Bioprocess and biosystems engineering
2016
Satar R, Ismail SA, Rehan M, Ansari SA
本文提出合成并表征石墨烯,用于固定化β-半乳糖苷酶以提高半乳寡糖(GOS)产量。透射电镜显示所合成石墨烯尺寸约为25 nm,傅里叶变换红外光谱用于观察酶与纳米载体之间的相互作用。采用分子对接程序Dock v.6.5进行对接,并利用Chimera v.1.6.2和PyMOL v.1.3对蛋白—配体复合物进行可视化分析。固定化β-半乳糖...
Enzyme and microbial technology
2014
Jasti LS, Dola SR, Fadnavis NW, Addepally U 等 6 人
本研究将牛血清白蛋白(BSA)在pH 8.0下吸附于25%交联密度的烯丙基缩水甘油醚–乙二醇二甲基丙烯酸酯共聚物微球(AGE-25)表面,形成含氨基、巯基和羧基的蛋白涂层。利用戊二醛、二琥珀酰亚胺基碳酸酯(DSC)和1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺(EDC)分别活化BSA的NH2、SH和COOH基团,将黑曲霉葡萄糖氧化酶...
ACS applied materials & interfaces
2014
Campos PP, Moraes ML, Volpati D, Miranda PB 等 6 人
本文报道了一种用于直接、低成本测定乳糖浓度的电化学生物传感器。该传感器利用乳糖与β-半乳糖苷酶(β-Gal)的特异性相互作用,将β-Gal通过层层自组装(LbL)技术固定在聚乙烯亚胺(PEI)/聚苯乙烯磺酸盐(PVS)膜中,并构建于经普鲁士蓝(PB)修饰的氧化铟锡(ITO)电极上。在ITO/PB/(PEI/PVS)1(PEI/β-G...
PloS one
2014
Bello-Gil D, Maestro B, Fonseca J, Feliu JM 等 6 人
本文报道了一种将融合胆碱结合模块 C-LytA 的蛋白质特异性、可逆固定在功能化石墨电极上的通用方法。石墨电极表面通过重氮盐化学引入羧基,随后用于锚定由 N,N-二乙基乙二胺(DEAEA,作为胆碱类似物)和乙醇胺(EA,作为间隔基)组成的混合自组装单分子层。作者以 C-LytA-β-半乳糖苷酶融合蛋白为模型,检验电极对标签蛋白的特异...
PloS one
2013
Zammit CM, Quaranta D, Gibson S, Zaitouna AJ 等 9 人
金(Au)的地球化学勘探对矿业日益重要。现有 Au 分析通常需将野外样品送至实验室,采用电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)或仪器中子活化分析(INAA)测定,结果往往需数周,延误勘探进程。因此,可用于现场分析的 Au 生物传感器具有重要价值。本研究利用沙门氏菌鼠伤寒血清型中可被 Au(I/III) 复合物选择性诱导的 golTSB...
Biosensors & bioelectronics
2013
Choi O, Lee Y, Han I, Kim H 等 7 人
本研究基于β-半乳糖苷酶活性开发了一种简单、灵敏的生物传感器,用于天然样品中toxoflavin(对多种植物、真菌、动物和细菌有毒)的测定。所提出的toxoflavin检测方法适用于产毒细菌或受毒素污染食品,操作简便且成本低。已知引起水稻谷粒腐烂和多种大田作物枯萎的Burkholderia glumae在LysR型转录调控因子ToxR及...
Biotechnology and bioengineering
2013
Mariani AM, Natoli ME, Kofinas P
本研究旨在开发一种可重复的酶包埋方法,使酶在温和环境中保持活性,并在环境扰动下抵抗活性下降。此类方法在生物传感器应用中具有潜在价值。作者将β-半乳糖苷酶(乳糖酶)包埋于丙烯酰胺(ACR)水凝胶基质中,交联剂分别为不可降解的N,N'-亚甲基双丙烯酰胺(BIS)或可降解的聚乙二醇二丙烯酸酯(PEGDA),形成“生物凝胶”。无酶对照水凝胶...
APMIS : acta pathologica, microbiologica, et immunologica Scandinavica
2013
Lakshmana Gowda K, John J, Marie MA, Sangeetha G 等 5 人
铜绿假单胞菌是院内感染中最常见的病原体之一,其群体感应(QS)系统在抗生素耐受中发挥重要作用。N-酰基高丝氨酸内酯(AHLs)是 QS 信号分子,可作为调节细菌致病性的靶标。本研究对来自院内感染的铜绿假单胞菌分离株中不同类型 QS 信号分子进行表征。AHLs 经溶剂提取后,采用大肠杆菌 MG4 报告菌株测定 β-半乳糖苷酶活性进行定...
Journal of dairy science
2011
Amamcharla JK, Metzger LE
现有乳制品中乳糖测定方法耗时繁琐,常需昂贵设备和熟练技术人员。本研究开发一种快速、常规测定乳制品乳糖的新方法。该方法利用β-半乳糖苷酶快速水解乳糖,随后用商用血糖仪测定生成的葡萄糖。血糖仪经过多年研发和临床验证,已被糖尿病患者广泛用于血糖监测。研究通过系列实验建立并验证方法:首先确定乳糖近乎完全水解所需的温度和时间;其次评估不同血糖...
Lab on a chip
2011
Sarkar A, Han J
本研究在纳流体生物分子浓缩芯片中考察浓度增强型酶活性检测,用于从细胞裂解液及其他低体积、低浓度样品中检测和研究极低丰度酶。作者建立了一种操作模式的数学模型:酶与底物被共同浓缩到芯片上的液塞中,导致反应速率非线性增强。模型预测并实验验证了两个反应阶段:初始二次方酶限制阶段和后期线性底物限制阶段。结果表明,在多数实际情况下反应最终进入底...
Journal of the American Chemical Society
2011
Miranda OR, Li X, Garcia-Gonzalez L, Zhu ZJ 等 7 人
病原菌的快速、高灵敏检测对环境监测和临床诊断至关重要。本文报道了一种基于酶-纳米颗粒偶联体系的比色细菌传感方法,用于检测微生物污染。该体系采用表面修饰季铵基团的阳离子金纳米颗粒(AuNPs),通过静电作用结合阴离子β-半乳糖苷酶(β-Gal),从而抑制其酶活性。当目标细菌与纳米颗粒结合时,细菌阴离子表面置换并释放β-Gal,使酶活性...
Biosensors & bioelectronics
2011
Chen IJ, White IM
本文报道了一种集成于微流控通道的互指阵列(IDA)微电极酶联 DNA 杂交检测方法,可实现亚纳摩尔级检出限。为突破传统电化学生物传感器的灵敏度限制,作者采用可循环氧化还原产物 4-氨基苯酚(PAP)作为信号分子,并与金 IDA 微电极耦合。该 IDA 指间距为 10 μm,易于制备;微流控通道限制扩散,使 PAP 循环效率达到 97...
Artificial cells, blood substitutes, and immobilization biotechnology
2011
Sezgintürk MK, Dinçkaya E
β-半乳糖苷酶可将乳糖水解为葡萄糖和半乳糖,因其在医学、食品和环境领域具有生物技术价值,作者提出一种用于监测β-半乳糖苷酶活性的生物传感器体系。该传感器以玻璃碳电极为基底,通过戊二醛交联固定葡萄糖氧化酶,并电聚合苯胺形成稳定层;在0.05 M柠檬酸缓冲液(pH 4.8)中,利用铁氰化钾介导检测乳糖水解产生的葡萄糖。循环伏安法和电化学...
Artificial cells, blood substitutes, and immobilization biotechnology
2011
Sezgintürk MK, Dinçkaya E
本文报道了一种基于二茂铁介导的电化学生物传感器用于测定β-半乳糖苷酶活性。葡萄糖氧化酶(GOD)直接固定于玻璃碳电极表面,并以透析膜和O型圈覆盖形成生物活性层。传感器利用GOD对葡萄糖的氧化反应及二茂铁(Fc)介导电子转移:样品中β-半乳糖苷酶催化乳糖水解生成葡萄糖,葡萄糖进入GOD层被氧化,电子经Fc传递至电极,产生计时安培电流。...
Analytical chemistry
2011
Baldrich E, Muñoz FX, García-Aljaro C
N-酰基高丝氨酸内酯(AHLs)由革兰氏阴性菌产生,以细胞密度依赖方式调控基因表达。例如,铜绿假单胞菌等病原菌只有在 AHL 达到阈值浓度时才诱导毒力因子表达,提示细菌群体已足以引发感染。本研究使用携带 β-半乳糖苷酶(β-gal)报告基因、且该基因受群体感应启动子控制的指示菌株 Agrobacterium tumefaciens ...
Journal of molecular microbiology and biotechnology
2009
Fantino JR, Barras F, Denizot F
本文开发了一种名为 sposensor 的通用全细胞细菌生物传感器,其核心为固定化的工程化枯草芽孢杆菌芽孢。该传感器包含两类芽孢:报告芽孢携带与响应待测化合物启动子融合的报告基因,对照芽孢用于监测细胞萌发与活力。为满足现场分析要求,作者建立了一步式孵育/检测流程:将芽孢直接置于含待测化合物的培养基中,使其萌发并表达报告基因。两种传感...
Journal of molecular recognition : JMR
2009
Ferraz RM, Rodríguez-Carmona E, Ferrer-Miralles N, Meyerhans A 等 5 人
本研究评估了来自HIV-1结构蛋白gp41、gp120、p17和p24的六种抗原肽作为抗HIV-1抗体识别元件在变构酶学生物传感器中的适用性。通过常规重组DNA技术,将这些肽插入大肠杆菌β-半乳糖苷酶(E. coli β-galactosidase)的溶剂暴露表面,构建一系列嵌合酶。所得酶被用于检测HIV-1感染者血清中的免疫反应性...
Journal of biomolecular screening
2008
Ferraz RM, Martínez MA, Cubarsi R, Villaverde A
本研究利用一种可检测抗HIV-1 gp41表位修饰抗体的酶免疫传感器,探讨抗逆转录病毒治疗(ART)对HIV-1感染者抗病毒体液免疫反应的影响。该传感器为工程化大肠杆菌β-半乳糖苷酶NF795gpC,其表面暴露gp41 P1免疫显性表位,抗gp41抗体结合后可通过别构效应改变酶活性。作者检测了未治疗、连续ART及中断治疗HIV-1患...
Journal of agricultural and food chemistry
2008
Majid E, Male KB, Luong JH
本研究利用大肠杆菌四聚体β-半乳糖苷酶催化邻硝基苯基-β-D-半乳糖苷(ONPG)水解释放邻硝基苯酚(ONP),用于食品中大肠杆菌污染的电化学检测。采用硼掺杂金刚石(BDD)电极在+0.93 V进行安培检测,无需表面修饰。酶活性通过异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导,在十二烷基硫酸钠(SDS)存在下50 °C时活性最高。校...
Applied and environmental microbiology
2008
Kawaguchi T, Chen YP, Norman RS, Decho AW
本研究开发了一种简单、灵敏且快速的无细胞检测系统,用于检测细菌群体感应中的 N-酰基高丝氨酸内酯(AHL)自诱导物。该方法改进了以往基于全细胞生物传感器的检测策略,采用 AHL 生物传感器菌根癌农杆菌 NTL4(pCF218)(pCF372) 的细胞裂解液作为无细胞反应体系。当外源 AHL 加入后,裂解液中的 TraR 受体与 AH...