本研究采用表面等离子共振成像（SPRi）和石英晶体微天平（QCM）两种无标记技术，表征纤维连接蛋白（fibronectin, FN）与抗纤维连接蛋白兔单克隆抗体之间的相互作用，并比较同一免疫传感器在两种换能方式下的响应。研究通过逐层构建传感器，考察半胱胺自组装层、抗体固定层以及抗体-抗原复合物形成对传感器响应的影响。结果表明，两种检...
我们此前证明，使用高亲和抗人Fc（AHC）抗体捕获人单克隆抗体（hmAb）可可靠表征抗体-抗原相互作用。本研究表征了6种人Fc特异性小鼠单克隆抗体，并与3种已表征的山羊AHC多克隆抗体比较。6种小鼠AHC mAb均与人IgG1、hIgG2、hIgG4及43种含铰链区/Fc区替换或突变的人IgG变体高亲和特异性结合。分别偶联小鼠AHC...
尽管抗体在临床应用中广泛使用，但抗体–抗原相互作用的精确分子机制往往仍不清楚。本研究利用表面等离子共振（SPR）生物传感器的技术特点，解析单域抗体或纳米抗体与其靶抗原表皮生长因子（EGF）结合过程中的动力学与热力学组分。EGF 是参与肿瘤进展的关键致癌蛋白。作者通过精细调控实验条件，并将动力学数据转化为平衡常数，揭示了结合热力学全貌...
表面等离子共振（SPR）是表征生物分子相互作用的成熟方法，广泛用于药物发现与开发。本研究证明，捕获表面对抗体-抗原相互作用测得的结合动力学参数具有显著影响。作者使用八种不同抗人IgG捕获表面，对六种人源单克隆抗体（hmAb）-抗原相互作用进行SPR捕获动力学分析，并与溶液相动力学排除法（KinExA）结果比较。三种山羊抗人Fc多克隆...
光学生物传感器为定性及定量分析多种生物分子相互作用提供了重要平台。除无标记、高通量检测等优势外，这类器件还能通过监测生物分子光学性质变化获得实时结合曲线。将动力学数据拟合到适当模型后，可提取结合亲和力参数，如结合速率、解离速率和平衡解离常数。在这类传感器中，通常将一对结合物之一固定在固体基底上以捕获另一组分。由于表面基方法的特点，传...
生物层干涉（BLI）是一种实时、无标记的光学传感技术，已显著推动疫苗研究与开发。BLI Octet 平台相比传统标记方法具有高通量、操作简便、可靠性和高精度等优势。多种策略可将病原体或宿主分子固定在 BLI 生物传感器表面，用于实时动力学与亲和力分析、定量检测和高通量滴度测定。这些策略可应用于表位设计、抗体筛选、病原体多样性分析、宿...
Octet 生物层干涉（BLI）生物传感器为表征抗体-抗原相互作用提供了高通量替代方案，可补充表面等离子共振（SPR）和 SPR 成像（SPRi）平台。然而，Octet 在准确、可重复测定单克隆抗体（mAb）结合速率常数时，常受分析物再结合和传质限制（MTL）影响。本研究针对上述问题，系统优化了 Octet HTX 上 mAb-抗原...
随着生物治疗领域快速发展，对高通量、高灵敏度无标记生物传感器的需求增加。本文评估 Sierra Sensors 的分子亲和力筛选系统 MASS-1 在 Regeneron 治疗性抗体发现中的应用潜力。MASS-1 是基于表面等离子共振成像（SPRi）的八通道平行流生物传感器，可同时向八个独立流动通道进样，每个通道含两个可寻址检测点，...
携带β1轻链的抗(4-羟基-3-硝基苯基)乙酰（NP）抗体具有称为异裂性的精细特异性，能以高于自身半抗原NP的亲和力结合半抗原类似物(4-羟基-3-碘-5-硝基苯基)乙酰（NIP）和(4-羟基-3,5-二硝基苯基)乙酰（NNP），并优先结合半抗原的酚氧负离子形式。本文利用表面等离子共振（SPR）生物传感器，分析NP1-、NIP1-或...
本文报道一种基于数百根独立金纳米棒的等离子体生物传感器，具有单分子灵敏度，并可在暗场显微镜中实时同步监测。该方法无需标记分析物，即可对单分子相互作用进行统计分析。作者以抗体-抗原相互作用为模型，发现结合等待时间分布具有浓度依赖性并服从泊松统计。通过同时探测数百个纳米颗粒，传感器可覆盖约7个数量级的浓度动态范围，并可用于研究分子相互作...
本文报道了一种快速、无标记的光学生物传感器系统，用于实时灵敏监测生物分子相互作用。SpectroSens™传感器芯片基于集成平面布拉格光栅，对局部折射率变化敏感。传感表面通过固定针对目标物的抗体实现生物分子识别。研究中，利用重组Protein A/G对选定蛋白抗体进行定向，并通过戊二醛活化的硅烷层以胺偶联方式共价固定到芯片上。以兔I...
本文介绍 IAsys 共振镜生物传感器用于测量生物分子相互作用动力学的方法。生物传感器将传感表面上的结合事件通过换能器转换为电子信号，再由计算机处理得到结合量。IAsys 与 BIACORE 均使用光学检测，但 IAsys 采用共振镜换能器，而 BIACORE 采用表面等离子共振。实验中，先将配体固定到羧甲基化葡聚糖水凝胶或氨基硅烷...
本文介绍利用表面等离子共振（SPR，BIAcore）实时、无标记分析抗体-抗原相互作用的方法，重点用于 HIV-1 包膜糖蛋白 gp120、gp160、核心蛋白 p24 及 V3 肽段与单克隆抗体（MAb）或多克隆血清的结合研究。方法包括配体预浓缩、以 EDC/NHS 活化羧甲基葡聚糖（CM-dextran）传感基质、通过氨基或巯基...