Journal of the American Chemical Society
2016
Rana S, Elci SG, Mout R, Singla AK 等 11 人
正电荷共轭聚合物(CP)家族与绿色荧光蛋白(GFP)形成的超分子复合物构成基于荧光共振能量转移(FRET)的比率型生物传感器阵列。CP与哺乳动物细胞表面发生选择性多价相互作用,引起FRET信号发生差异性变化,从而为每种细胞类型提供独特的荧光指纹。所得荧光特征可用于识别16种不同细胞类型,并区分具有相同遗传背景的健康、癌变和转移细胞。...
Human & experimental toxicology
2016
Siqian L, Lei S, Ying L
目的:开发小鼠细胞生物传感器系统用于环境污染物等化学品高通量遗传毒性检测。方法:构建新型报告载体 pGL4-GFP,将 pGL4.82 中荧光素酶报告基因替换为 pAcGFP1-N1 的 GFP 基因;通过扩增小鼠尾组织基因组 DNA 中 p53 基因 -481 至 +180 区域获得 p53 启动子片段,克隆至 pGL4-GFP ...
Scientific reports
2015
Wu W, Zhang L, Yao L, Tan X 等 6 人
构建高效微生物细胞工厂生产可替代生物燃料烷烃的主要瓶颈之一是缺乏快速检测烷烃的方法。本文开发了一种遗传组装的荧光生物传感器,用于快速、原位监测重组大肠杆菌细胞内烷烃合成。作者将来自 Acinetobacter baylyi ADP1 的烷烃响应调控蛋白 AlkR 与 PalkM 启动子,以及来自 Pseudomonas oleovo...
Bioprocess and biosystems engineering
2015
Ganesh I, Ravikumar S, Yoo IK, Hong SH
为开发高通量筛选高产苹果酸微生物的系统,作者构建了基于嵌合双组分系统(TCS)的大肠杆菌苹果酸生物传感器。苹果酸是 C4 二羧酸和 TCA 循环中间物,在医药、化妆品和食品工业中重要,但现有 DcuS/DcuR 系统在有氧条件下对苹果酸响应饱和,不适合作为有氧传感器。基于大肠杆菌 MalK 与枯草芽孢杆菌 MalK 及大肠杆菌 Dc...
ACS synthetic biology
2014
Xue H, Shi H, Yu Z, He S 等 16 人
环境中的芳香污染物因其持久性和毒性对人类健康构成严重威胁。本文报道了一组基于绿色荧光蛋白报告基因和芳香响应转录调控因子(NahR、XylS、HbpR 和 DmpR)构建的芳香化合物生物传感器的设计与全面表征。通过精细调节检测元件与报告基因之间的遗传连接,实现了远高于既往报道的诱导倍数。对每种生物传感器的剂量-响应关系、动态范围及芳香...
AMB Express
2014
Knudsen JD, Carlquist M, Gorwa-Grauslund M
本研究构建了一种用于测量酿酒酵母细胞中 NADH/NAD+ 辅因子平衡扰动的报告系统。该系统将绿色荧光蛋白基因置于 GPD2 启动子控制之下,该启动子在 NADH 过量条件下被诱导。在缺乏通过甘油合成再生 NAD+ 能力的 gpd1Δgpd2Δ 双缺失株中,获得了较高荧光水平。研究进一步在 gpd1Δgpd2Δ 背景下,通过添加丙酮...
Applied biochemistry and biotechnology
2014
Masullo T, Puccio R, Di Pierro M, Tagliavia M 等 9 人
海洋生物荧光蛋白是开发生物传感器的潜在候选分子。本文从 Anemonia sulcata 中分离得到天然绿色荧光蛋白(wtAsGFP),并在大肠杆菌中克隆、表达和纯化其重组蛋白(rAsGFP)。作者系统研究了天然与重组 GFP 在 Cu2+、Cd2+、Pb2+ 和 Ni2+ 存在下的紫外-可见及荧光光谱行为。结果表明,两种蛋白对铜离...
Journal of biotechnology
2013
Ribeiro LF, Bressan F, Furtado GP, Meireles F 等 5 人
本研究设计并验证了一种用于大肠杆菌中木糖检测的基因回路。作者将编码木糖结合蛋白(XBP)的 xylF 基因克隆至 pT7T3 18U 载体,置于枯草芽孢杆菌 Pbsu 组成型启动子下游,并将绿色荧光蛋白(GFPuv)编码序列置于 xylF 启动子(PxylF)控制下,构建 pT7T3-GFP-XBP。在 xylF 敲除的大肠杆菌 J...
Journal of agricultural and food chemistry
2013
Liu R, Yang C, Xu Y, Xu P 等 6 人
本文报道利用截短冰核蛋白INPNC和Lpp-OmpA融合蛋白作为锚定基序,在大肠杆菌细胞表面共展示有机磷水解酶OPH和对硫磷水解酶MPH-绿色荧光蛋白GFP融合蛋白。通过细胞分级、Western blot、蛋白酶可及性实验和免疫荧光显微镜证明两种融合蛋白均定位于外膜表面,且外膜锚定不影响细菌生长和细胞活力。重组菌株可作为全细胞生物催...
Biosensors & bioelectronics
2013
Mohan R, Mukherjee A, Sevgen SE, Sanpitakseree C 等 7 人
临床感染的有效治疗高度依赖于快速筛查患者样本以确定感染病原体的抗药谱。现有抗生素敏感性测试方法存在周转时间长、样本与试剂消耗大、检测灵敏度低和组合能力有限等缺点,这些因素阻碍了及时使用合适抗生素,并加剧抗生素耐药。为此,本文开发了一种微流控平台,通过检测表达绿色荧光蛋白(GFP)细菌的荧光,实现高灵敏、快速的抗生素敏感性测试。与传统...
Sensors (Basel, Switzerland)
2013
Abboud T, Bamsey M, Paul AL, Graham T 等 8 人
高等植物是支持人类在太空长期驻留策略的重要组成部分。太空温室有望实现氧气、水和食物的闭环再生。能够在这些系统内实时远程监测作物状态的植物监测系统,可帮助操作人员及时干预,确保系统产量与可靠性。一种植物健康监测技术是利用报告基因驱动荧光蛋白,作为植物胁迫的生物传感器。2006年,首个绿色荧光蛋白(GFP)成像原型系统部署于加拿大高北极...
Environmental health perspectives
2012
Holtcamp W
模拟天然雌激素的环境化学物质对脊椎动物生殖系统具有明确的内分泌干扰效应,但其对其他组织和系统的影响仍了解不足。研究者利用表达绿色荧光蛋白(GFP)的转基因斑马鱼,实时检测不同雌激素类化学物的效应。英国团队开发了一种更敏感的转基因斑马鱼生物传感器,用于评估潜在内分泌干扰物。早期转基因模型仅在特定组织或很高剂量下报告暴露。本研究在受精后...
Langmuir : the ACS journal of surfaces and colloids
2012
Eby DM, Harbaugh S, Tatum RN, Farrington KE 等 6 人
本研究采用层状自组装(LbL)方法,在活大肠杆菌细胞表面构建紫外(UV)保护涂层。以阳离子聚合物聚烯丙胺(PAH)和三种具有不同紫外吸收特性的阴离子聚合物——聚硫酸乙烯酯(PVS)、聚(4-苯乙烯磺酸)(PSS)和腐殖酸(HA)——交替沉积,包裹携带两种绿色荧光蛋白(GFP)表达系统的大肠杆菌:组成型表达可被紫外激发的 GFP(GF...
Sensors (Basel, Switzerland)
2011
Siddiki MS, Kawakami Y, Ueda S, Maeda I
饮用水中砷、镉等有毒金属对人体健康具有危害,现场快速检测具有重要意义。本研究开发了一种基于绿色荧光蛋白(GFP)标记金属结合蛋白的固相荧光生物传感器,用于饮用水中有毒金属离子的现场检测。GFP 标记的 ArsR 和 CadC 蛋白在无金属状态下可结合固定化在微孔板表面的顺式元件(cis element);当分别结合 As(III) ...
Applied and environmental microbiology
2011
Abraham S, Chin J, Brouwers HJ, Turner B 等 6 人
本研究开发了一种基于绿色荧光蛋白的全细胞生物传感器,用于检测和定量 DNA 降解型大肠菌素诱导的大肠杆菌 SOS 应激反应。该传感器菌株为大肠杆菌 K-12 MG1655/pANO1::cda,其中 SOS 响应型 cda 启动子与 gfp 突变体融合;当 DNA 损伤或基因毒性应激激活 SOS 系统时,cda 启动子驱动 GFP ...
Angewandte Chemie (International ed. in English)
2011
Ayyadurai N, Saravanan Prabhu N, Deepankumar K, Lee SG 等 7 人
铜离子在生物和环境体系中具有重要作用,但其失衡与多种疾病及污染相关。现有原子吸收、质谱和电化学方法复杂且常破坏样品,难以原位检测。本文通过遗传密码工程将金属螯合非天然氨基酸3,4-二羟基-L-苯丙氨酸(l-DOPA)引入绿色荧光蛋白(GFP),构建了可逆荧光铜离子生物传感器GFPdopa。l-DOPA的儿茶酚基团作为双齿配体与Cu2...
Applied and environmental microbiology
2010
Lee J, Son H, Lee S, Park AR 等 5 人
镰刀菌属子囊菌 Gibberella zeae(无性态 Fusarium graminearum)是引起小麦、大麦、水稻和小麦穗腐/赤霉病的重要植物病原菌,可产生玉米赤霉烯酮(ZEA)等霉菌毒素。该文旨在鉴定可被 ZEA 诱导的启动子,以建立 G. zeae 条件基因表达系统。作者通过微阵列分析筛选到一个 ZEA 响应基因 ZEAR...
Biological trace element research
2010
Isarankura-Na-Ayudhya C, Tantimongcolwat T, Galla HJ, Prachayasittikul V
本研究探索以嵌合金属结合绿色荧光蛋白 His6GFP 作为活性指示剂,通过光谱法测定铜离子。向 His6GFP 溶液中加入铜离子后,荧光强度随铜浓度升高而显著降低;在 500 μM 铜存在下荧光可快速下降约 60%,而锌、钙离子仅引起约 10–20% 的荧光变化。加入 EDTA 后,原始荧光可恢复至约 80%。金属离子存在时发射峰位...
Sensors (Basel, Switzerland)
2009
Close DM, Ripp S, Sayler GS
全细胞基因改造生物报告系统被设计为在响应目标分析物或相关分析物组时发出可检测信号;当与能够测量这些信号的换能器集成后,即形成生物传感器,可作为自包含分析系统,用于基础和应用环境、医学、药理学及农业科学。历史上,这类装置主要关注绿色荧光蛋白、水母荧光素、萤火虫荧光素酶和/或细菌荧光素酶等信号蛋白。本文综述了这些传感器系统的生物化学与遗...
Journal of biomedical materials research. Part B, Applied biomaterials
2009
Dias FN, Ishii M, Nogaroto SL, Piccini B 等 5 人
环氧乙烷(EO)常用于心脏手术用膜式氧合器(Oxygenator)和管路(Tubing)的灭菌。EO及其衍生物氯乙醇(ECH)和乙二醇(EG)的残留可能危害患者,因此必须通过通气去除。本研究旨在估计这些器械达到安全使用限值所需的最短通气时间,并评估绿色荧光蛋白(GFP)作为生物传感器指示EO气体在灭菌室中分布和渗透的能力。2、4和8...