本研究采用迭代亲和筛选（biopanning）策略，从 Tomlinson I+J 天然噬菌体展示库中筛选出多个可特异性识别并结合趋化因子单核因子诱导的干扰素γ蛋白（MIG/CXCL9）的单链 Fv（scFv）抗体片段克隆。MIG 是移植排斥过程中的重要趋化因子蛋白。作者通过 ELISA 亲和表征发现，筛选所得 scFv 在生物筛选...
金黄色葡萄球菌肠毒素B（SEB）是引起食物中毒的重要外毒素。本研究通过噬菌体展示肽库筛选SEB结合肽，并用等温滴定量热法（ITC）测定其结合热力学参数。在5个候选肽中，3个与SEB具有亲和力，其中peptide3亲和力最高，结合常数约10^5 M^-1。ITC结果表明，肽与SEB的结合主要由熵驱动，疏水相互作用占主导。圆二色光谱（C...
本研究通过噬菌体展示技术，从基于58个氨基酸的葡萄球菌蛋白A衍生Z结构域库中筛选出特异性结合人肿瘤坏死因子α（TNF-α）的affibody分子。TNF-α是参与多种炎症性疾病的促炎细胞因子，目前已有四种TNF-α阻断蛋白药物获批临床使用。经噬菌体筛选获得18个无半胱氨酸affibody序列，其中12个经序列聚类分析后选择为蛋白进行...
目前，对多种分析物进行可靠检测与定量在许多应用场景中至关重要。生物传感器已革新了即时检测（POC）诊断，并用于食品与环境污染物、生物战剂、非法毒品以及人和动物疾病标志物的检测。由于抗体对其相应抗原具有极高的特异性，抗体在众多传感器器件中仍发挥关键作用。本文简要介绍了当前采用抗体作为分子识别元件的生物传感器平台，并系统评述了利用分子生...
癌症患者常产生针对肿瘤相关抗原（TAA）的自身抗体，这些血清IgG稳定且可作为早期诊断标志物。本文介绍一种高通量抗体生物标志物发现方法，即表位组学（Epitomics）。作者首先从肿瘤组织或肿瘤细胞系mRNA构建带条形码的T7噬菌体展示cDNA文库，利用正常健康人血清IgG包被Protein G琼脂糖微珠进行负筛选，再用卵巢癌患者血...
噬菌体展示技术虽在生物传感器中应用较少，但可为癌症标志物等分析物提供可定制的识别支架。本章介绍将病毒直接共价固定于电极、实现无试剂实时检测的完整方案。首先利用大库噬菌体展示筛选获得能结合前列腺特异性膜抗原（PSMA）的M13噬菌体；随后以硫辛酸N-羟基琥珀酰亚胺酯（NHS-TE）修饰金电极，使噬菌体表面游离胺与活化酯形成酰胺键，实现...
c-Jun 是高度致癌转录因子，参与多种癌症发生。本研究从噬菌体展示的 Affibody 非免疫球蛋白支架蛋白文库中筛选结合 c-Jun 的亲和配体。在大肠杆菌中重组表达 c-Jun 同源二聚体，并通过 ELISA 验证其特异性结合含 c-Jun 应答元件的双链 DNA 发夹，不结合对照序列。经五轮噬菌体筛选，ZcJun518 在 ...
本文报道了一种基于噬菌体受体的无标记光流体环谐振器（OFRR）生物传感器，用于生物分子检测。与抗体相比，噬菌体受体具有明显优势：可从大规模随机肽库中通过亲和选择获得针对多种分析物的高特异性、高灵敏度受体；噬菌体生产流程更简单、成本更低；且能耐受高温、极端pH和变性剂等恶劣环境，从而降低环境限制并允许传感表面再生。作者以展示链霉亲和素...
本研究利用噬菌体展示技术，从基于58个氨基酸Protein A衍生Z结构域的组合蛋白库中筛选出特异性结合人白细胞介素-2受体α亚基（IL-2Rα/CD25）的Affibody®分子。IL-2R系统参与T细胞活化与免疫应答调节，CD25在器官排斥、自身免疫病和T细胞恶性肿瘤中过表达。以Fc融合靶蛋白进行噬菌体展示筛选，共获得16个独特...