iScience
2021
White CW, Kilpatrick LE, Pfleger KDG, Hill SJ
分泌型趋化因子通过结合膜受体介导细胞通讯。本文报道了一种高灵敏度实时方法，用于在活细胞中定量天然趋化因子的分泌及其与受体的结合。作者利用 CRISPR/Cas9 基因编辑将纳米荧光素酶小片段 HiBiT 插入 CXCL12 基因 C 端，使细胞内源表达并分泌 CXCL12-HiBiT。随后通过化学发光输出监测和定量 CXCL12 的...
The Journal of biological chemistry
2015
Corbisier J, Galès C, Huszagh A, Parmentier M 等 5 人
G蛋白偶联受体（GPCR）可根据结合配体所稳定的构象选择性激活不同信号通路，即信号偏倚。已有研究在多种GPCR中报道了偏倚信号，包括趋化因子受体，但多数工作仅比较G蛋白依赖与β-arrestin依赖通路的整体偏倚，未解析特定G蛋白亚型之间的偏倚。本研究利用BRET生物传感器直接监测G蛋白激活，考察趋化因子受体CCR2、CCR5和CC...
Journal of leukocyte biology
2011
Vega B, Muñoz LM, Holgado BL, Lucas P 等 11 人
基于表面等离子共振（SPR）的生物传感器是测量分子相互作用的成熟方法，但用于G蛋白偶联受体（GPCR）研究时通常受限于需将受体经去垢剂溶解后再重建到脂质环境中。本文以趋化因子受体CXCR4及其配体CXCL12为模型，提出一种高重复性的SPR生物传感器方法：利用慢病毒颗粒在出芽过程中携带细胞膜片段，将CXCR4以天然脂质膜环境展示于病...