Scientific reports
2025
Samson D, Thompson NS, Sheri VR, Rudrabhatla SV 等 5 人
蘑菇生物发光基于荧光素/荧光素酶循环,包含四种催化酶及翻译后修饰酶 NpgA。该循环可将植物细胞壁前体咖啡酸转化为蘑菇荧光素 3-羟基hispidin,提示可在植物体内原位合成荧光素。作者将荧光素生物合成(LBS)途径基因以自切割 intein-F2A 肽连接成假多顺反子,在 Nicotiana benthamiana 中瞬时表达,...
Sensors (Basel, Switzerland)
2023
Páscoa I, Biltes R, Sousa J, Preto MAC 等 8 人
蓝细菌能产生大量结构新颖的次生代谢物,其脂肪酸修饰方式独特,可能成为过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)配体的新来源。PPARα、PPARβ/δ和PPARγ是配体激活的核受体,参与代谢和细胞过程调控,是多种疾病药物靶点。本文扩展并验证了一种基于细胞的PPAR转激活生物传感器,用于药物发现筛选。该传感器通过更换报告基因提高信号强度与...
Applied biochemistry and biotechnology
2022
Kuznetsov DB, Mironov AY, Neschislyaev VA, Volkhin IL 等 6 人
全细胞生物传感器广泛用于医学诊断,但长期储存后其指示性能会逐渐下降,因此需要寻找恢复性能并延长检测试剂保质期的方法。本文提出采用频率、功率和辐照时间优化选择的电磁辐射处理。作者研究了不同辐射参数对生物传感器生物发光的影响,包括激光(λ=875 nm)、LED(λ=850–890 nm)以及微波(42.22、53.53、61.18 G...
Drug development research
2022
Benítez D, Dibello E, Bonilla M, Comini MA
非洲锥虫病是流行区人类和动物健康的重大问题,现有化疗存在毒性、给药困难、疗效不足和耐药等问题,亟需新药。为加速新化学实体发现,需要稳健、简单、经济的高通量全细胞检测。作者构建了布氏锥虫布氏亚种(Trypanosoma brucei brucei)血期生物发光报告细胞系,使其稳定组成型表达热稳定红色偏移荧光素酶(RE9HLUC)。该细...
Brazilian journal of microbiology : [publication of the Brazilian Society for Microbiology]
2021
Ramesh C, Mohanraju R
重金属污染对环境和生物多样性构成严重威胁,因此需要快速、无创的生物测定方法监测有毒化学物质。本研究从海洋环境中分离并表征了一株产生强蓝色生物发光的海洋细菌Vibrio campbellii STF1,用于生物传感应用。通过表型试验及基于16S rRNA、toxR和luxA基因的多基因序列分析,确认该菌株的种级鉴定。脂肪酸甲酯分析显示...
International journal of pharmaceutics
2017
Demazeau M, Quesnot N, Ripoche N, Rauch C 等 9 人
本研究评估由 Diether-NH2 和卵磷脂(EPC)制备的阳离子脂质体用于体外基因递送。利用对人 HEK293T 和肝癌 HepaRG 细胞(分别为易转染和难转染细胞)研究脂质组成(EPC 与 Diether-NH2 摩尔比)对体外转染效率和细胞毒性的影响。结果显示,与商品化转染试剂相比,EPC/Diether-NH2 脂质体在...
Methods in molecular biology (Clifton, N.J.)
2016
Gabriel GV, Viviani VR
本文介绍一种用于环境一般毒性检测的简单光关闭生物发光生物传感器。该传感器以工程化大肠杆菌 BL21(DE3) 为全细胞识别与换能元件,通过 pPro 质粒分别表达 Macrolampis sp2 萤火虫荧光素酶或 Pyrearinus termitilluminans 叩甲荧光素酶,并经 IPTG 诱导。诱导后的细菌可培养于液体中,...
Food chemistry
2016
Sanchez-Vicente L, Herraez E, Briz O, Nogales R 等 6 人
能源生产产生的灰烬可作为牲畜饲料的矿物来源,但可能携带遗传毒性污染物并进入人类食物链。本研究构建了微生物生物传感器 recApr–Luc2,用于检测回收灰烬中的遗传毒性风险。以顺铂诱导的大肠杆菌 SOS 基因(recA、lexA、dinI 和 umuC)表达变化为依据,筛选出 recA 启动子作为报告基因驱动元件。该传感器依赖功能性...
Analytical biochemistry
2014
Gabriel GV, Lopes PS, Viviani VR
生物发光技术已广泛应用于生物传感器,其中天然发光细菌费氏弧菌(Vibrio fischeri)常用于水毒性分析。本研究评估了两种新克隆的甲虫荧光素酶用于大肠杆菌“光关闭”(light off)毒性生物传感器的适用性:Macrolampis 萤火虫荧光素酶和 Pyrearinus termitilluminans 叩头虫荧光素酶。结果...
Microbial biotechnology
2011
Amaro F, Turkewitz AP, Martín-González A, Gutiérrez JC
重金属是环境中最严重的污染物之一,亟需灵敏、快速的生物监测方法。生物可利用性、毒性和遗传毒性等关键参数无法仅靠化学分析测定,而必须使用活细胞。全细胞生物传感器将整个细胞作为单一报告器,同时包含生物受体和信号换能元件。本文报道了两种基于热四膜虫(Tetrahymena thermophila)MTT1 和 MTT5 金属硫蛋白启动子与...
Current microbiology
2011
Behzadian F, Barjeste H, Hosseinkhani S, Zarei AR
XylR 调控蛋白来自 Pseudomonas putida mt-2 的 TOL 质粒,参与甲苯和苯降解途径。本文描述基于 XylR 及其同源启动子 Pu 构建并实验室表征重组生物传感器(pGLPX 质粒)。在 pGLPX 质粒中,报告基因 luc 受 Pu 启动子控制。我们评估两种不同核苷酸序列作为 SD 元件改善生物报告灵敏度...
Journal of biotechnology
2010
Shin HJ
NahR 是萘降解途径中响应水杨酸的转录调控因子,是检测萘和水杨酸的微生物生物传感器核心元件。为最大化传感器灵敏度,作者通过定点突变 nahR 基因进行理性设计,在已知参与中心诱导剂识别和 C 端多聚化的第 169 位和第 248 位构建 8 个单突变体(N169A、N169C、N169K、N169S、R248H、R248M、R24...
International journal of food microbiology
2008
Guglielmetti S, Ciranna A, Mora D, Parini C 等 5 人
本研究旨在构建一种可用于分析细胞代谢状态的双歧杆菌生物传感器。作者通过电穿孔将携带叩头虫(Pyrophorus plagiophthalamus)昆虫荧光素酶基因的人源肠道菌长双歧杆菌长亚种(Bifidobacterium longum biovar longum)进行转化,所用载体为pGBL8b,并研究了影响该生物发光表型产光的基...