GTP 酶在细胞边...
RhoA-mediated signaling in mechanotransduction of osteoblasts.
成骨细胞在负载驱动骨形成中起关键作用，可通过骨细胞机械传感信号激活 Wnt 通路，但其对机械刺激的响应及小 GTPase RhoA 在机械转导中的作用尚不清楚。本研究以 MC3T3-E1 成骨样细胞为模型，在 10 dyn/cm² 单向流体剪切应力处理 1 h 条件下，检验 RhoA 信号是否介导细胞对流动剪切应力的响应。通过全基因...
RhoA/ROCK-mediated switching between Cdc42- and Rac1-dependent protrusion in MTLn3 carcinoma cells.
Rho GTP酶是调控细胞形态和肌动蛋白细胞骨架的关键分子开关。已有研究表明，Rac1和Cdc42分别调控迁移细胞前缘的板状伪足和丝状伪足形成，而RhoA主要介导细胞后部收缩；但近期报道发现迁移细胞前缘存在RhoA/ROCK激活区。本研究利用基于FRET的RhoA生物传感器，在EGF刺激的MTLn3癌细胞中实时监测RhoA活性，发现...