本研究通过细胞融合制备了针对微囊藻毒素-亮氨酸-精氨酸（MC-LR）的单克隆抗体。免疫原采用两步法合成：首先以EDC/NHS反应将卵白蛋白（OVA）或牛血清白蛋白（BSA）与6-乙酰硫己酸偶联，透析后在碱性条件下通过自由基反应与MC-LR连接，所得蛋白偶联物用于低体积免疫。抗体经间接竞争ELISA（icELISA）鉴定，并用于自来水...
本文报道了一种基于分子伴侣GroEL的生物层干涉（BLI）检测方法，用于识别药理学相关蛋白的结构改变和/或聚集物种。研究首先优化了生物素化GroEL在链霉亲和素BLI传感器上的固定，并通过圆二色、ANS荧光、浊度和GFP重折叠实验证明天然与生物素化GroEL均保持稳定的结构和活性。以酸性成纤维细胞生长因子-1（FGF-1）为例，40...
本研究采用表面等离子共振（SPR）技术，以实时、无标记方式筛选针对恶性疟原虫重组组氨酸富集蛋白-II抗原（rHRP-II Ag）的单克隆抗体（MoabPf）和多克隆抗体（PoabPf），用于生物传感器应用。实验以4-巯基苯甲酸（4-MBA）修饰金SPR芯片，通过EDC/NHS化学活化将rHRP-II Ag共价固定于芯片表面，再注入不...
本研究报道了通过哺乳动物细胞瞬时转染表达并纯化两种 Fcγ 受体胞外域 CD16a 和 CD64，用于开发单克隆抗体生产批次质量控制的定量检测方法。作者将带 C 端 His 标签的 CD16a 和 CD64 胞外域经 IMAC 和 SEC 纯化，以胺基偶联或抗 His 抗体定向捕获方式固定在 CM5 SPR 芯片表面，实时监测其与曲...
本研究制备并表征了一种高灵敏度、广谱特异性单克隆抗体，用于微囊藻毒素检测，并建立快速表面等离子共振（SPR）光学生物传感器免疫分析方法。该抗体交叉反应为：MC-LR 100%、MC-RR 108%、MC-YR 68%、MC-LA 69%、MC-LW 71%、MC-LF 68%、节球藻毒素 94%。将 MC-LR 共价固定于 CM5 ...
针对特定抗原的抗体panel多样性可通过多种检测格式建立。传统表位分箱实验将纯化抗体两两检测：若两种抗体竞争结合同一抗原，则归入同一簇或箱；若不竞争，则归入不同簇。本文报道一种高通量检测，可直接对粗杂交瘤上清进行分组，无需抗体纯化；同时无需重组蛋白，因为检测在表达目标抗原的细胞上进行，因此可用于难以纯化的细胞表面蛋白。重链可变区（V...
表面等离子共振（SPR）生物传感器已被广泛用于测量多种分子间相互作用，但用于细菌、病毒等较高阶生物实体，尤其是植物病毒的研究较少。本文报道了一种用于评价经济上重要的丝状马铃薯Y病毒（PVY）与单克隆抗体相互作用的SPR传感器芯片优化方法。不同PVY分离株可被预先固定在芯片表面的多克隆抗体高效、稳定地捕获，并在多次进样和再生步骤后保持...