Analytical chemistry
2014
Wang Q, Liu W, Xing Y, Yang X 等 8 人
本文报道了一种将正选择与负选择单元集成于同一微流控芯片中的DNA适配体筛选方法,并以急性心肌梗死后早期升高的心肌标志物肌红蛋白(Myoglobin, Myo)为模型靶标。通过7轮筛选,获得一系列与Myo结合的适配体,其解离常数Kd处于纳摩尔范围(4.93–6.38 nM)。其中亲和力最高的适配体(Kd=4.93 nM)被用于构建基于...
Analytical chemistry
2013
Eissa S, Ng A, Siaj M, Tavares AC 等 5 人
本文报道了针对海洋脂溶性毒素石房蛤酸(okadaic acid, OA)的 DNA 适配体筛选与鉴定,并将其用于构建无标记电化学生物传感器。通过指数富集系统进化(SELEX)筛选出的适配体对 OA 具有纳摩尔级解离常数。将亲和力最高的适配体经 5′ 二硫键修饰后,通过 Au-S 相互作用自组装固定于金电极表面,构建无标记适配体传感器...
Journal of the American Chemical Society
2013
Li BR, Hsieh YJ, Chen YX, Chung YT 等 6 人
多巴胺(DA)是参与神经信号转导及多种重要疾病的关键神经递质,但其在患者样本中浓度极低,现有电化学生物传感器检出限通常约纳摩尔级,难以检测。本文开发了一种基于多并联(MPC)硅纳米线场效应晶体管(SiNW-FET)的纳米电子生物传感器,通过在器件表面修饰DNA适配体实现超灵敏、选择性DA检测。与传统电化学方法相比,该MPC适配体/S...
Journal of microbiological methods
2013
Moon J, Kim G, Lee S, Park S
传统方法检测沙门氏菌等感染性病原菌步骤复杂,难以满足快速检测需求。生物传感器在病原菌快速检测中具有潜力,而适配体因分子小、易合成标记、免疫原性低、成本低于抗体且靶标特异性高,适合用于生物传感器分析。本研究以鼠伤寒沙门氏菌为靶标,肠炎沙门氏菌、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌为反靶标,采用全菌系统性指数富集配体进化(SELEX)筛选特异性单链...
Biosensors & bioelectronics
2013
Subramanian P, Lesniewski A, Kaminska I, Vlandas A 等 10 人
本文报道了一种基于表面等离子共振(SPR)的溶菌酶灵敏、选择性检测方法。传感器由50 nm金膜上沉积的薄层还原氧化石墨烯(rGO)构成,rGO通过氧化石墨烯(GO)在150 V下电泳沉积制备,沉积过程使GO部分还原为rGO,薄膜厚度随沉积时间变化;20 s短脉冲可获得数纳米厚度的rGO膜,适合SPR传感。抗溶菌酶DNA适配体通过π-...
Analytica chimica acta
2013
Huang L, Yang X, Qi C, Niu X 等 8 人
为开发用于鸦片生物碱可待因(codeine)检测的传感方法,作者采用系统进化指数富集(SELEX)技术从随机 DNA 文库中筛选可待因结合 DNA 适配体。经 19 轮筛选、克隆测序及截短突变优化,获得 37 碱基序列 HL7-14,其平衡解离常数 Kd 为 0.91 μM。竞争结合实验表明,HL7-14 对可待因具有较高特异性,对...
Analytical chemistry
2013
Miodek A, Castillo G, Hianik T, Korri-Youssoufi H
本研究开发了一种基于 DNA 适配体的高灵敏电化学生物传感器,用于检测人细胞朊蛋白 PrPC,作为朊病毒病的模型生物标志物。传感器以金电极为基底,将氧化羧基化多壁碳纳米管(MWCNTs)修饰于电极表面,并通过酰胺键共价连接第四代聚酰胺胺树状大分子(PAMAM G4),再在其表面固定环戊二烯基铁氧化还原标记(Fc)和生物素化 PrPC...
Analytical and bioanalytical chemistry
2013
Miodek A, Poturnayová A, Snejdárková M, Hianik T 等 5 人
本研究开发了一种基于表面等离子共振(SPR)的生物传感器,用于研究人细胞朊蛋白(PrPC)与 DNA 适配体的结合动力学并实现 PrPC 检测。传感器通过在导电聚吡咯表面固定链霉亲和素,再固定多种生物素化 DNA 适配体构建。通过监测共振角变化,可实时跟踪 PrPC 与适配体的相互作用。研究比较了不同构型适配体,包括含刚性双链支撑部...
Biomedical microdevices
2012
Wu C, Du L, Zou L, Zhao L 等 5 人
三磷酸腺苷(ATP)被认为是味蕾中味觉信号转导与处理的关键神经递质。高灵敏、高特异测量单个味觉受体细胞(TRC)分泌的 ATP 对研究味觉细胞间通讯机制至关重要。本研究报道了一种基于 DNA 适配体的生物传感器,用于检测单个 TRC 局部分泌的 ATP。ATP 敏感 DNA 适配体作为识别元件,其完全互补的 DNA 竞争物作为信号转...
Journal of fluorescence
2012
Buranachai C, Thavarungkul P, Kanatharana P
为改变典型分子适配体信标(MAB)以检测不同分析物,目前需要更换整个传感单元,包括昂贵的荧光标记物。本研究开发了一种基于DNA的可重构分子适配体信标。该传感器由可变部分和恒定部分组成:可变部分包含适配体链及其互补链,恒定部分为双标记Förster共振能量转移(FRET)对的寡核苷酸,两部分通过DNA杂交连接。传感器存在折叠(高FRE...
Biosensors & bioelectronics
2012
Goda T, Miyahara Y
本文报道了一种具有抗ATP适配体序列的发夹结构DNA,作为场效应晶体管(FET)扩展栅极金电极表面的纳米尺度分子开关,以温度依赖方式检测目标ATP或腺苷。当目标分子结合时,发夹适配体由闭环构象转变为开环构象,导致预装载在发夹茎部双链DNA小沟中的带正电DNA结合剂DAPI释放到溶液相。由于目标捕获使栅极/溶液纳米界面扩散层中DAPI...
The Analyst
2011
Lamont EA, He L, Warriner K, Labuza TP 等 5 人
利用微生物或毒素作为生物恐怖武器的威胁日益隐蔽,食品供应链是重要传播途径。蓖麻毒素来自蓖麻籽,热稳定性强,在酸性和碱性条件下仍保持活性,被美国疾控中心列为B类生物威胁试剂。现有蓖麻毒素检测方法依赖酶活性、免疫反应或蓖麻DNA,常受复杂食品基质干扰,动态范围有限且特异性不足。适配体是具有高亲和力和低交叉反应性的短RNA或单链DNA序列...
Biosensors & bioelectronics
2011
Sheng L, Ren J, Miao Y, Wang J 等 5 人
本文报道了一种基于氧化石墨烯(GO)猝灭荧光检测赭曲霉毒素A(ochratoxin A, OTA)的简单方法。OTA是曲霉属和青霉属等真菌产生的真菌毒素。作者利用GO作为荧光猝灭剂,猝灭标记在OTA特异性DNA适配体5'端的荧光基团6-羧基荧光素(FAM)。通过优化实验条件,基于裸GO的传感平台检出限为1.9 μM,线性检测范围为2...
Biosensors & bioelectronics
2011
Bonel L, Vidal JC, Duato P, Castillo JR
赭曲霉毒素A(OTA)是食品尤其是谷物及其制品中最重要的霉菌毒素污染物之一,许多国家对其限量要求达ppb级。本文报道了一种基于DNA生物素标记适配体的电化学竞争生物传感器,用于检测OTA。将OTA特异性适配体通过生物素-链霉亲和素作用固定于顺磁性微球(MBs)表面,使其与固定浓度的OTA-辣根过氧化物酶偶联物(OTA-HRP)及样品...
Analytical chemistry
2010
Liu Y, Tuleouva N, Ramanculov E, Revzin A
本文报道了一种基于DNA适配体的电化学生物传感器用于检测干扰素γ(IFN-γ)。将含有IFN-γ结合适配体的DNA发夹分子进行巯基化修饰,并在3′端偶联亚甲基蓝(MB)氧化还原标记,通过自组装固定于金电极表面。IFN-γ结合后使适配体发夹结构展开,MB氧化还原分子远离电极,电子转移效率降低,导致法拉第电流下降。采用方波伏安法(SWV...
Talanta
2010
He JL, Wu ZS, Zhang SB, Shen GL 等 5 人
人中性粒细胞弹性蛋白酶(HNE)是中性粒细胞释放的主要丝氨酸蛋白酶,其异常活性与类风湿关节炎、慢性阻塞性肺疾病、成人呼吸窘迫综合征等疾病相关。本文报道一种基于竞争结合反应的均相荧光适配体传感器,用于检测 HNE。传感器由 HNE DNA 适配体、短 DNA 乱序序列 SS 和分子信标 MB 组成;MB 5'端标记荧光素,3'端标记 ...
Trends in analytical chemistry : TRAC
2009
Pelton R
生物活性纸是一类可执行通常由实验室多孔板或便携式电子设备完成的分析功能的纸基材料,其最具吸引力的应用是病原体检测。无需硬件的简单纸基检测有望从家庭厨房到发展中国家灾害现场产生社会影响。生物活性纸研究是新兴领域,加拿大、美国(哈佛)、芬兰和澳大利亚已有重要研究。本文在简要介绍纸张材料与表面性质后综述相关文献,早期工作利用纸张孔隙构建纸...
Biosensors & bioelectronics
2009
Pollet J, Delport F, Janssen KP, Jans K 等 8 人
本文报道了一种光纤表面等离子共振(SPR)生物传感器,用于无标记、可重复且低成本地检测DNA杂交和DNA–蛋白相互作用。该工作首次将光纤SPR系统与DNA适配体生物受体相结合。光纤表面溅射50 nm金层,并修饰由羧基和羟基封端聚乙二醇(PEG)巯基十一烷硫醇组成的混合自组装单分子层,以降低非特异性吸附;链霉亲和素通过EDC活化固定于...
Methods in molecular biology (Clifton, N.J.)
2009
Gronewold TM
本文以DNA抗凝血酶适配体与凝血酶相互作用为模型,研究生物传感器表面固定化方式对测量结果的影响。作者将适配体分别通过羧酰胺键固定到二维烷硫醇自组装单分子层(SAM),以及通过链霉亲和素–生物素作用固定到三维羧甲基葡聚糖基质中,并使用S-sens K5 Love波表面声波(SAW)传感器进行无标记实时检测。两种表面测得的平衡解离常数K...
Analytica chimica acta
2009
Kim YS, Niazi JH, Gu MB
本研究开发了一种基于DNA适配体的电化学生物传感器,用于特异性检测土霉素(OTC)。将3′端巯基修饰的76-mer单链DNA适配体通过金硫共价键固定于金指叉阵列(IDA)电极芯片上,作为生物识别元件。该适配体对OTC具有高亲和力(Kd=11.13 nM),可区分结构相似的多西环素(DOX)和四环素(TET)。检测时,样品中的OTC与...