志贺氏菌是引起细菌性痢疾的主要病原体，其中志贺氏菌 S. sonnei 在发达地区最常见，在未发达地区居第二位。本研究建立多重交叉置换扩增（MCDA）联合侧流层析生物传感器（LFB）方法，用于检测携带 ipaH 和 wbgX 基因的致病性 S. sonnei 菌株。多重 MCDA-LFB 在 63°C 恒温纯培养条件下，30 min...
流感嗜血杆菌（Haemophilus influenzae）是机会致病菌，常引起儿童菌血症、脑膜炎和肺炎。本文开发了一种基于多重交叉置换扩增（MCDA）和实时荧光技术的快速检测方法。研究设计了10条引物用于H. influenzae实时MCDA反应，并按实时MCDA原理将核心引物修饰上限制性内切酶识别序列、荧光基团和淬灭基团。反应在...
本研究开发基于杂交级联加链置换扩增（HyCaSD）的分子信标生物传感器，用于高效检测病毒RNA。HyCaSD发夹探针两端分别标记Cy5荧光基团和BHQ3淬灭基团；无靶标时探针保持发夹结构，荧光被淬灭；靶标RNA与探针环区特异性杂交后，发夹打开，荧光基团与淬灭基团分离，立即产生荧光信号。该方法无需后染色，避免核酸染料非特异结合造成的假...
由脑膜炎奈瑟菌（Neisseria meningitidis）引起的脑膜炎球菌病仍是全球重大公共卫生问题，A、B、C和W135为主要致病血清群，及时检测并区分这些血清群至关重要。本研究建立了多重交叉置换扩增-侧流层析生物传感器（MCDA-LFB）检测体系，分别靶向ctrA、sacB、siaD、siaD和synG基因，用于检测脑膜炎奈...
本研究将逆转录重组酶聚合酶扩增（RT-RPA）分别与荧光检测平台和侧流生物传感器（LFB）结合，用于快速检测猪脑心肌炎病毒（EMCV）。针对EMCV 3D基因高保守区设计引物和探针，qRT-RPA与LFB RT-RPA最佳反应条件均为42 ℃、20 min。两种方法对EMCV具有高度特异性，与7种其他猪源病毒无交叉反应。以10倍系列...
适配体因特异性高、稳定性好、易于筛选和修饰，已成为生物传感器中重要的识别元件。微芯片作为新型分析检测平台，在生化传感、医学诊断和环境监测中快速发展。本文综述了适配体信号放大策略与微芯片结合的高灵敏生物分析应用，系统介绍微流控芯片、纸基芯片和微阵列芯片三类平台的特点。重点讨论酶介导放大（PCR、RCA、LAMP、SDA、NASBA、R...
新冠疫情凸显了快速、灵敏病原检测方法的迫切需求。本文提出 CASCADE（基于 CRISPR/Cas 的比色核酸检测）系统，用于快速、特异性地肉眼检测 SARS-CoV-2 RNA。该方法中，病毒 RNA 由 LwaCas13a 蛋白识别，识别后激活其副切割 RNase 活性，切割偶联在金纳米颗粒（AuNPs）表面的单链 RNA 寡...
在抗击2019冠状病毒病（COVID-19）全球大流行中，核酸检测亟需简便、快速、灵敏的工具。PCR是经典核酸检测方法，具有高灵敏度和特异性，但依赖热循环，需要昂贵设备、专业人员且周转时间长。目前，成簇规律间隔短回文重复序列（CRISPR）生物传感器已成为核酸检测的有力工具，并可在生理温度下运行，易于组装为即时检测设备。微流控芯片有...
伯克霍尔德菌（Burkholderia pseudomallei）是高致病性病原菌，可引起类鼻疽，在多个热带发展中国家构成重要公共卫生问题。本研究提出并验证了一种新型检测方法——多重交叉置换扩增联合纳米颗粒侧流生物传感器（MCDA-NB），用于鉴定伯克霍尔德菌并诊断类鼻疽。B. pseudomallei-MCDA 针对III型分泌系...
本文初步验证氧化石墨烯（GO）纳米片可增强重组酶聚合酶扩增（RPA）。GO 通过吸附 RPA 反应组分诱导局部聚集，提高扩增效率；重组酶先与引物结合形成核蛋白丝并被 GO 吸附，改变其结构。基于 GO 增强 RPA 构建了等温荧光“开启”生物传感器，用于检测 RNA 干扰（RNAi）转基因植物。FAM 标记引物被 GO 吸附并通过荧...
背景：结核病（TB）是由结核分枝杆菌复合群（MTBC）引起的严重慢性传染病，因此开发新型、简便、快速且灵敏的MTBC检测方法对结核病防治具有重要意义。结果：本研究建立了多重交叉置换扩增（MCDA）联合纳米颗粒侧流层析生物传感器（LFB）同时检测MTBC两个靶基因（IS6110和mpb64）的方法（MCDA-LFB）。针对IS6110...
热带念珠菌（Candida tropicalis）是日益重要的机会致病真菌，可引起危及生命的侵袭性念珠菌病。传统培养鉴定需3–7天，难以满足快速诊断需求。本研究建立多重交叉置换扩增（MCDA）联合纳米颗粒侧流层析生物传感器（LFB）检测热带念珠菌。MCDA体系设计10个引物靶向热带念珠菌ITS II基因，在等温扩增仪中扩增；扩增产物...
幽门螺杆菌（Helicobacter pylori, H. pylori）的非侵入性检测在临床实践中具有重要意义，但现有方法多依赖昂贵设备或流程复杂，难以用于流行病学调查。本研究旨在建立一种基于CRISPR-Cas12a技术、可靠、快速且经济的非侵入性方法，用于粪便标本中H. pylori的检测。作者建立了新型CRISPR-Cas1...
本文开发了一种无试剂 DNA 传感器，结合金纳米颗粒、修饰引物和等温扩增，用于直接检测等温扩增产物，并以有毒微藻 Karlodinium armiger 作为模型分析物。平均直径 14 ± 0.87 nm 的胶体金纳米颗粒用巯基化 33-mer DNA 探针和 (6-巯基己基)二茂铁混合自组装单分子层修饰。修饰引物在引物结合位点与工...
快速诊断、患者隔离和接触追踪是控制2019冠状病毒病（COVID-19）传播的关键措施。核酸检测仍是当前诊断标准，但多依赖中心实验室，耗时较长。本文报道一种便携式现场检测系统CODA（CRISPR光学各向异性检测），将等温核酸扩增、CRISPR/Cas12a激活和信号产生整合于单一反应体系中，减少人工操作。该系统以荧光各向异性的比率...
滚环扩增（RCA）是一种高效的酶促等温反应，以环状探针为模板，在短DNA或RNA引物启动下生成含有长串联重复序列的单链DNA或RNA产物。作为天然滚环复制的简化衍生技术，RCA无需热循环即可快速扩增环状模板，在分子生物学中具有多种应用。与其他扩增策略相比，RCA具有明显优势：锁式探针连接需要严格互补，使其具有较高特异性，甚至可区分单...
植物病害显著影响全球经济，线虫、病毒、细菌、真菌和类病毒等植物病原微生物是多数植物传染病的主要病因。在可持续农业中，培育无病植株并早期诊断病原对保障田间产量和植物健康至关重要。本文综述了可用于植物病原检测的生物传感技术，包括基于DNA杂交的电化学、伏安、阻抗、SPR、QCM、酶联免疫、适配体、噬菌体、纳米材料、等温扩增、纸基微流控和...
外泌体miRNA（exo-miRNAs）来源于肿瘤细胞，在肿瘤发生发展中发挥重要作用，可作为癌症诊断的潜在生物标志物。然而，高灵敏度样品前处理与分析技术不足限制了其临床应用，因此发展敏感、可靠的外泌体miRNA传感方法对医学诊断至关重要。近年来，多种生物传感器策略被提出，包括纳米材料、等温信号放大和微流控芯片等，用于外泌体miRNA...
由SARS-CoV-2引发的全球新冠疫情构成前所未有的人道主义危机。鉴于其影响严重，亟需开发灵敏、特异、快速且可负担的临床诊断技术。实时逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）平台被视为检测病毒RNA的金标准，但可能受误差影响并存在假结果风险，从而影响疾病管理。已开发多种现代技术，对SARS-CoV-2相关病毒组分或免疫应答具有更高灵敏度...
杂交链反应（HCR）可分为线性HCR和非线性HCR。传统线性HCR动力学较慢、灵敏度不足，限制其应用。非线性HCR在引发序列触发下，经合理设计的底物序列（发夹或无发夹）自组装成树状或分支DNA纳米结构，具有指数增长动力学。凭借无酶、高阶增长动力学、高灵敏度和操作简便等优势，非线性HCR被视为与多种传感平台整合后检测生物标志物的强效信...