Ras同源家族成员A（RhoA）是细胞骨架动态、分裂、迁移和黏附等过程中的信号枢纽。RhoA活性受到严格的时空控制，但其下游效应器是否共享相同的激活动态仍不清楚。本研究开发了一种新型单色FRET生物传感器，用于在活细胞中以高时空分辨率测量Rho相关激酶（ROCK）活性，并验证了Rho激酶活性报告器（RhoKAR）的性能。RhoKAR...
荧光偏振（FP）技术已应用于化学物质和生物分子的检测，服务于早期诊断、食品安全分析和环境监测。与传统有机染料相比，量子点等无机纳米材料具有特殊荧光性质，可提高基于FP的生物传感体系的光稳定性；金属纳米颗粒等纳米材料还可作为信号放大器，通过增大荧光团有效质量或产生金属增强荧光效应来提高FP值。本文综述了不同类别纳米材料在FP生物传感器...
有机磷农药（OPs）的滥用会造成环境污染并威胁人体健康，亟需简单、高效且灵敏的检测方法。本文建立了一种基于二氧化锰纳米片（MnO2 nanosheets）信号增强的新型放大荧光偏振（FP）生物传感器，用于高灵敏检测OPs。在该体系中，OPs可高效抑制乙酰胆碱酯酶（AChE）活性，阻断乙酰硫代胆碱（ATCh）水解生成硫代胆碱（TCh）...
生物标志物的灵敏、选择性检测在疾病诊断、药物发现和癌症早筛中至关重要，这高度依赖生物传感技术的持续发展。荧光各向异性/偏振（FA/FP）分析因操作简便、响应快速且无背景干扰而受到关注。近几十年来，随着功能核酸（FNA，包括适配体和核酸酶）的发展，FA/FP 传感器取得重大进展。本综述聚焦于基于 FNA 的 FA/FP 传感器对核酸、...
系统进化指数富集（SELEX）是适配体研究的核心，适配体在生物传感器和医学中有广泛应用。为提高所选适配体的亲和力，作者提出一种基于适配体-配体复合物精确二级结构的结构导向 SELEX 后优化方法，并以赭曲霉毒素 A（OTA）适配体为例进行验证。在结构指导下，作者设计了一种新适配体，其亲和力提高 50 倍以上。作者还测定了新适配体-O...
细胞外囊泡（EVs）是由所有细胞主动分泌的膜结合磷脂囊泡，携带亲代细胞特异性标记，可用于液体活检中识别特定细胞。为支持基于 EV 的临床诊断，快速可靠的 EV 计数方法至关重要。本文开发了一种基于荧光偏振（FP）检测亲脂性荧光素探针 5-十二酰氨基荧光素（C12-FAM）的 EV 快速、低成本定量方法。C12-FAM 的烷基尾可特异...
本研究将可识别四种来源脂多糖的80 nt广谱ssDNA适配体LA80进行截短，采用基于二级结构的茎环截短和删除固定引物区两种策略，获得LA27等截短适配体。LA27保留广谱识别能力，且对LPS的结合亲和力提高，Kd为46.2±9.5 nM，约为全长LA80（102±17 nM）的一半。作者建立以氧化石墨烯（GO）为信号增强剂的荧光偏...
银离子虽在抗菌、电子和生物传感等领域有应用，但也是环境污染物并危害人体健康，因此需要快速灵敏的检测方法。本文开发了一种基于巯基-DNA功能化金纳米颗粒（AuNPs）的荧光偏振传感器，用于水溶液中银离子（Ag+）的检测。该策略利用Ag+与DNA双链中胞嘧啶-胞嘧啶（C-C）错配位点特异性结合，形成稳定的金属介导胞嘧啶-Ag+-胞嘧啶（...
银离子（Ag+）对水生生物具有高度毒性，并可经食物链在人体内富集，因此需要灵敏、选择性定量检测痕量银离子的方法。本研究首次提出一种二氧化锰（MnO2）纳米片辅助、基于配体-DNA相互作用和荧光偏振（FP）的银离子检测方法。Ag+加入预先形成的丙啶（Proflavine, PF）-DNA复合物后，诱导PF释放，引起荧光偏振的弱变化；随...
开发高灵敏、高选择性检测超低浓度肿瘤标志物的方法对癌症疗效评估和早期临床诊断具有重要意义。本文利用TiS2纳米片作为荧光偏振（FP）增强剂，并采用Zn2+依赖的自水解脱氧核酶（DNAzyme）作为催化剂，建立了两种FP放大检测策略，用于生物分子检测。一种策略基于小分子连接DNA的末端保护：生物分子与DNA-小分子嵌合体中的小分子结合...
本文报道了一种基于二氧化硅纳米颗粒–DNA/银纳米团簇三明治结构增强荧光偏振效应的新型均相生物传感器，用于乙型肝炎病毒DNA（HBV DNA）的灵敏、选择性检测。该体系以50 nm SiO2 NPs为生物相容性载体，通过链霉亲和素与生物素的高亲和力相互作用固定5'端生物素标记的En-DNA探针；Ag-DNA探针形成DNA/Ag NC...
荧光偏振（FP）检测结合荧光标记适配体近年来备受关注，但小分子结合仅引起标记适配体分子量微小变化，使其难以用于小分子检测。为此，本文报道了一种用于高灵敏检测小分子的FP适配体检测方法，并引入新型信号放大策略。以腺苷为模型靶标，在无腺苷存在时，游离的FAM标记适配体可被核酸酶切割，FAM标记核苷酸片段从dT-生物素/链霉亲和素复合物中...
本文综述了用于溶液相检测的纳米材料双换能器生物传感器。传统生物传感器通常以单一纳米材料作为信号换能器，而双换能器设计通过两种纳米材料或一种纳米材料与有机发光剂协同，可进一步提高灵敏度、选择性和设计灵活性。文章首先介绍量子点、金属纳米粒子、上转换纳米粒子、石墨烯/氧化石墨烯、碳纳米管和碳纳米点等常用纳米换能材料的性质、作用及挑战。随后...
本文通过理性修饰雌激素受体（ER）蛋白配体结合域（LBD）的氨基酸组成，调控其配体结合特性。作者将已知雌激素受体-配体复合物的序列比对、结构分析与计算模拟相结合，预测了若干具有改变结合特性的 ER 突变体。随后通过定点突变制备单点突变重组蛋白，并采用竞争结合实验验证其结合特性。结果表明，部分突变体对某些内分泌干扰化学物（EDCs）的...
近年来，抗体基荧光生物传感器因可用于均相免疫分析和成像探针而受到关注。无试剂生物传感器将分子识别模块与信号换能模块整合到分子尺度，理想情况下无需额外试剂即可连续定量检测分析物。本文综述了基于抗体及天然或工程化结合蛋白的多种荧光无试剂传感策略，包括荧光偏振免疫分析（FPIA）、荧光相关光谱（FCS）、荧光共振能量转移免疫分析（FETI...
本文报道了一种基于荧光偏振（FP）的血栓素适配体生物传感器，采用链霉亲和素包覆的硅纳米颗粒（SNPs）作为增强探针。5'-生物素-GGTTGGTGTGGTTGG-3'血栓素适配体（biotin-TBA1）通过生物素-链霉亲和素特异性结合固定在SNPs表面。加入荧光素标记的血栓素适配体（FAM-TBA2）后，在血栓素存在下，TBA1和...
本文构建了一种基于DNAzyme自组装金纳米棒（AuNRs）的荧光共振能量转移（FRET）或荧光偏振（FP）方法，用于水溶液中Cu2+的超灵敏、选择性检测。该体系以3'-TAMRA标记的DNAzyme底物链（Sub）和酶链（Enz）为识别探针。无Cu2+时，Sub-Enz双链通过静电作用吸附于正电荷AuNRs表面，使TAMRA与Au...
本文报道了一种基于金纳米颗粒（AuNPs）荧光偏振增强效应和λ核酸酶（λ exo）切割反应的荧光偏振（FP）纳米传感器，用于检测T4多聚核苷酸激酶（T4 PNK）活性及其抑制。该传感器以3'端修饰AuNPs的DNA发夹探针为T4 PNK底物，在ATP存在下，T4 PNK将DNA 5'-羟基磷酸化，λ exo随即切割5'-磷酸化末端，...
本文报道一种可重复使用、高灵敏的荧光偏振（FP）生物传感器，用于罐装鱼中总汞（Hg2+）检测。以链霉亲和素修饰的超顺磁性氧化铁纳米颗粒（MNPs）为增强探针，将含胸腺嘧啶（T）的单链 DNA（ssDNA）通过生物素–链霉亲和素作用固定于 MNPs 表面；另一条 5′-FAM 标记的含 T ssDNA 作为荧光探针。Hg2+ 可特异性...
本研究从噬菌体展示七肽库中筛选出可结合爱德华菌（Edwardsiella tarda, E. tarda）的肽配体，并分别以荧光素和生物素标记该肽，建立两种敏感检测方法。首先，荧光标记肽用于荧光偏振（FP）检测。由于 FP 灵敏度在荧光团连接小分子并结合大分子靶标时最高，小肽-荧光素探针适合检测细菌。该 FP 方法可在 5.2×10...