蛋白激酶活性异常与糖尿病、心血管疾病、阿尔茨海默病和癌症等多种疾病相关，因此其活性检测对临床诊断和靶向治疗具有重要意义。本文报道了一种基于底物肽的电化学生物传感器，用于超灵敏检测蛋白激酶活性，并采用可逆加成-断裂链转移（RAFT）聚合作为信号放大策略。首先，Cys 末端底物肽通过 Au-S 自组装固定于金电极表面；在 ATP 存在下...
本文展示大环主体葫芦[8]脲（CB[8]）与荧光染料二甲基二氮杂吖丙啶双阳离子（MP）自组装形成结合型生物传感体系，其空腔可同时捕获吲哚胺 2,3-双加氧酶 1（IDO1）的上游底物色氨酸（Trp），从而提供一种无标记、实时监测 IDO1 活性的方法。将过表达 IDO1 的恶性 HeLa 和 HepG2 细胞与该结合型生物传感器孵育...
SET 和 MYND 结构域蛋白 3（SMYD3）是一种赖氨酸甲基转移酶，通过甲基化核内和胞质关键蛋白发挥促癌作用，在多种癌症中起核心作用。然而，SMYD3 在癌症发生和进展中的作用尚未完全阐明，需要进一步生化表征以支持靶向该酶的药物发现。为此，作者建立了 SMYD3 生产、处理和结晶的稳健方案，以及用于阐明 SMYD3 生化特性并...
蛋白磷酸化及其去磷酸化由蛋白激酶和磷酸酶调控，是最常见的翻译后修饰之一，在细胞内信号转导、基因转录、细胞增殖与凋亡等生理过程中发挥关键作用。蛋白激酶活性异常与癌症、阿尔茨海默病、炎症、糖尿病、心血管疾病等多种疾病密切相关，因此准确检测蛋白激酶活性并筛选其抑制剂对生化研究、临床诊断和药物治疗具有重要意义。纳米材料具有大比表面积以及优异...
本文报道了一种基于目标激活DNA聚合酶活性的核糖核酸酶H（RNase H）活性检测方法。该方法以由DNA聚合酶特异性适配体（DPA）和含RNA链（RS）杂交形成的检测探针为核心；初始状态下，DPA-RS探针抑制Taq DNA聚合酶活性。当RNase H存在时，其特异性水解RNA/DNA杂交双链中的RNA区，使检测探针去稳定，从而恢复...
本文设计了一种新型高灵敏光电化学（PEC）策略用于蛋白激酶A（PKA）检测。该传感器由碳微球（CMS）修饰的ITO电极、作为磷酸基团识别材料的TiO2以及作为光活性材料的石墨相碳氮化物（g-C3N4）组成。首次将金纳米粒子修饰的沸石咪唑酯骨架材料（Au-ZIF-8）用于PKA活性检测，兼具底物肽固定和信号放大功能。首先，底物肽通过金...
蛋白激酶（PKs）催化的蛋白磷酸化是肌肉收缩、细胞分化等信号转导与细胞调控过程的关键事件，PK 活性异常与心血管疾病、阿尔茨海默病、炎症及癌症密切相关，因此灵敏检测 PK 活性并筛选 PK 抑制剂对疾病诊断、药物发现和分子靶向治疗具有重要意义。本文报道了一种基于电化学控制可逆加成-断裂链转移（eRAFT）聚合的高灵敏电化学生物传感器...
本文构建了一种基于级联能级共敏化策略的光电化学（PEC）平台，用于超灵敏评价T4多聚核苷酸激酶（T4 PNK）活性。该平台以TiO2/g-C3N4/CdS三元纳米复合材料为光电活性基质，利用窄带隙CdSe量子点作为高效共敏化剂，使其导带能级与三元复合材料的阶梯式能级匹配，从而增强光吸收、促进电荷分离并提高光电流。检测时，5'-羟基末...
本文报道了一种基于类石墨碳氮化物（g-C3N4）和硫化镉量子点（CdS QDs）的灵敏、选择性光电化学（PEC）方法，用于检测蛋白激酶A（PKA）活性。首先合成g-C3N4与金纳米粒子（AuNPs）复合物，其既作为PEC活性材料，又作为多肽固定化载体。将多肽组装于g-C3N4-AuNPs修饰的ITO电极表面，随后在腺苷5′-[γ-硫...
基于乙酰化肽的抗水解能力和单宁酸（TA）组装金纳米颗粒（AuNPs）纳米探针的模拟超氧化物歧化酶（SOD）特性，本文设计了一种简单、灵敏的关断型电化学发光（ECL）生物传感器，用于组蛋白乙酰转移酶（HATs）活性分析和抑制剂评价。在 HATs 存在下，电极表面肽段发生乙酰化；乙酰化肽对胰蛋白酶水解具有抗性，并通过疏水作用和氢键吸附 ...
本文构建了一种三重放大生物传感器，用于超灵敏检测DNA甲基转移酶（Dam MTase）活性并筛选抑制剂。该传感器以原位合成的银纳米团簇（AgNCs）作为信号探针，提供放大电流信号，并结合金纳米颗粒/电化学还原氧化石墨烯（AuNPs/ERGO）杂化材料和杂交链反应（HCR）放大策略。制备时，首先通过电化学共还原法在电极表面生成AuNP...
DNA甲基化由DNA甲基转移酶（MTase）催化，是调控基因表达的重要表观遗传过程；MTase异常水平常被视为癌症生物标志物或细菌感染迹象。本文开发了一种新型比色方法，利用DNA模板Ag/Pt双金属纳米簇（NCs）的类过氧化物酶活性检测M.SssI MTase活性，无需限制性内切酶。该方法基于TMB-H2O2体系中过氧化物酶反应的抑...
本研究构建了一种可重复使用的电化学生物传感器，用于α-葡萄糖苷酶（α-glucosidase）活性检测和抑制剂筛选。设计将ATP适配体拆分为Apt 1和Apt 2；Apt 2通过Au-S键自组装固定于金电极，并用MCH封闭以优化取向；Apt 1与4-氨基苯基-α-D-葡萄糖苷（pAPG）经EDC/NHS偶联修饰在谷胱甘肽（GSH）修...
本文报道了一种简便且超灵敏的酶生物燃料电池（EBFC）自供电生物传感策略，通过硫磷酸化介导的界面工程检测蛋白激酶A（PKA）活性及其抑制。该体系由GDH/CNT生物阳极和肽/AuNPs生物阴极组成。生物阴极上，肽CLRRASLG通过Au-S键固定于AuNPs/ITO电极，MCH封闭非特异性位点；在ATP-s存在下，PKA催化肽中丝氨...
本研究建立了一种用于高灵敏、高选择性检测肾上腺素（adrenaline, Adr）的新型简单荧光生物传感器。首先通过水热法合成 L-半胱氨酸（L-Cys）包覆的水溶性 CuInS2 量子点（QDs）。由于静电相互作用和氢键作用，正电荷肾上腺素可组装在 CuInS2 QDs 表面，形成 Adr-CuInS2 QD 静电复合物。加入酪氨...
构建了一种基于合成的L-半胱氨酸-银(I)配位聚合物（L-Cys-Ag(I) CP）的高灵敏电化学生物传感器，其形貌类似蛋白模拟纳米线，用于检测乙酰胆碱酯酶（AChE）活性并筛选其抑制剂。传感策略利用乙酰胆碱氯化物（ACh）在AChE催化下生成胆碱，胆碱再被胆碱氧化酶（ChOx）催化氧化产生过氧化氢（H2O2）；L-Cys-Ag(I...
本文提出一种新型高灵敏电化学发光（ECL）生物传感器，用于蛋白激酶A（PKA）活性分析和相关抑制剂筛选，基于负载金、铂纳米粒子的金属有机框架（Au&Pt@UiO-66）纳米复合物的双金属催化信号放大与识别。在ATP存在下，PKA将电极表面修饰的短肽磷酸化后，Au&Pt@UiO-66探针通过UiO-66表面缺陷位点与磷酸化短肽之间形成...
蛋白激酶A（PKA）可通过磷酸化底物肽或蛋白调控多种细胞生物过程。本文基于11-巯基十二烷酸封端金纳米簇（MUA-Au NCs）和氧化石墨烯（GO）开发了一种低背景噪声的荧光生物传感方法，用于检测PKA活性。该策略中，特殊设计的肽可通过Au-S键锚定在MUA-Au NCs表面，同时因静电作用吸附于GO表面。因此，以肽为桥，MUA-A...
乳腺癌耐药蛋白（BCRP，ABCG2）是重要的药物外排转运体，显著影响多种药物的疗效，因此筛选特异性 BCRP 抑制剂并区分其底物与非底物对药物研发具有重要意义。本研究建立了一种基于肠道三维（3D）类器官的新型 BCRP 生物传感器，用于快速、灵敏地检测 BCRP 功能。首先从小鼠小肠分离隐窝，并在 Advanced DMEM/F1...
本文建立了一种基于氧化石墨烯（GO）负载的末端脱氧核苷酸转移酶（TdT）生成的富含胞嘧啶 DNA 纳米尾模板银纳米团簇（DNA-AgNCs）独特电催化活性的无标记电化学检测策略。TdT 可在无模板条件下催化脱氧胞苷三磷酸（dCTP）连接到单链 DNA（ssDNA）的 3′-OH 末端；随后在 Ag(I) 存在下，TdT 生成的富含 ...