KinCon: Cell-based recording of full-length kinase conformations.
激酶改变具有不同的功能特征,需要针对激酶突变的治疗策略。除磷酸转移活性、蛋白丰度和分子间相互作用外,特定患者突变还可诱导病理性激酶构象。尽管靶向临床相关肿瘤激酶功能的先导分子研究取得重要进展,但许多激酶仍未纳入药物发现。部分原因在于追踪激酶活性存在困难。需要化学探针来功能注释激酶功能,而某些激酶活性并不依赖磷酸转移,这类非催化功能与...
激酶改变具有不同的功能特征,需要针对激酶突变的治疗策略。除磷酸转移活性、蛋白丰度和分子间相互作用外,特定患者突变还可诱导病理性激酶构象。尽管靶向临床相关肿瘤激酶功能的先导分子研究取得重要进展,但许多激酶仍未纳入药物发现。部分原因在于追踪激酶活性存在困难。需要化学探针来功能注释激酶功能,而某些激酶活性并不依赖磷酸转移,这类非催化功能与...
过氧化氢(H2O2)是酶促反应的主要产物,在细胞代谢与信号转导中具有重要作用,其浓度可作为生物健康指标。本文报道了一种镍铁普鲁士蓝类似物纳米立方体掺杂二硫化钼并负载金纳米颗粒(Au@PBA(Ni–Fe):MoS2)的非酶电化学生物传感器,用于中性溶液中长时间稳定检测 H2O2。首先通过电荷组装法合成 PBA(Ni–Fe) 纳米立方体...
本文展示大环主体葫芦[8]脲(CB[8])与荧光染料二甲基二氮杂吖丙啶双阳离子(MP)自组装形成结合型生物传感体系,其空腔可同时捕获吲哚胺 2,3-双加氧酶 1(IDO1)的上游底物色氨酸(Trp),从而提供一种无标记、实时监测 IDO1 活性的方法。将过表达 IDO1 的恶性 HeLa 和 HepG2 细胞与该结合型生物传感器孵育...
流感疫情每年造成数百万重症和数十万死亡,现有疫苗因病毒频繁变异而保护有限,亟需快速监测流感病毒感染的实验方法。此前虽已构建携带荧光蛋白或小型荧光素酶的复制型报告病毒,但每种病毒株均需反向遗传改造,费时且不便。本研究利用流感A病毒核蛋白(NP)特异性纳米抗体,构建了一种NP依赖的报告基因转录激活模块。该模块将Gal4 DNA结合域(D...
本文报道了一种用于超灵敏检测细胞表面蛋白酪氨酸激酶-7(PTK7)的生物传感器。该传感器基于适配体构象协同酶辅助表面增强拉曼散射(ACCESS)技术,将 PTK7 特异性识别与 Exo III 酶辅助核酸扩增相结合。角鱼适配体识别膜蛋白 PTK7 后发生构象改变,暴露诱饵 DNA 片段,进而触发探针 DNA 的酶切循环扩增,产生多条...
实时、准确监测活细胞分泌的过氧化氢(H2O2)对临床诊断和疾病管理具有重要意义。本文报道了一种低成本、自支撑的二硫化钼(MoS2)纳米片阵列电极,用于非酶电化学检测 H2O2。该电极通过在碳布(CC)上直接生长 MoS2 纳米片阵列构建,具有丰富催化位点、高导电性和低电荷转移电阻。在最优条件下,MoS2/CC 电极表现出优异的电催化...
本补充说明针对此前报道的用于坏死性凋亡(necroptosis)的 FRET 生物传感器进行更正。作者指出,原文章中所述的人源 SMART 生物传感器并不包含用于替代 MLKL 对应 a 区和 b 区的 SAGG 重复序列。在收到小鼠和人源 SMART cDNA 的请求后,作者发现人源 SMART 序列与人源 α15 完全相同,而 ...
监测活细胞中超氧阴离子(O2•−)因其重要代谢作用而备受关注。本文将超小纳米Mn3(PO4)2限域于壳聚糖中,设计由纳米线编织的蓬松球状结构,并构建基于CTS-Mn3(PO4)2的原位检测芯片,用于小鼠乳腺癌细胞4T1释放超氧阴离子的电化学传感。壳聚糖优异生物相容性和较大微球尺寸降低检测界面对活细胞的损伤与毒性,壳聚糖中超小纳米Mn...
丙二酰辅酶A(malonyl-CoA)是脂肪酸代谢的关键中间体和蛋白质翻译后修饰的重要供体,但其在活细胞中的原位检测长期缺乏有效工具。本研究开发了一种遗传编码生物传感器FapR-NLuc,将可特异性结合malonyl-CoA的细菌转录因子FapR与工程化荧光素酶NanoLuciferase(NLuc)融合。FapR-NLuc以同源二...
本研究提出一种通过优化共进料策略,将正电荷 NiAl 层状双氢氧化物(LDH)纳米片与负电荷石墨烯(G)单层周期性堆叠,构建 NiAl LDH/G 层层自组装(LBL)纳米复合材料的策略,并将其用于活细胞释放多巴胺(DA)的敏感检测,作为帕金森病(PD)早期诊断工具。PD 是第二常见的慢性神经退行性疾病,黑质多巴胺能神经元在临床诊断...
细胞内过氧化氢(H2O2)的选择性和定量检测对于理解其在生理与病理过程中的作用至关重要。本文报道了一种新型电化学 H2O2 生物传感器,通过将辣根过氧化物酶(HRP)负载于树枝状介孔二氧化硅纳米颗粒(DMSNs)上构建 HRP/DMSNs,用于活细胞 H2O2 检测。得益于 DMSNs 的大孔体积和高可及内表面积,HRP/DMSNs...
微小RNA(miRNA)是调控基因表达的重要非编码RNA,疾病相关miRNA表达调控对基础研究和治疗均具有重要意义。本文提出一种高通量筛选策略,用于在活细胞中鉴定调控miRNA表达的小分子。该策略基于由肽核酸(PNA)和纳米氧化石墨烯(NGO)组成的新型生物传感器,通过定量荧光信号实时监测活细胞内目标miRNA水平,并同时观察与mi...
本文提出一种巧妙且可行的方法,通过热解封装金纳米粒子的沸石咪唑酯骨架材料-67(Au@ZIF-67),制备含碳并封装金纳米粒子的异质氧化钴十二面体(Au@C-Co3O4)。所得材料具有分级多孔结构、丰富活性位点、优异导电性和良好耐久性,可显著提升生物传感器的分析性能。基于该多孔复合材料的电极对过氧化氢表现出显著电催化性能,检测限为1...
超氧阴离子(O2•−)在生物功能中具有重要双重作用,其准确检测具有关键学术和医学诊断意义。本文通过简便水热法结合脱合金工艺制备了中空多孔 PtAg 纳米球(PtAg HPNSs)。所制备的 PtAg 纳米球具有中空内部和多孔壳层,壳层由互连韧带和孔组成,典型尺寸约 4 nm。得益于独特的中空多孔结构和特定合金效应,PtAg HPNS...
本研究通过反转纳米压印技术制备了三维多层等离子体纳米结构,其由位于SU-8纳米柱顶部的Au纳米方块、中间Au非对称纳米结构和底部Au非对称纳米孔组成。与二维和准三维等离子体纳米结构相比,该三维多层结构具有更高的电磁场强度、更长的等离子体衰减长度和更大的等离子体传感面积,有利于高灵敏度局域表面等离子体共振生物传感器。通过改变上下SU-...
G蛋白偶联受体(GPCRs)是调控细胞功能的关键信号蛋白。本研究显示,mini G(mG)蛋白是稳健探针,可用于多种检测格式报告活细胞中GPCR活性。mG蛋白是工程化Gα亚基GTPase结构域,最初用于活性GPCR结构研究。共聚焦成像显示,融合荧光蛋白的mG蛋白弥散分布于胞质,并在细胞表面和细胞内细胞器的受体激活位点转位。与荧光蛋白...
一氧化氮(NO)是参与多种生理病理过程的跨细胞信使,但由于其扩散快、浓度低、半衰期短,生物体系中实时检测仍具挑战。本文构建了一种基于酞菁铁(FePc)功能化氮掺杂石墨烯(N-G)纳米复合物的新型电化学传感平台,用于原位监测传感层上活细胞释放的 NO。利用 N-G 与 FePc 的协同效应,N-G/FePc 传感器对 NO 表现出优异...
本研究开发了一种基于碳氮化物纳米片(CNNS)和催化发夹组装(CHA)的超灵敏荧光开启型原位检测方法,用于检测活细胞内 microRNA(miRNA)。CHA 对低水平生物标志物具有良好的信号放大能力,CNNS 则可作为荧光猝灭剂和基因载体,且 CHA 的发夹 DNA 可吸附在 CNNS 表面。作者据此设计了一种无酶荧光生物传感器,...
本文利用二硫化钼纳米片-金纳米棒杂化材料(MoS2-Au)固定过氧化氢酶(CAT),构建了一种高灵敏过氧化氢(H2O2)电化学生物传感器,用于可靠测定活细胞释放的H2O2。通过透射电子显微镜(TEM)、紫外-可见光谱(UV–vis)、傅里叶变换红外光谱(FT-IR)和拉曼光谱表征,发现MoS2-Au杂化材料为CAT吸附提供了优良基质...
本文设计并合成了一类新型无金属纳米碳催化剂——氮(N)和硫(S)共掺杂石墨烯量子点/石墨烯(NS-GQD/G)杂化纳米片,用于灵敏检测过氧化氢(H2O2)。NS-GQD/G通过两步法制备:首先将石墨烯量子点(GQDs)经水热处理自组装到石墨烯纳米片上,形成杂化纳米片;随后将该杂化纳米片与硫脲进行热退火,得到NS-GQD/G杂化纳米片...