本研究从 Fv 抗体库中筛选靶向跨膜蛋白酶丝氨酸 2（TMPRSS2）的 Fv 抗体，用于抑制 SARS-CoV-2 感染。Fv 抗体来源于免疫球蛋白 G 重链可变区，由三个互补决定区（CDR）和框架区（FR）组成；通过 CDR3 区定点突变构建 Fv 抗体库，并利用大肠杆菌自动展示技术展示于菌体表面。以 SARS-CoV-2 刺突...
本研究从大肠杆菌自动展示 Fv 抗体库中筛选靶向 SARS-CoV-2 刺突蛋白（SP）前蛋白转化酶（PPC）切割区域的 Fv 抗体，以阻断病毒感染。通过定点突变随机化 CDR3 区构建库，利用 AIDA-1 自动展示技术将 Fv 抗体展示于大肠杆菌外膜，表面密度约 10^5 个/细胞，库多样性约 10^6。以包含 S1/S2 和 ...
本研究从自展示 Fv 抗体库中筛选血清素样模拟表位，用作单胺氧化酶 A（MAO-A）抑制剂。Fv 抗体对应免疫球蛋白 G（IgG）重链可变区（VH），由三个互补决定区（CDR）和四个框架区（FR）组成。作者通过定点突变随机化 CDR3 的 11 个氨基酸残基构建 Fv 抗体库，并利用大肠杆菌自展示技术表达。以抗血清素单克隆抗体为筛选...
本文为一篇更正通知，针对已发表于 Bio-protocol 的方法论文《基于表面等离子共振（SPR）生物传感器建立人 PD-1/PD-L1 阻断检测》中的背景部分引用错误进行修正。原文在描述 PD-1/PD-L1 免疫检查点阻断的临床意义时，将 Alsaab 等人 2017 年的文献误写为 2018 年。更正后，背景句应表述为：临床...
食品安全是建立消费者信任的核心问题。随着分析技术从传统实验室方法发展到色谱、免疫分析和生物传感，生物传感器因快速、无损、低成本和自动化而成为食品检测的重要工具。表面等离子共振（SPR）生物传感器是一种光学生物传感器，通过光学系统激发和探测金属膜表面的表面等离子体，并利用固定在传感表面的生物分子识别元件捕获样品中的目标分析物。当分析物...
表面等离子共振（SPR）技术能够高准确度地检测生物分子相互作用，已用于血型测定、食品掺假和牛奶掺假等分析，并正发展为严重急性呼吸综合征冠状病毒2（SARS-CoV-2）的快速检测方法。目前临床确诊主要依赖鼻咽拭子实时逆转录聚合酶链反应（RT-PCR），但该方法耗时且成本较高。本文综述了用于 SARS-CoV-2 快速、准确检测的 S...
本文报道了设计 DNA 小沟结合剂以识别任意 DNA 序列项目中的突破，重点解决长期难以靶向的相邻 GG 序列。作者尝试多种化合物设计后，选择 N-烷基苯并二咪唑结构，使其为相邻 GG 碱基的小沟 N-H 提供两个氢键受体；两侧噻吩单元提供预组织构象和强亲和力，末端苯甲脒终止分子，得到 DB2831。DB2831 与目标 AAAGG...
基于表面等离子共振（SPR）的光学生物传感器可实现蛋白质相互作用的实时、无标记分析，已广泛用于治疗性单克隆抗体（mAb）的发现与开发。随着生物药及其生物类似物市场快速增长，SPR在药物发现和质量管理中的作用日益突出。mAb的关键质量属性之一是Fc区N-糖基化；除稳定抗体外，Fc N-糖基化还影响免疫球蛋白G（IgG）与Fcγ受体（F...
微小RNA（miRNA）是一类重要的非编码RNA，参与转录后基因表达调控，其异常表达与多种疾病发生发展密切相关，因此成为早期医学诊断的潜在生物标志物。然而，miRNA序列短、丰度低、家族成员序列同源且易被RNase降解，使常规检测技术面临灵敏度与选择性挑战。基于生物传感器的策略已成为miRNA定量分析的重要替代方法。表面等离子共振（...
受表面等离子共振（SPR）生物传感技术快速发展及其现存局限性的启发，本文系统总结了近五年芯片式SPR与光纤SPR（FO-SPR）生物传感器在智能层设计、多重检测、连续监测和体内传感方面的最新进展。多种表面化学、生物材料和纳米材料已被用于构建SPR智能层，以实现生物受体的定向固定、提高抗污能力和增强灵敏度，从而整体提升生物传感性能。由...
食物过敏已成为日益严重的公共卫生问题，估计约3%的成年人和6%–8%的儿童受其影响，因此食品中过敏原的检测、标识与管理成为食品工业的重要优先事项。本文是一篇批判性综述，系统概述了表面等离子共振（SPR）生物传感器在食品过敏原识别与定量中的应用原理，重点涵盖牛奶、鸡蛋、花生和海鲜中的主要过敏原。综述介绍了光纤表面等离子共振（FOSPR...
本文综述了一类具有良好溶液性质和细胞摄取能力、可选择性识别DNA中混合A·T与G·C碱基对序列的新型杂环双胍化合物的制备。作者旨在说明这些化合物可作为重要的生物技术试剂，并有望成为比现有药物具有更好性质和发展潜力的治疗候选物。综述介绍了通过修饰AT选择性杂环阳离子来识别混合DNA序列的不同策略：为选择性识别G·C碱基对，必须在AT识...
本文综述了2016年至2018年中发表的50余篇表面等离子共振（SPR）生物传感器研究，排除囊泡、外泌体、癌细胞、活细胞、干细胞和microRNA等大颗粒检测内容。作者按成熟度将文献分为五类：从单一标志物检测、定量校准、方法验证、临床样本系列研究到成熟传感器在临床调查中的应用。综述分析了芯片、流体/非流体测量、微流控、SPR成像、连...
本文介绍了一种基于表面等离子共振（SPR）生物传感器的原创实验方法，可用于研究参与蛋白-蛋白相互作用（PPI）以及蛋白-肽或蛋白-小分子相互作用的潜在伙伴。该方法将 SPR 生物传感器、尺寸排阻色谱（SEC）、质谱蛋白鉴定（LC-MS/MS）和直接分子钓鱼相结合；直接分子钓鱼基于亲和层析原理，利用固定化的靶蛋白或小分子非肽化合物作为...
自展示（autodisplay）是利用革兰氏阴性菌外膜（OM）自转运蛋白分泌途径，将重组蛋白定向展示于细胞表面的表达系统。近年来，IgG结合Z结构域和生物素结合链霉亲和素等亲和蛋白被自展示于大肠杆菌（E. coli）外膜，用于分析与生物医学应用。本文综述了该系统的分泌机制，以及亲和蛋白在OM上的定向与密度控制。通过去垢剂分离纯化自展...
Vault 是天然存在的卵圆形纳米颗粒，由多个主要 vault 蛋白（MVP）亚基构成的蛋白外壳组成。vault poly(ADP-ribose) 聚合酶（VPARP）的 vault 相互作用结构域 INT 已被用作穿梭结构域，将生物分子货物装载到 vault 腔内。然而，INT 与 MVP 之间的相互作用机制尚不清楚。作者假设 v...
生物分子的自我复制是生命的基础，通常需要复杂的细胞机器。然而，一些异常过程涉及病理性蛋白结构在没有额外辅助的情况下自我复制，例如与神经退行性疾病相关的淀粉样纤维丝。本文利用计算机模拟识别蛋白纤维丝组装体自我复制的必要条件，并证明该过程的关键物理决定因素是蛋白对纤维丝表面的亲和力。研究发现，自我复制只能在非常狭窄的蛋白间相互作用区间内...
灭活脊髓灰质炎疫苗（IPV）在全球脊髓灰质炎消除计划中发挥关键作用，其质量控制主要依赖疫苗批次的效价评估。IPV 效价可通过体内和体外方法测定。体外效价评估基于疫苗中 D-抗原（D-Ag）单位含量，D-Ag 主要表达于天然感染性病毒颗粒，是保护性免疫原；最常用的体外方法是间接 ELISA，用于保证生产一致性。体内效价试验已在猴、雏鸡...
适配体是具有稳定空间结构、可高亲和力和特异性结合靶标的短单链 DNA 或 RNA 寡核苷酸，通常通过 SELEX 实验筛选。本文提出一种用于蛋白靶标的计算机辅助适配体设计方法，包括三步：首先通过分子对接和结构分析寻找潜在结合位点；其次分别设计负责靶标识别的短序列和维持识别区构象的结构部分；最后通过分子动力学模拟和 MM–PBSA/N...
本综述系统总结了表面等离子共振（SPR）这一重要光学生物传感技术在药物发现过程和药物化合物质量分析中的应用及其特点。文章介绍了 SPR 的常见检测格式与实验问题，并说明其如何用于药代动力学药物分析、ADMET 研究、高通量筛选以及基于片段的药物筛选，其中后者重点讨论小分子药物检测。综述还阐述了经典 SPR 方法的优势，以及局域表面等...