自展示（autodisplay）是利用革兰氏阴性菌外膜（OM）自转运蛋白分泌途径，将重组蛋白定向展示于细胞表面的表达系统。近年来，IgG结合Z结构域和生物素结合链霉亲和素等亲和蛋白被自展示于大肠杆菌（E. coli）外膜，用于分析与生物医学应用。本文综述了该系统的分泌机制，以及亲和蛋白在OM上的定向与密度控制。通过去垢剂分离纯化自展...
经皮提取组织间液（ISF）为微创血糖监测提供了有吸引力的方法，但经皮提取的ISF体积极小，需稀释成可操作体积以便采集、运输和葡萄糖检测，因此需要高分辨率葡萄糖检测方法检测稀释ISF中的葡萄糖浓度。本文报道了一种经葡萄糖/半乳糖结合蛋白（GGB）修饰的光学表面等离子共振（SPR）传感器，用于葡萄糖分子的特异性与高灵敏检测。GGB蛋白在...
Vault 是天然存在的卵圆形纳米颗粒，由多个主要 vault 蛋白（MVP）亚基构成的蛋白外壳组成。vault poly(ADP-ribose) 聚合酶（VPARP）的 vault 相互作用结构域 INT 已被用作穿梭结构域，将生物分子货物装载到 vault 腔内。然而，INT 与 MVP 之间的相互作用机制尚不清楚。作者假设 v...
本文提出一种相位-强度表面等离子共振（SPR）生物传感器，并展示其用于禽流感 A（H5N1）抗体生物标志物检测。该传感器通过探测表面等离子激元激发时陡峭相位响应引起的强度变化实现检测。棱镜传感头置于相互垂直的两片偏振器之间，形成禁止透射路径；在 SPR 条件下，p 偏振与 s 偏振光之间产生陡峭相位差，使透射光束偏振椭圆旋转，从而使...
本研究提出一种便携式多通道表面等离子共振（SPR）生物传感器装置。该光学传感器以半圆柱棱镜作为光路核心耦合单元，用于激发 SPR 现象；采用包含连续 10° 角度范围的楔形入射光束替代传统 SPR 装置中需机械调角系统的平行光束，从而避免复杂、笨重且昂贵的机械结构。装置选用小型高稳定性半导体激光器、矩阵 CCD 探测器以及微流控系统...
丙型肝炎病毒（HCV）非结构蛋白5B（NS5B）聚合酶的别构抑制剂对基因型1有效，但其作用机制及对其他分离株和基因型的抑制能力尚不明确。本研究采用生物物理技术和一种新型基于生物传感器的实时聚合酶检测法，考察四种抑制剂对基因型1b（BK和Con1）及3a NS5B的作用机制与选择性。两种拇指域抑制剂（lomibuvir和filibuv...
本研究开发了一种免疫生物传感器方法，用于牛、羊和猪肾中母体氨苯砜类抗生素替甲砜霉素（thiamphenicol, TAP）和氟甲砜霉素（florfenicol, FF）及其代谢物氟甲砜胺（florfenicol amine, FFA）的多残留筛查。方法采用以 FFA-蛋白偶联物免疫兔制备的多克隆抗血清作为识别元件。样品匀浆直接用乙腈...
表面等离子共振（SPR）生物传感器常用于生物分子相互作用和细胞表面分析的实时、动态、无标记检测，但在干细胞生物医学中的应用仍不足。本文开发了一种简单且敏感的方法，基于血管内皮钙黏蛋白（VE-cadherin，CD144）生物标志物，评估人间充质干细胞（hAMSCs）在14天内向内皮谱系转分化的过程。随着细胞表面VE-cadherin...
本研究提出了一套用于评估Biacore仪器在动力学结合研究中生物传感器性能的参数清单。作者采用强相互作用的抗原-抗体体系（人β2微球蛋白/抗β2微球蛋白抗体）进行了六组长期测量，分别执行单周期动力学（SCK）和多周期动力学（MCK）方案，每组均使用五种分析物浓度。通过长期监测解离常数KD（相对标准偏差约3%–6%）、结合与解离速率常...
本研究考察源自胶原I α1链的合成15氨基酸生物模拟肽P15是否也能通过软骨内骨化促进骨形成，并检验α2β1整合素与P15的直接结合是否介导整合素激活。作者将小鼠间充质细胞C3H10T1/2培养于软骨诱导培养基中，采用Western blot和荧光免疫组化检测软骨分化标志物及整合素激活；利用SensiQ Pioneer表面等离子共振...
尽管磁光表面等离子共振（MOSPR）检测具有较高分析潜力，但其生物传感应用长期受限于芯片稳定性问题。本文提出一种基于新型芯片结构、定制测量配置和改进数据分析方法的解决方案，以克服现有 MOSPR 传感检测的局限。芯片结构由传统具有磁性和等离子体性质的同质金属连续层改为含 Co-Au 合金薄层，该结构兼具改进的等离子体性质和磁光性质，...
针对含有多种分析物的大量样品，提高检测效率至关重要。本研究开发了一种简便的表面等离子共振（SPR）生物传感器方法，用于在牛奶等复杂样品中顺序检测氯霉素（CAP）和庆大霉素（GEN）。基于免疫抑制格式，将抗原与牛血清白蛋白（BSA）偶联物CAP–BSA和GEN–BSA接枝在同一SPR芯片通道上。通过先将单一抗体与不同浓度相应抗原混合，...
自展示技术可将目标蛋白高效表达于大肠杆菌外膜。本研究分别制备表达两种自展示蛋白的大肠杆菌外膜组分，并按设定比例混合，以验证在同一外膜层中控制两种自展示蛋白比例的可行性。第一模型为Z-domain与streptavidin，二者分别结合IgG Fc区和生物素，具有相互独立的结合活性；作者将混合外膜层固定于96孔微孔板和SPR生物传感器...
生物分子的自我复制是生命的基础，通常需要复杂的细胞机器。然而，一些异常过程涉及病理性蛋白结构在没有额外辅助的情况下自我复制，例如与神经退行性疾病相关的淀粉样纤维丝。本文利用计算机模拟识别蛋白纤维丝组装体自我复制的必要条件，并证明该过程的关键物理决定因素是蛋白对纤维丝表面的亲和力。研究发现，自我复制只能在非常狭窄的蛋白间相互作用区间内...
表面等离子共振（SPR）生物传感器已广泛应用于生物、化学、环境和临床检测，但银基底易氧化，限制了长期稳定测量。本文提出在薄银膜表面引入二氧化钛（TiO2）层，以增强SPR检测性能并提高银膜稳定性。作者采用室温电子束蒸发制备均匀TiO2薄膜，作为避免银膜氧化的有效保护层。基于SPR传感器灵敏度与色散曲线斜率强相关的发现，通过聚对二甲苯...
表面等离子共振（SPR）虽已广泛应用于环境、食品、药物发现和诊断等领域，但在文化遗产保护中的应用仍很少。本文首次将用于从历史绘画表面选择性去除蛋白、天然树脂等降解层的高黏度聚合物分散液（HVPD）与 SPR 生物传感器耦合，用于同时识别 HVPD 提取物中的蛋清、蛋黄或其混合物。研究选择卵白蛋白（OVA）和免疫球蛋白 Y（IgY）分...
对于基于表面的诊断设备而言，要在血液等复杂介质中可靠检测生物标志物，必须防止非特异性蛋白吸附并实现高负载生物识别元件。本文开发了一种制备抗污两性离子水凝胶涂层的新方法。作者以羧基甜菜碱二丙烯酰胺（CBAAX）为交联剂，制备聚羧基甜菜碱丙烯酰胺（pCBAA）水凝胶薄膜（CBHTFs），并通过简单旋涂法涂覆于金和二氧化硅表面。通过改变交...
灭活脊髓灰质炎疫苗（IPV）在全球脊髓灰质炎消除计划中发挥关键作用，其质量控制主要依赖疫苗批次的效价评估。IPV 效价可通过体内和体外方法测定。体外效价评估基于疫苗中 D-抗原（D-Ag）单位含量，D-Ag 主要表达于天然感染性病毒颗粒，是保护性免疫原；最常用的体外方法是间接 ELISA，用于保证生产一致性。体内效价试验已在猴、雏鸡...
趋化因子及其受体参与多种生理与病理过程，其表达失调与慢性炎症、自身免疫病、免疫缺陷和肿瘤相关。趋化因子受体属于G蛋白偶联受体家族，是七次跨膜整合膜蛋白，通过GTP结合蛋白传递信号。研究这些受体结构、构象或激活机制的许多方法依赖配体结合测定，并常需标记趋化因子或受体，可能改变其结合特性。表面等离子共振（SPR）可在实时、无标记条件下分...
DnaB-DnaC复合物在大肠杆菌复制起点解旋酶装载过程中结合解旋的DNA，但导致其稳定结合的生化事件尚不清楚。本研究表征DnaC C端特定残基的功能。遗传与生化分析显示，携带F231S和W233L替换的DnaC突变体活性具有热不稳定性。由于突变体在30和37°C仍能与DnaB形成复合物，其热不稳定性不能由与DnaB相互作用受损解释...