Monitoring RAYT activity by surface plasmon resonance biosensor.
DNA转座涉及可移动遗传元件(TE)的结合、切割与重组,由TE编码的转座酶催化。REP相关酪氨酸转座酶(RAYT)是一类与IS200/IS605转座酶相关的Y1核酸酶,与细菌重复基因外回文序列(REP)相关。尽管已有研究证实大肠杆菌RAYT具有DNA结合和切割活性,但其DNA插入机制尚未完全阐明。本文证明,表面等离子共振(SPR)生...
DNA转座涉及可移动遗传元件(TE)的结合、切割与重组,由TE编码的转座酶催化。REP相关酪氨酸转座酶(RAYT)是一类与IS200/IS605转座酶相关的Y1核酸酶,与细菌重复基因外回文序列(REP)相关。尽管已有研究证实大肠杆菌RAYT具有DNA结合和切割活性,但其DNA插入机制尚未完全阐明。本文证明,表面等离子共振(SPR)生...
流感是上呼吸道感染中最常见的疾病之一。目前用于治疗的奥司他韦和扎那米韦等抗病毒药物均为神经氨酸酶(NA)抑制剂,但病毒可通过 NA 的单点突变产生耐药。现有耐药监测多采用标记酶法,因标记产物半衰期短和实验条件波动而一致性较差。本文建立了一种无标记表面等离子共振(SPR)检测方法,用于测量 NA 与抗病毒药物之间的结合亲和力。野生型(...
本文提出一种基于无标记金纳米粒子(AuNPs)的比色适配体传感器新策略,用于腺苷脱氨酶(ADA)活性检测。该传感器由腺苷(AD)适配体、AD 和 AuNPs 组成,利用 AuNPs 的表面等离子共振光学性质及其与单链 DNA 的相互作用。无 ADA 时,AD 与适配体结合形成网格结构,在适当 NaCl 浓度下 AuNPs 聚集,溶液...
G蛋白偶联受体(GPCRs)是最大的一类膜受体家族,其配体包括光、肽类、激素、神经递质和小分子化合物,参与多种生理过程,具有重要治疗潜力。GPCR功能通常通过细胞实验测定,但细胞实验复杂,限制了应用;无细胞实验又受限于七次跨膜受体纯化后功能性质易改变。已有多种将GPCR固定于生物传感器表面的方法,包括抗体捕获、亲和素/生物素捕获,或...
本综述系统总结了表面等离子共振(SPR)这一重要光学生物传感技术在药物发现过程和药物化合物质量分析中的应用及其特点。文章介绍了 SPR 的常见检测格式与实验问题,并说明其如何用于药代动力学药物分析、ADMET 研究、高通量筛选以及基于片段的药物筛选,其中后者重点讨论小分子药物检测。综述还阐述了经典 SPR 方法的优势,以及局域表面等...
环亚麻肽(CLs)是亚麻籽中的八肽、九肽和十肽,可能具有免疫抑制和抗肿瘤活性,但药代动力学研究较少。人血清白蛋白(HSA)是血液中最丰富的蛋白,是有机溶质转运的重要介质;化合物与HSA结合可能影响其生物利用度和药效。定量分析化合物与HSA的相互作用对生物医学应用开发很重要。本研究利用表面等离子共振(SPR)生物传感器可靠测定多种CL...
微小RNA(miRNAs)是一类内源性非编码小RNA分子,因异常表达可作为癌症诊断、预后和预测的生物标志物。为此,作者制备了一种基于局域表面等离子共振(LSPR)的新型无标记纳米生物传感器,用于痕量寡核苷酸检测。当修饰在单个金纳米颗粒表面的探针单链DNA与目标寡核苷酸杂交时,颗粒表面介电常数发生变化,导致其散射峰位置出现明显红移。该...
表面等离子共振(SPR)生物传感是一种高灵敏度、无标记的光谱技术,可在实时条件下定量检测生物分子间的非共价相互作用,尤其适用于蛋白–蛋白及蛋白–小分子相互作用研究。本文综述了 SPR 方法的基本原理、传感芯片表面化学与配体固定化策略,以及检测条件优化。作者利用该平台研究类胡萝卜素结合蛋白及其类胡萝卜素配体,以评估相互作用的特异性、结...
本研究开发了一种基于目标引物滚环扩增(RCA)的表面等离子共振(SPR)DNA生物传感器阵列,用于等温、快速检测结核分枝杆菌复合群(MTBC)和鸟分枝杆菌复合群(MAC)两种致病分枝杆菌。针对16S–23S rRNA基因内部转录间隔区(ITS)设计种特异性锁探针(PLP)。PLP与目标序列杂交后经连接环化,目标序列可作为引物启动RC...
小分子有机化合物对 DNA 的序列特异性识别为外部调控基因表达提供了潜在有效途径,也是细胞生物化学的重要目标。基于已知模块的理性设计可能获得与特定 DNA 序列强而选择性结合的化合物。一种初步策略是从常见的 A·T 碱基对识别分子出发,引入 G·C 识别单元。本文报道了一种合成化合物与 DNA 的相互作用,该化合物利用氮杂苯并咪唑基...
适配体是具有特定三维结构的短合成单链 DNA 或 RNA 分子,是生物传感器中有前景的识别元件。通过指数富集系统进化配体(SELEX)过程,可在体外获得对多种分析物高灵敏、高特异的适配体。本研究旨在选择两组单链 DNA 适配体,使其均能结合 17β-雌二醇(E2)环戊烷多氢菲环上的不同功能基团。通过反复交替以 E2 正选、诺龙(no...
第51家族糖基转移酶(GT51)催化脂质II(lipid II)聚合形成线性糖链,经转肽酶交联后构成细菌肽聚糖。GT是重要的抗菌靶点,深入理解其底物结合机制有助于设计新型抗生素。本研究采用基于表面等离子共振(SPR)的Biacore生物传感器,将莫诺霉素A(moenomycin A)胺衍生物固定于传感器芯片表面,用于研究底物类似物抑...
赭曲霉毒素A(OTA)是一类广泛存在于植物源食品中的氯酚类真菌毒素,具有免疫抑制、肾毒性、致癌和致畸等危害。本文开发了一种基于抗OTA适配体固定化传感器芯片的表面等离子共振(SPR)生物传感器,通过直接结合法对OTA进行定量检测。链霉蛋白作为交联剂固定在CM5传感器芯片表面,生物素标记的抗OTA适配体通过链霉蛋白-生物素相互作用被捕...
本研究开发了一种用于临床治疗药物监测的多通道全集成表面等离子共振(SPR)生物传感器,用于检测化疗患者血清中的抗肿瘤药物甲氨蝶呤(MTX)。该传感器以固定在 SPR 芯片上的人二氢叶酸还原酶(hDHFR)为生物受体,利用叶酸修饰金纳米颗粒(FA-AuNP)与 MTX 竞争结合 hDHFR。无 MTX 时,FA-AuNP 与 hDHF...
本研究探索L-甲硫氨酸衍生物作为核酸纯化潜在亲和配体的应用。作者以EDC/NHS活化L-甲硫氨酸的羧基,再将其固定到经乙二胺处理的胺传感器表面,使氨基游离用于与寡核苷酸相互作用。采用表面等离子共振(SPR)生物传感器定量测定该配体对寡核苷酸的亲和力。结果表明,对单碱基而言,胞嘧啶和胸腺嘧啶的亲和力最高,腺嘌呤次之,鸟嘌呤最低;对异源...
生物传感器本应是用于快速检测病原体、蛋白质及其他分析物的便携式低成本工具,全球生物传感器市场年规模已超过100亿美元,并在消费、医疗和工业检测中具有重要应用前景。然而,成本仍是其广泛商业化的关键障碍:虽然廉价电极、电路和组件的发展降低了部分成本,但多分析物生物传感器阵列的发展又推高了系统复杂度与成本。对于某些系统,通过再生实现传感器...
伤寒正重新成为第三世界国家重大健康威胁,现有免疫诊断方法因与其他感染症状重叠易出现假阴性。本研究在镀金表面构建5′-巯基修饰单链DNA探针自组装单层,制备基于表面等离子共振(SPR)的DNA杂交生物传感器,用于无标记实时监测沙门氏菌。探针选自伤寒沙门氏菌保守Vi荚膜抗原基因,具有高度特异性。在PBS中最低检测浓度为0.019 ng/...
本文综述等离激元生物传感器的基本原理、技术路线与实用化挑战。等离激元生物传感器可分为基于薄膜传播表面等离子共振(SPR)和基于纳米结构局域表面等离子共振(LSPR)两大类。薄膜SPR通常采用约50 nm金膜,通过棱镜全内反射激发,反射光在特定角度或波长出现极小,对界面折射率变化敏感,可无标记监测抗体-抗原、核酸杂交等相互作用并获取动...
植物螯合肽(phytochelatin, PC)是多种生物用于螯合和解毒重金属的小分子寡肽。本文报道了一种基于聚乙二醇化金纳米棒(PEG-AuNr)的无标记光学方法,用于监测水溶液中铅(II)离子(Pb(II))与偶联在纳米棒表面的植物螯合肽6(PC6)之间的相互作用。作者采用种子介导法,在 CTAB 和二羧基聚乙二醇(DPEG)存...
亲和蛋白因通常比小分子化合物具有更高特异性而推动了靶向治疗的发展,但其在健康组织中发生 on-target 结合仍可能引起副作用。本文设计并研究了一种用于提高 Affibody 分子组织特异性的前药策略。针对 HER2 受体的前药 Affibody(pro-Affibody)由 HER2 特异性 Affibody(ZHER2)与抗独...