Sigma1 Receptor Modulates Plasma Membrane and Mitochondrial Peroxiporins.
Sigma1受体（S1R）和部分水通道蛋白（AQP）参与氧化应激调控，但二者相互作用近期才显现。S1R通过与质膜和细胞器蛋白相互作用发挥作用，AQP则促进过氧化氢（H2O2）排出细胞。目前S1R对过氧化物水通道蛋白（peroxiporins）的调控尚未被研究。本研究利用H2O2 HyPer7生物传感器和基因敲低技术，考察（1）AQP...
Switching between Ultrafast Pathways Enables a Green-Red Emission Ratiometric Fluorescent-Protein-Based Ca
长发射波长的比率型指示剂在现代生物成像与生命科学中具有重要价值。本文利用稳态吸收、二维荧光、飞秒瞬态吸收光谱及量子化学/分子动力学计算，阐明了独立红色荧光蛋白（RFP）钙离子生物传感器REX-GECO1的工作机制。在480 nm激发下，未结合Ca2+的REX-GECO1生色团易被捕获于激发态暗态，荧光较弱；Ca2+结合后，钙调蛋白（...
A Light-up Logic Platform for Selective Recognition of Parallel G-Quadruplex Structures via Disaggregation-Induced Emission.
本文报道了一种基于解聚诱导发光（DIE）的“点亮”型荧光传感平台，用于选择性识别平行 G-四链体（parallel G-quadruplex, G4）DNA。作者设计并合成了一系列香豆素-喹唑啉（CQ）共轭物，其中 CQ4 在水溶液中可自组装形成发生聚集猝灭（ACQ）的超分子聚集体，荧光较弱；当与平行 G4 结合时，CQ4 的平面 ...
A dual signal amplification-assisted DNAzyme biosensor for ultrasensitive detection of Argonaute 2 activity.
本文报道了一种用于检测 Argonaute 2（Ago2）活性的新型 DNAzyme 生物传感器。该传感器以目标 Ago2 启动的滚环扩增（RCA）与 8-17 DNAzyme 介导的双重信号放大策略为基础。底物 RNA（sRNA）5'端含引物序列、3'端含阻断序列；Ago2 与引导 RNA（gRNA）形成活性 RISC 后切割 s...
A Membrane-Bound Biosensor Visualizes Shear Stress-Induced Inhomogeneous Alteration of Cell Membrane Tension.
细胞膜是细胞感知和响应外部机械刺激的第一介质，探索细胞膜张力变化有助于理解细胞内力学信号传递。本文开发了一种基于荧光共振能量转移（FRET）的生物传感器 MSS，用于可视化细胞膜张力。首先验证了该传感器检测细胞膜张力的有效性。结果显示，MSS 可观察到剪切应力诱导的膜张力异质分布，该分布可被微丝破坏或膜流动性增强所加强，但被膜流动性...
Circularly Permuted Fluorogenic Proteins for the Design of Modular Biosensors.
荧光报告分子是设计光学生物传感器以在活细胞中成像胞内分析物的关键元件。本文报道了荧光激活与吸收位移标签（FAST）的循环置换变体（cpFAST）的开发，并展示其作为生物传感器报告模块的潜力。cpFAST变体通过将荧光配体（fluorogen）的结合与激活（从而产生荧光）与特定分析物识别偶联，使荧光响应依赖于分析物结合。作者将其与钙结...
Monitoring dynamic changes of glutathione redox state in subcellular compartments of human cells - an approach based on rxYFP biosensor.
氧化还原系统的动力学与空间分离使氧化还原生物学研究极具挑战。基因编码生物传感器，尤其是谷胱甘肽特异性氧化还原敏感黄色荧光蛋白（rxYFP），可克服传统 GSH/GSSG 测量局限。本研究构建分别靶向细胞质、细胞核和线粒体基质的 rxYFP 表达质粒，并导入人宫颈癌 HeLa 细胞。通过氧化还原蛋白提取、氧化还原 Western 印迹...
The spatio-temporal dynamics of PKA activity profile during mitosis and its correlation to chromosome segregation.
蛋白激酶A（PKA）调控细胞周期等多种细胞过程。本研究利用遗传编码的FRET生物传感器，基于AKAR衍生的AKAREV探针，在活HeLa细胞中以单细胞水平表征有丝分裂过程中PKA活性。结果显示，HeLa细胞进入中期后PKA活性显著升高，并维持至胞质分裂/末期结束。采用AKAREV T>A失活突变体和H89抑制剂验证了所测PKA活性的...
Optimization of a genetically encoded biosensor for cyclin B1-cyclin dependent kinase 1.
基于荧光蛋白（FP）的生物传感器可实时监测活细胞内酶活性，但第一代 FRET 型激酶传感器通常荧光响应较低，优化过程费时费力。本文报道利用高通量大肠杆菌菌落筛选策略优化激酶 FRET 生物传感器。作者构建 pUADE 双表达质粒，在 Ptac 启动子下表达传感器变体，在 PBAD 启动子下表达组成型激酶；通过 L-阿拉伯糖诱导激酶表...
A new fluorescence complementation biosensor for detection of estrogenic compounds.
雌激素类化合物是一类重要的激素物质，可来源于药物、人和动物排泄物、化学工业及微生物代谢，并作为环境污染物存在。本文报道了一种基于荧光蛋白片段互补的分子生物传感器，用于监测此类化合物。作者将单体黄色荧光蛋白 mVenus 分裂为 N 端片段 Vn(1–154) 和 C 端片段 Vc(155–239)，并将其分别融合在雌激素受体 α (...