A Novel Aptamer Selection Strategy for
铜绿假单胞菌是临床重要且多重耐药的病原菌,亟需快速可靠的诊断方法。本研究建立了一种基于离心管的全细胞适配体筛选(SELEX)策略,将灭活铜绿假单胞菌细胞直接与单链DNA文库孵育,提高了结合适配体回收率并克服了微孔板法对细胞数量的限制。经10轮筛选和反向筛选,获得6个候选适配体;分子对接显示T1对目标菌脂多糖/共同多糖抗原具有最高选择...
铜绿假单胞菌是临床重要且多重耐药的病原菌,亟需快速可靠的诊断方法。本研究建立了一种基于离心管的全细胞适配体筛选(SELEX)策略,将灭活铜绿假单胞菌细胞直接与单链DNA文库孵育,提高了结合适配体回收率并克服了微孔板法对细胞数量的限制。经10轮筛选和反向筛选,获得6个候选适配体;分子对接显示T1对目标菌脂多糖/共同多糖抗原具有最高选择...
CRISPR 基技术已被用于病原体的快速高灵敏检测。为检验 CRISPR 基检测策略在铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)感染诊断中的可行性,本研究建立了重组酶聚合酶扩增(RPA)后接 Cas12a 介导检测的联合方法,可通过荧光读取仪或侧流生物传感器读出,命名为 Cas12a-RCFL。Cas12a-RCF...
由于微生物感染和食源性疾病频发,亟需快速、灵敏的病原菌现场筛查方法。本研究开发了一种高灵敏多重侧流层析试纸条(LFA),利用小麦胚芽凝集素(WGA)修饰的磁性量子点(Mag@QDs)作为通用检测纳米探针,在复杂样品中同时检测铜绿假单胞菌和鼠伤寒沙门氏菌。Mag@QDs-WGA标签具有200 nm Fe3O4核心和多层量子点壳,可广谱...
CRISPR/Cas系统因Cas效应蛋白(如Cas12、Cas13)的伴随切割活性,在核酸检测生物传感器中展现出巨大潜力。然而,现有CRISPR/Cas检测平台通常依赖核酸扩增、昂贵荧光仪器或侧流层析试纸条,限制了现场应用。本文报道了一种简单、低成本、超灵敏的DNA探针侧流层析生物传感器(LFB),将CRISPR/Cas与环介导等温...
铜绿假单胞菌可致烧伤患者及其他免疫功能低下者发生院内感染,但传统诊断依赖耗时的培养方法。为此,作者开发了一种基于多重交叉置换扩增(MCDA)和金纳米颗粒侧流生物传感器(LFB)快速、灵敏检测铜绿假单胞菌的方法。该方法在优化恒温 67°C 下仅需 40 min 即可完成反应,扩增产物可通过 LFB 目视检测,无需特殊设备。P. aer...
本研究基于标准多重交叉置换扩增(MCDA)开发了一种新型等温核酸检测技术,并引入自避免分子识别系统(SAMRS)组分与南极热敏感尿嘧啶-DNA糖基化酶(AUDG),命名为AUDG–SAMRS–MCDA。为实现扩增产物在试纸条上的检测,作者建立了无需标记引物或探针的分析策略,从而避免标记引物之间或标记探针与引物之间非预期杂交造成的假阳...
本研究报道了一种基于多重环介导等温扩增(mLAMP)和侧流核酸生物传感器(LFNAB)的简单、高灵敏方法,用于铜绿假单胞菌(P. aeruginosa)及其毒素基因的可视化和即时检测。通过分别使用生物素和 FITC、hex、digoxin 修饰的引物,在 mLAMP 过程中区分内部标准基因 ecfX 与毒素基因 ExoS 和 Exo...