Resolving subcellular pH with a quantitative fluorescent lifetime biosensor.
亚细胞pH变化在代谢、膜运输及治疗载体释放中起关键作用。现有pH测量多依赖pH敏感荧光团的强度变化，但强度法受传感器浓度、信噪比下降和需要参考荧光团等限制，推断pH不确定度高。本文提出将pH依赖荧光寿命成像显微镜（pHLIM）与深度学习结合，用于在单个囊泡水平准确定量活细胞亚细胞pH。作者将pH敏感荧光蛋白mApple分别融合至细胞...
Genetically Encoded, pH-Sensitive mTFP1 Biosensor for Probing Lysosomal pH.
溶酶体是细胞内大分子降解的关键场所，其腔内 pH 通常约为 4.5。为更准确地研究溶酶体 pH，作者设计了一种新型基因编码荧光蛋白 pH 生物传感器 FIRE-pHLy。该传感器通过溶酶体相关膜蛋白 1（LAMP1）靶向溶酶体膜，并利用单体青色荧光蛋白 1（mTFP1）作为腔侧 pH 敏感报告域，在 pH 3.5–6.0 范围内报告...
Reversible and irreversible fluorescence activity of the Enhanced Green Fluorescent Protein in pH: Insights for the development of pH-biosensors.
增强绿色荧光蛋白（EGFP）具有强而天然的荧光，在生物医学研究中广泛用作生物标志物，但作为生物传感器时，其结构和在不利环境中的行为认识不足。本研究利用三维荧光光谱、圆二色（CD）和小角X射线散射（SAXS）系统评估不同 pH 下 EGFP 的荧光活性与结构变化，并重点考察 pH 诱导荧光猝灭的可逆性，以期为开发生物相容的 pH 生物...
Litmus-Body: A Molecularly Targeted Sensor for Cell-Surface pH Measurements.
精确测量受体周围局部pH对于阐明疾病表型中局部酸化如何导致受体功能异常至关重要，但现有pH传感器难以定位并靶向特定受体分子。本文报道了一种重组蛋白pH传感器Litmus-body，其将抗IgG纳米抗体TP1107与pH敏感绿色荧光蛋白cfSEP及长Stokes位移红色荧光蛋白mCyRFP1融合，可搭载IgG抗体靶向细胞表面特定蛋白。...
Indolenine-Based Derivatives as Customizable Two-Photon Fluorescent Probes for pH Bioimaging in Living Cells.
本文合成并表征了基于2-(6-甲氧基萘-2-基)-3,3-二甲基-3H-吲哚的新型pH探针。这些化合物对酸性pH表现出优异的“关-开”荧光响应，尤其在双光子（TP）激发条件下，对H+具有强选择性和敏感性。其荧光量子产率超过35%，双光子吸收截面约60 GM，并在酸性条件下具有良好抗光降解能力。该分子骨架具有良好合成可塑性，可通过轻微...
An intriguing pH-triggered FRET-based biosensor emission of a pyrazoline-doxorubicin couple and its application in living cells.
本文报道了一种由吡唑啉衍生物（PYZ）和多柔比星（DOX）组成的 pH 驱动 Förster 共振能量转移（FRET）生物传感器，并用于 HepG2 活细胞生物成像。PYZ 作为荧光供体，DOX 作为荧光受体；在中性 pH 下 PYZ 在 375 nm 激发下产生弱绿色发射（约 485 nm），加入 DOX 后发生 FRET。随着 ...
Red fluorescent protein pH biosensor to detect concentrative nucleoside transport.
人浓缩型核苷转运体 hCNT3 可介导 Na+/核苷和 H+/核苷共转运。本文报道一种在培养哺乳动物细胞中监测 H+/尿苷共转运的新方法，并开发、表征了 pH 敏感单体红色荧光蛋白变体 mNectarine。将 mNectarine 融合至 hCNT3 N 端形成 mNect.hCNT3，可在 hCNT3 胞内表面测量 pH。在表达...