蛋白质功能常依赖配体诱导的构象变化，但常规生物物理筛选通常不能直接揭示配体如何影响其功能。本文开发了一种高通量第二谐波产生（SHG）生物传感器，用于实时检测与蛋白结合后诱导构象变化的片段并识别动态区域。作者以乙酰胆碱结合蛋白（AChBP）为模型，建立野生型和六个单半胱氨酸突变体的多孔板SHG检测体系，并通过胺基或马来酰亚胺化学偶联第...
片段命中化合物向高亲和力先导化合物的优化是片段药物发现（FBDD）的关键环节。本研究通过片段生长策略，将苯甲酸酯取代去托品片段优化至乙酰胆碱结合蛋白（AChBP）结合位点中由配体诱导形成的亚口袋。AChBP 是半胱氨酸环受体配体结合域的可溶性同源蛋白。作者利用配体复合物 X 射线晶体结构、表面等离子共振（SPR）生物传感器分析和等温...
可溶性乙酰胆碱结合蛋白（AChBP）是烟碱型乙酰胆碱受体（nAChR）配体结合结构域的同源物。为引导未来采用表面等离子共振（SPR）生物传感器技术进行无标记、直接结合的生物物理片段筛选，作者基于对一组具有纳摩尔亲和力的α7 nAChR选择性含奎宁环配体的解构，构建了聚焦片段库。利用SPR生物传感器检测片段及其母体化合物与AChBP的...
本研究以淡水螺 Lymnaea stagnalis 的乙酰胆碱结合蛋白（AChBP）作为 Cys-loop 配体门控离子通道胞外域模型，采用乙酰胆碱、尼古丁、epibatidine 及一系列取代奎宁环化合物作为配体，建立了基于表面等离子共振（SPR）生物传感器的直接相互作用测定方法。该方法可实时表征固定化 AChBP 与小分子激动剂...
表面等离子共振（SPR）生物传感器在药物发现中日益重要。本文提出一种用于乙酰胆碱结合蛋白（AChBP）配体初筛和复筛的SPR生物传感器方法。初筛采用共价固定靶蛋白的直接结合检测；复筛采用顺序竞争检测：先将捕获的蛋白暴露于未知测试化合物，随后立即暴露于高分子量报告配体。利用报告配体探测传感器表面剩余自由结合位点，可显著增强信号，并验证...