合成了一种理性设计的睾酮寡聚乙二醇连接子偶联物，并共价固定于表面等离子共振（SPR）生物传感器表面。传感表面可稳定经历超过330次结合与再生循环，具有较高重复使用性。基于该表面，开发了用于缓冲液中睾酮的超灵敏免疫生物传感器系统，同时采用二级抗体和金纳米粒子信号增强。灵敏度提高源于结合质量增加及金等离子体耦合效应。与仅用一级抗体相比，...
本文报道了一种基于表面等离子共振（SPR）的无标记 DNA 突变筛查方法，用于遗传性乳腺癌相关 BRCA1 基因突变的早期检测。研究系统考察了横向间隔物、纵向间隔物以及不同杂交条件对完全互补链与错配链区分能力的影响，以优化 SPR 生物传感器对 DNA 杂交和突变识别的灵敏度与选择性。通过硫醇化学控制寡核苷酸探针在金表面的固定密度，...
表面等离子共振（SPR）光学生物传感器已广泛用于测定多种大分子相互作用的动力学参数。传统实验通常任意选择分析物与缓冲液的注入时间以及不同分析物浓度，因此所得结合/解离曲线未必能为动力学参数提供足够置信度，标准误可能偏大。本文提出一种迭代式在线优化方法，将所需标准误作为约束条件，自动确定分析物浓度、结合期与解离期等实验变量，从而在满足...
RNA环-环复合物是原核和真核生物中调控生物学功能的重要结构基序。在大肠杆菌中，ColE1质粒编码的反义RNA RNAI通过环-环相互作用识别RNAII，后者是结合质粒DNA并启动复制的RNA引物，从而调控质粒复制。质粒编码的同源二聚体蛋白Rop可与这一瞬时RNAI-RNAII kissing complex相互作用。本研究采用表面...
莱克多巴胺（ractopamine，RCT）属于β2-激动剂，已在包括美国和加拿大在内的20多个国家作为动物促生长剂获批，但在欧盟等150多个国家和地区被禁止或限制使用。随着中国因美国猪肉中检出RCT而禁止部分加工厂进口，欧洲亟需建立可靠、稳健的低浓度RCT检测方案。本研究开发了一种基于表面等离子共振（SPR）的光学生物传感器筛查方...
生物活性化合物检测是分子生物学与生物化学的重要课题。表面等离子共振（SPR）是一种有前景的无标记检测方法，可在实时条件下监测生物分子结合事件，并用于测定不同分子间相互作用的亲和常数与速率常数。本文介绍一种基于SPR生物传感器的教学实验，用于无标记研究固定化抗原牛血清白蛋白（BSA）与兔抗牛血清白蛋白IgG1（anti-BSA）抗体之...
动物细胞质膜蛋白可作为质膜纯化程度的指标。本文提出一种基于表面等离子共振（SPR）生物传感器测定质膜蛋白的简便方法。用 5-[5-(N-琥珀酰亚胺氧羰基)戊基酰胺]己基-D-生物素酰胺对 MOLT-4 细胞进行生物素化后，仅在细胞周边区域观察到生物素化蛋白；HeLa 细胞表面蛋白同样可被生物素化。将 HeLa 细胞膜样品注入亲和素固...
本研究在兔体内制备了针对三硝基苯基（TNP）衍生物的多克隆抗体，并将其用于表面等离子共振（SPR）生物传感器检测三硝基甲苯（TNT）。将TNP-孔介孔蓝血蛋白（TNP-KLH）偶联物免疫兔，经Protein G纯化血清获得抗TNP多克隆抗体。作者系统评价了该抗体对多种硝基芳香化合物的交叉反应性和亲和力，并考察了抗TNP抗体与TNT亲...
本单元描述利用表面等离子共振（SPR）生物传感器筛选小病毒肽作为特异性抗原并进行实时动力学分析的方法。与ELISA等免疫酶法相比，SPR无需标记，即可快速获得大量生物特异性相互作用的亲和力与动力学参数。由于SPR响应与传感表面质量变化直接相关，常规做法常固定小抗原并注入抗体；但为同时筛选大量肽类似物并保证可比性与重现性，本文采用固定...