抗双链DNA（anti-dsDNA）抗体是系统性红斑狼疮（SLE）的重要生物标志物，但常规检测的分析性能存在差异。本研究评估一种新型光纤表面等离子共振（FO-SPR）生物传感器，用于实时分析抗dsDNA抗体与抗原的相互作用，并探讨动力学参数与疾病严重度尤其是狼疮肾炎（LN）的关联。采用生物素化dsDNA包被FO-SPR传感器，检测2...
本研究报道了一种新型高灵敏度强度型表面等离子共振成像（SPRi）生物传感器及其在分子相互作用检测中的应用。通过优化激发波长并引入波长分复用（WDM）算法，系统可根据样品初始折射率确定最优激发波长，而无需调节入射角。实验结果表明，该系统的折射率分辨率为1.77×10−6 RIU，能够对初始折射率在1.333至1.370 RIU范围内的...
无标记相互作用分析所得亲和常数（kd、ka 和 KD）受传感器表面配体密度影响显著。本文提出一种基于 SPR 成像的新方法，在传感器表面构建配体密度梯度，使分析物响应可外推至 Rmax=0 μRIU。该方法利用质量传输限制区确定分析物浓度，避免为调节配体密度而进行繁琐优化，并最大限度降低再结合、强双相行为等表面依赖效应。方法可完全自...
界面层在生物医学、生物传感、分析化学和海洋工业等应用中具有重要意义。随着应用数量增加，分析这些界面层性质并理解其行为变得关键。无标记表面敏感方法是实时监测薄层结构与形成动力学的优秀工具，即使达到纳米尺度也能实现。本文综述现有无标记技术，并展示如何利用实验数据提取所形成层的动力学和结构信息。文章概述了基于光学和机械换能原理的传统及部分...
本文报道了一种用于测量 G 蛋白偶联受体（GPCR）激动剂效能与配体偏向性的动力学检测平台。作者构建了一种高量子产率、基因编码的荧光生物传感器，将 arrestin-3（β-arrestin2）整体插入 mNeonGreen 荧光蛋白第七 stave，使受体-arrestin 相互作用引起荧光强度变化。该传感器可在 HEK 293T...
生物传感器-表面等离子共振（biosensor-SPR）技术已成为研究核酸相互作用的一种成熟定量方法，可在实时、无标记条件下监测相互作用组分，无需外部探针。该方法能够对小分子与 G-四链体 DNA 的相互作用进行平衡和动力学表征，所需材料量少，并可同时获得结合常数、化学计量、结合速率等参数。本文系统介绍了基于 biosensor-S...
生物传感器实验中，不同浓度分析物流经固定配体芯片并形成复合物，但许多抗体等相互作用常未达到稳态。测得的数据为各浓度下的传感器响应曲线（sensorgram），即总复合物浓度随时间变化。本文提出一种四步策略，用于更可靠地处理复杂动力学结合数据，并与标准全局拟合比较。首先绘制解离图判断是否存在异质相互作用；随后用新数值算法AIDA确定每...
损伤 DNA 与识别生物分子的结合事件对理解 DNA 损伤药物活性及相关 DNA 修复网络具有重要意义。本文构建了一种简单、灵敏的传感器体系，用于实时探测顺铂损伤 DNA（cisPt-DNA）与细胞响应蛋白高迁移率族盒 1（HMGB1）之间的动态分子识别。通过流动注射分析（FIA）与石英晶体微天平（QCM）联用，研究了 cisPt-...
表面等离子共振（SPR）传感近年来成为测量结合常数、结合与解离速率常数以及结合相互作用动力学化学计量的一种有价值技术，可用于多个新兴生物领域。该技术可应用于免疫系统疾病研究，有助于从生物化学和临床角度更好地理解并评价抗原与抗体之间多种相互作用的结合参数。由于抗登革蛋白抗体（Ab）与登革蛋白抗原（Ag）结合常数的测定通常较为复杂，SP...
生物传感器-表面等离子共振（Biosensor-SPR）技术已成为研究核酸相互作用的一种强大无标记实时方法。该方法可在低样品用量且无需外部探针的条件下，同时获得生物分子相互作用的平衡与动力学信息。本文提供了利用生物传感器-SPR方法分析蛋白-DNA相互作用的详细实用指南，系统介绍了SPR技术原理与基本基础，并对SPR仪器、传感芯片和...
本文报道了一种基于光学表面等离子共振（SPR）生物传感器的生物分子相互作用动力学分析方法，用于实时、无标记地量化抗原-抗体或受体-配体结合的动力学常数与亲和力常数。针对实验数据常形成复杂实时曲线、难以直接拟合动力学模型的问题，作者将 Marquardt 算法引入自制 SPR 生物分析仪，对结合与解离过程进行非线性曲线拟合。与 New...
基于全内反射成像椭偏（TIRIE）的生物传感器被视为一种自动实时研究生物分子相互作用的方法，本文将其用于分析三羟甲基氨基甲烷（tris）与溶菌酶（lysozyme）之间弱相互作用的动力学过程。实验将稀释至不同浓度的溶菌酶溶液输送至固定有 tris 的生物传感器基底界面，利用伪一级相互作用动力学模型拟合实验数据，从而获得动力学参数。计...
近年来，原位蛋白合成微阵列技术可在需要前即时制备蛋白微阵列。本文利用TUS-TER固定技术，结合表面等离子共振成像（SPRi），实现蛋白-蛋白相互作用的无标记实时动力学检测。作者构建了带C端TUS融合标签的可表达质粒DNA，将原位合成的重组蛋白定向固定于生物传感器表面。表达质粒固定于聚乙烯亚胺（PEI）修饰的金表面，并在SPRi仪器...
基于表面等离子共振（SPR）原理的仪器被广泛用于实时监测分子间相互作用：一个组分固定在传感器芯片表面，另一个组分在缓冲液连续流动中注入。经典SPR实验通常进行多轮结合与再生，以测定反应速率和平衡常数。2006年Karlsson等提出单周期动力学（SCK）方法，即按递增浓度依次注入分析物，仅在完整结合循环结束后进行一次再生。本文以10...
表面等离子共振（SPR）是体外评价 IgG 效应功能的关键技术，尤其用于研究抗体 Fc 段与 Fcγ 受体（FcγR）的结合。本文介绍一种基于 SPR 生物传感器的动力学检测方法：首先利用 NHS/EDC 活化 CM5 传感器芯片的羧甲基葡聚糖基质，将金黄色葡萄球菌 Protein A 化学偶联到芯片表面；随后将人 IgG1 抗体（...
近年来，生物传感器技术在生物分子相互作用研究中取得显著进展。生物层干涉（BLI）是由ForteBio开发的一种有前景的生物传感器平台，主要用于在科研和常规应用中定性及定量蛋白/蛋白相互作用。本文描述了一种基于该平台生物物理原理表征蛋白/脂质体结合相互作用的方法。研究采用三种不同脂质体配方和蛋白激素重组人促红细胞生成素（rh-Epo）...
生物传感器已成为表征生物分子相互作用的标准方法，其数据广泛用于评价药物候选物与靶标的结合特性。在生物相关环境中测量此类相互作用是生物传感器技术面临的新挑战。本章介绍一种基于石英晶体微天平（QCM）生物传感器研究完整细胞表面蛋白与靶标相互作用的方法。QCM 利用石英晶体的压电效应，在接近共振频率的交流电压下振荡；根据 Sauerbre...
转录因子等蛋白通过结合特定 DNA 序列调控决定细胞命运的生化通路，因此分析蛋白-DNA 相互作用及其作用机制至关重要。表面等离子共振（SPR）是一种无标记方法，可实时阐明生物分子相互作用的动力学。本文聚焦这一基于生物传感器的方法，系统介绍如何利用 SPR 研究蛋白与寡核苷酸的结合。文章首先描述 SPR 的物理现象及仪器实现，包括棱...
在无标记生物分子相互作用分析中，标准注入通常提供均匀的分析物浓度。利用泰勒分散（Taylor dispersion）的替代注入方式可在毛细管中形成连续的分析物浓度梯度，使单次注入即可记录完整的剂量响应曲线。本文使用商用表面等离子共振（SPR）生物传感器展示了该方法的增强生物物理表征能力。将动力学相互作用模型局部拟合泰勒分散曲线，除获...
本文对2009年商业光学生物传感器文献进行系统调查。作者邀请22名来自工业、政府和学术机构的生物传感器专业人员组成评审委员会，共同制定论文应包含的基本信息清单（TBMRFAADOBE），包括仪器、配体与分析物信息、表面类型、固定化条件、配体密度、缓冲液、温度、浓度、再生条件、结合响应图、重复实验、拟合模型及结合常数误差等。评审采用通...