基于CRISPR/Cas的诊断方法具有高度特异性，但依赖荧光标记探针和复杂核酸提取流程，限制了现场应用。为此，本文开发了一种无标记、免设备的检测平台，整合FTA卡核酸提取、CRISPR/Cas12a识别和预折叠G-四联体（G4）–硫黄素T（ThT）信号报告系统。该平台利用G4与ThT的结构结合产生可见荧光，避免昂贵的荧光标记；FTA...
本文建立了一种基于DNA酶的相对简单且高效的荧光磁性生物传感器，用于检测大肠杆菌O157:H7。针对食源性致病菌检测中信号弱、灵敏度低的问题，作者巧妙设计了基于磁性微球、DNA酶和光致发光三重信号放大的荧光传感器。检测过程中，大肠杆菌特异性RNA切割DNA酶可特异性识别粗细胞内混合物（CIM）中的目标蛋白，引起其构象变化并诱导滚环扩...
病原菌快速检测对公共卫生和现场应急具有重要意义。本文首次报道了一种用于单步检测大肠杆菌O157:H7的‘管中实验室’生物传感器。该平台基于Förster共振能量转移（FRET）机制，以牛血清白蛋白-金纳米簇（BSA-AuNCs）为荧光供体/信号报告物，以抗大肠杆菌抗体修饰的金纳米粒子（Ab-AuNPs）为猝灭受体。传感器由聚丙烯微管...
本文开发了一种无标记、无酶、无修饰且无需DNA提取的荧光适配体传感（LEFA）方法，用于检测活的大肠杆菌O157:H7。该方法基于G-四链体形成，采用两个巧妙设计的发夹探针GHP1和GHP2。当存在大肠杆菌O157:H7时，适配体优先与目标菌结合，释放单链启动序列IS；IS引发GHP1与GHP2之间的toehold链置换反应，并循环...
大肠杆菌O157:H7是重要的食源性病原菌，感染阈值低且耐药性强。现有检测方法多为耗时、复杂且昂贵，难以用于常规检测，因此亟需更灵敏、快速和特异的检测技术。本研究构建了一种基于F0F1-ATPase旋转受负载干扰、并以荧光波动作为指示的免疫生物传感器，用于检测O157:H7。结果显示，抗原浓度（10^2–10^4 cfu）与荧光强度...
本文报道了一种用于大肠杆菌 O157:H7（E. coli O157:H7）快速、可重复检测的光纤免疫传感器。该传感器由流动池、表面修饰薄镍（Ni）层的光纤以及连接计算机的荧光计组成。检测时，先将含 E. coli O157:H7 的样品与包被抗 E. coli O157:H7 抗体的磁珠及 Cy5 标记抗体孵育，形成磁珠—抗原—C...
为快速灵敏检测致病性大肠杆菌O157:H7，本研究开发了一种基于荧光素可释放生物标签与磁性可分离探针的荧光生物传感器，用于定量检测E. coli O157:H7。首先合成直径约350 nm的空心硅纳米球（HSNs），在其内部富集荧光素，并用聚丙烯酸（PAA）和聚二甲基二烯丙基氯化铵（PDDA）多层高分子膜包覆保护，得到荧光素富集空心...
本研究基于表面增强荧光（SEF）构建了一种用于检测大肠杆菌 O157:H7（E. coli O157:H7）eaeA 基因的新型 DNA 传感器。通过 Cy3 标记的单链 DNA（ssDNA）与修饰在 Au@Ag 纳米棒表面的茎环 DNA 探针共杂交，研究了 Au@Ag 纳米棒表面增强荧光的间距依赖性。结果表明，当 Cy3 与 Au...
传统圆柱或锥-圆柱组合光纤探针多基于倏逝波用于免疫荧光生物传感器，但倏逝波穿透深度有限，难以充分激发微米级分析物表面标记物。本研究提出一种基于辐射波的全光纤免疫荧光生物传感器（RWAIB），采用双锥光纤探针检测大肠杆菌O157:H7。作者利用有限差分时间域方法比较倏逝波与辐射波特性，并建立光线追踪模型优化锥度几何。基于商用多模光纤制...
单核细胞增生李斯特菌、大肠杆菌O157:H7和沙门氏菌是最常见的食源性细菌病原菌，常引起多起暴发，因此用单一检测平台同时检测这三种病原菌具有重要意义。本研究开发并优化了一种光纤传感器，用于从食品中同时检测这三种病原菌。链霉亲和素包被的光波导上固定生物素化多克隆抗体，并与细菌悬液或食品富集样品孵育2 h；随后与Alexa Fluor ...
本研究考察气动喷雾在玻璃表面形成薄抗体膜作为捕获病原目标的潜在固定化技术。以山羊抗大肠杆菌O157:H7 IgG经气动喷雾制备抗体膜，并与亲和素-生物素桥固定化膜比较，使用GFP转化大肠杆菌O157:H7细胞和荧光报告抗体进行检测。测试了膜的功能性、稳定性和固定化效果。气动喷雾膜荧光强度低于亲和素-生物素桥膜，但在10^5–10^7...
病原菌生物传感器检测常受混合群体中敏感性和特异性限制。本文开发一种双标记方法，使液相荧光原位杂交（FISH）与捕获抗体靶向检测（CAT-FISH）相结合。以大肠杆菌O157:H7和金黄色葡萄球菌为代表菌，评估处理工艺对FISH荧光强度和抗体识别的影响。替代固定液methacarn优于标准固相多聚甲醛（PFA）固定，可同时保留FISH...
本研究评估荧光标记抗菌肽（AMP）能否替代标记抗体，用于大肠杆菌O157:H7的三明治检测。AMP天然结合细菌细胞壁脂多糖（LPS），且分子量小于抗体，可在细胞表面更高密度结合，从而提高光学信号和灵敏度。作者将抗菌肽cecropin P1、SMAP29和PGQ经C端半胱氨酸与Cy5荧光染料通过马来酰亚胺连接化学标记。全细胞溶液结合初...