纸基快速检测因简单、低成本而广泛用于即时诊断，但其定量应用仍有限。本研究将核酸侧流层析检测（NALFA）与基于树莓派（Raspberry Pi）的自动图像采集系统集成，用于SARS-CoV-2病毒的定量检测，以提高相对于主观目视判读的准确性。该检测采用蓝色聚苯乙烯微球作为报告物，自动图像采集、图像处理和定量分析由定制Python软件...
马尔尼菲篮状菌（Talaromyces marneffei）是流行于东南亚和中国南部的致病性双相真菌，吸入孢子可致感染，播散性感染若未及时诊断和治疗可危及生命。本研究建立环介导等温扩增（LAMP）联合纳米颗粒侧流生物传感器（LFB）的可视化即时检测方法（T. marneffei-LAMP-LFB），用于检测该菌。研究基于rRNA基因...
本文报道了一种名为MebiQue-LFA的核酸整合侧流层析检测平台，首次将亚甲基蓝（MB）用作核酸侧流层析试纸条的新型比色信号示踪剂。该平台通过蓝色染料实现肉眼可视检测，并在同一试纸条上集成电化学换能，使低浓度样品在比色信号不足时仍可获得灵敏、可定量的电化学读数。以模型单链DNA为靶标，平台在缓冲液和50%稀释模拟血液中分别实现0....
CRISPR/Cas系统在新型生物传感核酸检测中具有重要潜力。目前化脓性链球菌（Streptococcus pyogenes, S. pyogenes）临床诊断主要依赖血清学鉴定、培养和PCR，耗时长且需要复杂设备。本研究建立一种快速、简便、高灵敏的S. pyogenes检测与筛查方法，可作为现有临床检测的补充。样品处理10 min...
环介导等温扩增（LAMP）技术因快速、高灵敏而广泛用于感染性疾病检测，但传统LAMP信号方法主要反映双链DNA总量或环境变化，缺乏序列特异性，易受非特异扩增干扰。本研究将三链形成寡核苷酸（TFO）探针引入LAMP体系，以增强序列特异性，并用于B群链球菌（GBS）检测。TFO探针可识别LAMP扩增产物中设计的TFO靶向序列（TTS），...
在新冠疫情背景下，核酸检测已成为快速诊断传染病的关键。本研究建立了一种将CRISPR/Cas12a检测与环介导等温扩增（LAMP）相结合的核酸检测平台，命名为CRISPR-CLA。该平台在LAMP正向内引物（FIP）连接区插入Cas12a的PAM位点TTTA，使扩增产物携带PAM，从而突破目标序列缺乏PAM的限制，只要引物设计满足L...
背景：SARS-CoV-2 RT-PCR 检测比快速抗原检测（RDT）更敏感，可在个体不再具有传染性后仍检测出病毒 RNA。RDT 可缩短检测时间，结果可能与传染性相关性更好。目的：评估五种 RDT 识别传染性 COVID-19 病例的能力，并系统记录 RT-PCR 检测周转时间。方法：使用已知病毒 RNA 浓度的系列稀释 SARS...
本文报道了一种名为LACD的CRISPR核酸检测平台，将环介导等温扩增（LAMP）与CRISPR-Cas12a介导的诊断相结合。作者将常规LAMP核心引物（FIP或BIP）的连接区工程化，引入PAM序列TTTT，使LAMP扩增产物含有可被CRISPR-Cas12a识别的特异PAM位点。在检测阶段，LAMP产物与gRNA/Cas12a...
淋病奈瑟菌是引起性传播疾病淋病的人源宿主适应病原体，仍是全球公共卫生挑战，尤其在中低收入地区。开发可靠、简便、低成本且易用的检测方法对控制淋病传播至关重要。本研究首次报道将环介导等温扩增（LAMP）与聚合物纳米颗粒生物传感器（PNB）联用（LAMP-PNB），用于临床样本中淋病奈瑟菌的识别。基于orf1基因设计的LAMP引物可建立有...
本研究针对严重急性呼吸综合征冠状病毒2（SARS-CoV-2）快速检测需求，建立了多重逆转录环介导等温扩增联合纳米颗粒侧流层析生物传感器（mRT-LAMP-LFB）方法。该方法以SARS-CoV-2的RdRp和N基因为靶标，在63°C等温扩增30 min，随后用侧流层析试纸条对扩增产物进行可视化判读。试纸条检测线1固定抗FAM抗体，...
II类CRISPR-Cas系统旁切活性使CRISPR核酸诊断成为高精度核酸检测方法。胶体金侧流免疫层析试纸条（LFA）与CRISPR/Cas核酸检测联用时，常存在背景较高和肉眼判读主观性。本文构建了由Cas12a核酸检测与上转换荧光技术（UPT）侧流层析试纸条（UPT-LFA）组成的Cas12a-UPTLFA平台，并用于鼠疫杆菌（Y...
准确、灵敏且快速的核酸检测对于及时实施治疗措施和控制疾病传播具有重要意义。本文开发了一种新型便携式生物传感器平台，将熵驱动扩增策略整合到侧流层析（LFA）试纸条中，用于高灵敏、高特异地检测核酸。研究发现，引入熵驱动扩增策略可在LFA试纸条检测线上产生明亮荧光，从而提高目标核酸检测灵敏度。所构建的LFA生物传感器对目标DNA和H1N1...
纸基纳米生物传感器已成为分析动物和人类病原体的优良平台，其中侧流层析试纸条或生物传感器特别适合在实验室和现场进行灵敏、快速、稳健且准确的检测。病毒RNA检测对公共卫生和动物卫生保护具有重要意义。本方案聚焦于开发一种功能化金纳米颗粒侧流生物传感器，用于检测鱼神经坏死病毒（Nodavirus）核酸。从鱼样本中提取总病毒RNA，经逆转录P...
非洲猪瘟病毒（ASFV）等跨境病原体仍对公共卫生和食品安全构成严重社会经济威胁，亟需更廉价、快速且准确的诊断方法。近年来，CRISPR 系统的发展使基于 Cas13 和 Cas12/14 的核酸检测成为可能，这些系统可通过识别靶标核酸并副切割单链 DNA 报告子来报告靶标存在。现有方法多依赖荧光标记报告子和昂贵仪器，存在读数复杂、背...
本文报道了一种基于三螺旋DNA（THD）功能化碳纳米管（CNT）上目标诱导分子开关的简便高效方法，利用侧流核酸生物传感器（LFNAB）同时视觉检测核酸和蛋白。氨基修饰的信号DNA探针P1/P1'通过羧基-氨基脱水缩合固定于短化羧基多壁CNT表面，辅助DNA探针P0/P0'与P1/P1'杂交形成THD，使信号探针处于保护状态。当目标D...
鼻咽癌（NPC）是全球常见恶性肿瘤之一，多项研究将EB病毒（EBV）感染与其发生发展相关。目前EBV检测常用PCR、原位杂交和免疫检测，但存在步骤繁琐、易出现假结果等不足，因此需要快速、准确、灵敏的临床诊断方法。本研究建立了一种基于CRISPR-Cas12a与侧流层析生物传感器（LFB）的EBV检测方法。Cas12a在识别目标DNA...
百日咳鲍特菌是引起百日咳的呼吸道传染病病原体，快速准确检测对临床诊断具有重要意义。多重交叉置换扩增（MCDA）是一种新型等温扩增分子检测方法，可克服现有方法的部分不足。本研究建立并优化了一种基于MCDA与纳米颗粒侧流生物传感器（MCDA-LFB）的百日咳鲍特菌检测方法。研究针对百日咳毒素（PT）启动子区设计10条引物，在64 ℃反应...
扩增反应与电泳或实时荧光系统联用已成功用于核酸分析，但复杂步骤或昂贵仪器限制其在低资源环境中的应用。为克服这些不足，作者将链交换扩增（SEA）与侧流层析试纸条（LFA）集成，构建了一种通用且简单的检测平台。SEA 是一种简单的等温扩增反应，仅需一对引物和一种 DNA 聚合酶，且其短扩增产物易于在试纸条上迁移。LFA 试纸条可稳定保存...
CRISPR/Cas系统因Cas效应蛋白（如Cas12、Cas13）的伴随切割活性，在核酸检测生物传感器中展现出巨大潜力。然而，现有CRISPR/Cas检测平台通常依赖核酸扩增、昂贵荧光仪器或侧流层析试纸条，限制了现场应用。本文报道了一种简单、低成本、超灵敏的DNA探针侧流层析生物传感器（LFB），将CRISPR/Cas与环介导等温...
肺炎支原体（Mycoplasma pneumoniae, M. pneumoniae）是肺炎及支气管炎等呼吸道感染的重要病原体。本研究建立并应用多重交叉置换扩增（multiple cross displacement amplification, MCDA）耦合纳米颗粒侧流生物传感器（lateral flow biosensor, ...