GPR3属于G蛋白偶联受体（GPCR）超家族，在脂肪细胞能量消耗和阿尔茨海默病病理等生理与病理过程中发挥核心作用。尽管GPR3激动剂和反向激动剂均具有治疗潜力，但该受体长期缺乏类药性配体和创新筛选技术，制约了药物发现。为克服基于cAMP积累或β-arrestin募集的传统配体筛选方法的局限，作者开发了一种构象型GPR3生物传感器，可...
本研究构建了一种基于表面等离子共振（SPR）的 P-糖蛋白（P-gp）配体筛选系统（SPR-PLSS），并结合慢病毒颗粒（LVP）稳定策略，用于从天然产物中筛选潜在 P-gp 抑制剂。首先制备高表达和低表达 P-gp 的 LVP；由于包装细胞来源的 LVP 携带细胞膜片段及其所携带的 P-gp，可保持 P-gp 的天然构象。随后将高...
土壤细菌通过多种感觉系统感知并响应环境信号。双组分系统是广泛存在的信号转导系统，通常由感觉激酶和响应调节蛋白组成；细菌趋化系统是一种改良型双组分系统，通过行为适应实现向或远离化学刺激移动。为简化细菌趋化受体所感知配体的鉴定，作者将假单胞菌趋化受体的感觉域与大肠杆菌 NarX/NarQ 硝酸盐感觉蛋白的信号域融合，构建混合传感器蛋白，...
从中药中筛选特定蛋白靶点的生物活性配体是药物发现中重要而困难的任务。本研究建立并应用表面等离子共振生物传感器基有效成分识别系统（SPR-AIRS），从中药提取物中筛选p38丝裂原活化蛋白激酶（p38）配体。重组p38蛋白经EDC/NHS共价固定于SPR芯片，并用阳性抑制剂SB203580验证芯片适用性。随后对34味p38相关中药进行...
本研究建立、验证并应用了一种基于表面等离子共振（SPR）生物传感器的活性成分识别系统（SPR-AIRS），用于筛选信号转导与转录激活因子3（STAT3）配体。首先从四个方面考察系统性能：（1）STAT3固定芯片的特异性，表明其可用于从复杂混合物中筛选STAT3配体；（2）系统线性与检出限，确定最低有效回收循环数为5个循环；（3）芯片...
亚型选择性甲状腺拟态物有望用于预防或治疗心脏病、高LDL胆固醇和肥胖，但现有方法有限，难以检测甲状腺激素受体（TR）活性化合物的激动行为。本文报道并验证了一种新设计的TRα-1细菌生物传感器，通过工程化大肠杆菌在简单定义培养基中的生长表型指示甲状腺活性化合物的存在。该传感器利用工程化变构融合蛋白，将激素受体配体结合域（LBD）的构象...
过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ/PPARG）属于核受体超家族，是多种疾病的潜在药物靶点。本研究构建了一系列用于鉴定功能性PPARγ配体的细菌生物传感器。这些传感器由携带四域融合蛋白的改造大肠杆菌组成，融合蛋白包括PPARγ配体结合域（LBD）、工程化mini-intein域、大肠杆菌麦芽糖结合蛋白（MBD）和胸苷酸合酶（T...
表面等离子共振（SPR）生物传感器在药物发现中日益重要。本文提出一种用于乙酰胆碱结合蛋白（AChBP）配体初筛和复筛的SPR生物传感器方法。初筛采用共价固定靶蛋白的直接结合检测；复筛采用顺序竞争检测：先将捕获的蛋白暴露于未知测试化合物，随后立即暴露于高分子量报告配体。利用报告配体探测传感器表面剩余自由结合位点，可显著增强信号，并验证...