中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）是急性肾损伤（AKI）早期诊断的关键生物标志物。本研究建立了一种基于抗体的NGAL检测系统，采用生物层干涉（BLI）这一无标记光学生物传感技术，通过监测生物传感器表面生物分子结合事件产生的实时白光干涉图案实现检测。作者制备并表征了6株抗NGAL单克隆抗体，筛选出对NGAL具有高特异性的候选...
免疫球蛋白M（IgM）是硬骨鱼体内主要的循环免疫球蛋白同型，南极鱼IgM具有异常长的铰链区，该区域富含脯氨酸和甘氨酸，对抗体结构与功能具有重要作用。本研究利用CRISPR/Cas9基因组编辑系统，将南极鱼IgM特有的铰链区序列插入小鼠IgG1重链恒定区基因座，通过同源定向修复（HDR）生成“南极化”工程单克隆抗体（anta-mAb）...
白介素-6（IL-6）是具有广泛生物学效应的细胞因子，在免疫系统和炎症反应中发挥重要作用，因此开发高灵敏、可靠的分析方法用于生物流体中该生物标志物的准确检测具有重要意义。石墨烯基底（GS），如原始石墨烯（G）、氧化石墨烯（GO）和还原氧化石墨烯（rGO），在生物传感和新传感器件开发中表现出显著优势。本文提出一种用于人白介素-6特异性...
本文致力于石墨烯基传感器的开发与参数优化。研究采用约1700 ℃热分解半绝缘6H-SiC衬底的方法生长石墨烯膜，Auger和拉曼光谱证实SiC表面存在单层石墨烯。文中提出外延石墨烯吸附的模型方法，表明Green函数法结合简单基底模型可获得吸附分子与基底之间电荷转移的解析结果。传感结构通过激光在石墨烯膜上图形化形成。作者首先制备了较简...
糖基化是受生物工艺参数和细胞生理状态影响的单克隆抗体重要质量属性。本研究开发了基于凝集素的生物层干涉（LBLI）方法，用于相对评估Fc糖基化免疫球蛋白G（IgG）的半乳糖基化和岩藻糖基化水平。在15 L生物反应器中改变工艺条件重组表达Fc糖基化IgG并收获产物，验证了LBLI对不同样品的可靠性、稳健性和适用性，并以液相色谱-质谱（L...
隐孢子虫是一种肠道原虫病原体，是健康成人腹泻和儿童死亡的重要原因，因此快速检测其卵囊对预防暴发具有重要意义。本文报道了一种无标记互指电容生物传感器，用于检测水样中的隐孢子虫卵囊。特异性抗隐孢子虫单克隆抗体（IgG3）通过重组蛋白G/硫醇自组装单分子层共价固定于互指金电极表面，作为捕获探针；牛血清白蛋白（BSA）用于封闭非特异性吸附位...
本研究开发了一种基于电容换能的亲和传感器，用于检测河水中苯并[a]芘（BaP）。作者比较了两种识别元件：合成受体类似物分子印迹聚合物（MIPs）和天然抗BaP单克隆抗体（mAb）。对MIPs采用了不同聚合策略：先批量合成MIP微球再共价偶联到电极表面，或在电极表面通过电聚合原位合成MIPs；其中原位电聚合策略效果最佳。进一步从灵敏度...
可溶性CD147（sCD147）是膜结合CD147的脱落形式，参与细胞功能调节，其在体液中的存在与多种疾病相关。本研究旨在建立抗体生物传感器，用于同时差异检测sCD147的一般型和截短型。作者将生物层干涉技术（BLItz）与特异性识别CD147不同胞外域的单克隆抗体（mAb）相结合，建立了基于抗体的生物传感器，以快速测量并表征sCD...
本研究评估了一种基于生物素化GroEL-链霉亲和素生物层干涉（GroEL-BLI）的自动化方法，用于检测多种药理学相关单克隆抗体（mAb）溶液中瞬时形成的前聚集体。利用该方法对IgG1和IgG4 mAb的聚集倾向进行排序，并对最不稳定IgG4 mAb施加高温、酸性pH及盐酸胍等应力。结果显示，GroEL-BLI主要在尺寸排阻色谱（S...
本研究报道一种基于还原氧化石墨烯（rGO）通道化学电阻的生物传感器，用于直接免疫检测压力生物标志物皮质醇。皮质醇单克隆抗体（c-Mab）通过EDC/NHS共价偶联固定于rGO通道表面，并以乙醇胺（EA）封闭非特异性结合。当皮质醇与c-Mab特异性结合时，rGO通道电阻发生变化，通过测量源漏电流/电阻实现无标记直接检测。该传感器在rG...
当前工业药物发现通常以候选药物库对靶标分子进行经验性筛选。相比平衡法，高通量动力学测量能够分别获得结合亲和力的各动力学组分。尽管仪器硬件提升了通量，数据处理仍存在三个瓶颈：现有商业分析模型未考虑导致体外生物物理质量差的分子固有性质；通过用户界面处理数据耗时且不利于并行采集；尚无商业方案能在动力学竞争分析中纳入历史动力学数据。本文提出...
本文报道了一种基于分子伴侣GroEL的生物层干涉（BLI）检测方法，用于识别药理学相关蛋白的结构改变和/或聚集物种。研究首先优化了生物素化GroEL在链霉亲和素BLI传感器上的固定，并通过圆二色、ANS荧光、浊度和GFP重折叠实验证明天然与生物素化GroEL均保持稳定的结构和活性。以酸性成纤维细胞生长因子-1（FGF-1）为例，40...
针对特定抗原的抗体panel多样性可通过多种检测格式建立。传统表位分箱实验将纯化抗体两两检测：若两种抗体竞争结合同一抗原，则归入同一簇或箱；若不竞争，则归入不同簇。本文报道一种高通量检测，可直接对粗杂交瘤上清进行分组，无需抗体纯化；同时无需重组蛋白，因为检测在表达目标抗原的细胞上进行，因此可用于难以纯化的细胞表面蛋白。重链可变区（V...
新蝶呤是细胞免疫的有价值生物标志物，与病毒感染、细菌感染、自身免疫、心血管、神经退行性和恶性疾病等多种病理状态相关。为快速多生物标志物诊断制备特异性抗新蝶呤抗体，作者合成了新型半抗原衍生物并将其偶联到载体蛋白上。经充分表征的偶联物用于免疫BALB/c小鼠和兔。所制备的单克隆抗体在直接和间接酶联免疫吸附试验（ELISA）格式中分别达到...
本文首次报道了一种基于微悬臂梁的霍乱弧菌传感器。利用原子力显微镜（AFM）中的动态力显微镜（DFM）测量因细胞结合到微悬臂梁表面而引起的共振频率偏移。目标菌为食源性和水源性病原体霍乱弧菌O1。商用镀金AFM微悬臂梁通过自组装单分子层（SAM）法固定抗V. cholerae O1单克隆抗体。在1×10^3至1×10^7 CFU/mL浓...
本文展示了无标记实时光学生物传感器在竞争性结合实验中的应用，通过对抗体面板进行表位分箱。作者描述了三种实验取向，即串联阻断、预混阻断和经典夹心阻断，并分别在ForteBio Octet QK、Bio-Rad ProteOn XPR36和GE Healthcare Biacore 3000三个平台上完成。通过成对检测抗体是否相互阻断对...