电聚合硫堇作为氧化还原活性聚合物，用于构建测定生化需氧量（BOD）的双介体微生物生物传感器。通过循环伏安法和电化学阻抗谱研究导电体系的电化学特性。结果表明，基于聚硫堇（poly(thionine)）、单壁碳纳米管（SWCNT）和中性红（NR）的体系与酵母 Blastobotrys adeninivorans 的相互作用速率最高（ki...
酿酒酵母是研究人类 G 蛋白偶联受体（GPCR）的有力工具，因其可被耦合到酵母交配信号通路。然而，包括 μ 阿片受体在内的部分受体在酵母中缺乏功能，原因可能是酵母膜中主要存在麦角固醇而非胆固醇。本研究通过基因工程使酿酒酵母产生胆固醇，并引入多种 μ、δ 和 κ 阿片受体，构建了高敏感性的阿片生物传感器，能够重现激动剂结合谱和拮抗剂抑...
未折叠蛋白反应（UPR）是真核细胞应对内质网（ER）应激的高度保守反应，通常由未折叠蛋白积累触发。除与癌症等疾病相关外，UPR 诱导对真核细胞工厂的重组蛋白生产有显著影响，包括工业酵母酿酒酵母。能在单细胞水平准确检测和测量 ER 应激，有助于快速优化蛋白生产条件并实现高通量菌株筛选。现有监测酿酒酵母 UPR 的方法常与培养阶段在时间...
活性Zn(II)在诱导生物响应中起关键作用，因此开发用于活性Zn(II)定量的生物传感器具有重要意义。本研究证明，腺嘌呤缺陷酵母（Ade(−) yeast）在Zn2+存在下自荧光强度（FITC通道）增强。先将酵母培养24 h获得Ade(−)酵母，并将生物量（OD值）优化为0.03。随后在2.5 g/L D-葡萄糖中预培养1 h，再转...
蛋白质错误折叠与聚集与哺乳动物神经退行性疾病及生物技术中异源蛋白表达不佳相关，因此监测蛋白聚集的工具对疾病研究和提高异源宿主可溶蛋白表达均有用。本研究基于酵母对错误折叠蛋白的内源响应，开发了一种用于细胞质聚集蛋白的启动子-报告系统。作者首先通过蛋白质组学比较酵母表达可溶折叠蛋白与聚集倾向蛋白诱饵的响应，鉴定到蛋白折叠、热应激响应及泛...
将活细胞工程化用于生产化学品、酶和药物时，有限的内源辅因子可用性和表达负担会使细胞产生适应度缺陷，使其在长期生物过程中承受选择压力，最终可能导致高产工程细胞在群体水平被低产突变体取代。本文报道了用于生产香草醛-β-葡萄糖苷（vanillin-β-glucoside, VG）的适应度负担酿酒酵母细胞的突变图谱。基于转录组分析和对 VG...
细胞色素P450还原酶（CPR）从烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADPH）获取电子，并将其转移至活性细胞色素P450（CYP）位点，从而提供具有功能的CYP。本研究对一株酵母进行遗传工程改造，删除其内源CPR基因。在该CPR缺失（yRD−）酵母株中表达的人源CYP无活性。作者进一步考察促凋亡蛋白Bax能否替代CPR的缺失：Bax通过产...
本文报道了一种用于酵母全细胞生物传感器报告启动子的高分辨率扫描策略。作者以酿酒酵母为宿主，构建 VanO、BenO 和 PcaO 操作子在不同位置相对转录起始位点排列的启动子文库，分别由 pTEF1 或 pCYC1 启动子骨架承载，并驱动绿色荧光蛋白（GFP）报告基因表达。通过引入转录因子 VanR、BenM 和 PcaQ，研究香草...
本文报道了一种在酿酒酵母中优化的非转录荧光细胞检测法，用于测定 D-seco 修饰甾体衍生物对雌激素受体 α、雌激素受体 β 或雄激素受体配体结合域的相对亲和力。将类固醇受体配体结合域与黄色荧光蛋白在酵母中融合表达；加入已知类固醇配体后，受体二聚化引起荧光共振能量转移，使荧光强度增加，从而可按剂量和时间依赖方式估计受体结合亲和力。利...
本文研究了单介体和双介体体系在基于酵母 Debaryomyces hansenii 的安培型生化需氧量（BOD）生物传感器中的应用。对九种潜在电子传递介体（二茂铁、1,1′-二甲基二茂铁、二茂铁甲醛、二茂铁乙腈、中性红、2,6-二氯酚靛酚、硫黄素、亚甲蓝和铁氰化钾）进行筛选，发现只有二茂铁和中性红能有效作为该真核酵母的电子载体。基于...
全细胞生物催化剂是可持续生产大宗和精细化学品的重要途径，但筛选最优细胞设计通常通量低。本文在酿酒酵母中系统构建基于原核 LysR 型转录调控因子（LTTR）的小分子结合型转录激活因子生物传感器。作者通过多参数工程策略，优化操纵子位置、启动子长度和 LTTR 表达水平，获得低本底、高诱导的 209bp_CYC1p_BenO_T1 报告...
纸基分析装置可在实验室内外回答多种分析问题。本文首次利用酵母构建全细胞纸基生物传感器装置（BioPAD）。该生物基纸基分析装置对四环素类抗生素敏感，可用于药品质量控制及液体中抗生素污染检测。BioPAD 可在 30–10,000 μg/mL 范围内定性区分多西环素的存在或缺失。在对常用于疟疾预防的多西环素片剂进行分析时，BioPAD...