Probing Cdc42 Polarization Dynamics in Budding Yeast Using a Biosensor.
Cdc42 是一种高度保守的小分子鸟苷三磷酸酶（GTPase），在从酵母到人类的多种细胞类型中调控细胞极性建立。由于 Cdc42 的活性在时间和空间上受到动态调控，需要在活细胞中实时监测其激活状态。本章介绍一种用于监测出芽酵母中活性 Cdc42 的简单而稳健的亲和型荧光生物传感器。该传感器由 Cdc42 效应蛋白 Gic2 的 N ...
Calsequestrin depolymerizes when calcium is depleted in the sarcoplasmic reticulum of working muscle.
钙网蛋白（calsequestrin, Casq）是肌浆网（SR）中唯一已知以周期性储存和释放钙为主要功能的蛋白。为检验其在活细胞中是否随钙耗竭而去聚合，作者在小鼠肌肉中表达荧光标记 Casq1，并用与 Casq1 融合的钙生物传感器 D4cpV-Casq1 连续测量 SR 内钙浓度，同时以光漂白后荧光恢复（FRAP）监测 Casq...
Nanoscale patterning of solid-supported membranes by integrated diffusion barriers.
本文利用超平纳米结构基底作为模板，构建具有图案化固体支撑双层膜的新型模型膜系统。可聚合锚定脂质被选择性自组装到金或氧化物区域，经紫外光聚合后形成嵌入磷脂双层膜中的扩散屏障。成功制备并表征了尺寸约100 nm 的图案结构。这些屏障可直接嵌入磷脂双层膜，用于调控膜流动性，并构建相互隔离的膜围栏。通过纳米球光刻对模板进行结构化，可系统调节...
Formation of supported bacterial lipid membrane mimics.
近年来，表面支持脂质双分子层（SLB）通过脂质体在固体表面破裂融合形成，已成为研究细胞膜生物物理与生化相互作用的重要模型。本文报道了强负电荷支持脂质膜的制备与表征，其脂质组成系统模拟大肠杆菌（E. coli）膜，并在三种常用生物传感器材料二氧化硅（SiO2）、二氧化钛（TiO2）和氧化铟锡（ITO）上进行研究。作者通过调节 Ca2+...
The spatiotemporal pattern of Src activation at lipid rafts revealed by diffusion-corrected FRET imaging.
基于荧光共振能量转移（FRET）的遗传编码生物传感器已被广泛用于以高时空分辨率可视化活细胞中的分子活性，但生物传感器蛋白的快速扩散会阻碍真实分子激活图的精确重建。作者基于荧光漂白后恢复（FRAP）实验，发展了一种有限元（FE）方法，用于分析、模拟并扣除可移动生物传感器的扩散效应。该方法被应用于分析定位于不同亚细胞区室的 Src FR...