Live cell optical sensing for high throughput applications.
活细胞光学传感利用无标记光学生物传感器,在传感器传感体积内非侵入地测量活细胞受刺激后发生的动态质量重分布(DMR)。所得 DMR 信号是一种整合性细胞应答,反映刺激通过其作用的细胞靶点所介导的细胞信号转导。本文综述了活细胞光学传感在细胞生物学和配体药理学研究中的应用,重点介绍共振波导光栅(RWG)生物传感器细胞检测在高通量筛选中的应...
活细胞光学传感利用无标记光学生物传感器,在传感器传感体积内非侵入地测量活细胞受刺激后发生的动态质量重分布(DMR)。所得 DMR 信号是一种整合性细胞应答,反映刺激通过其作用的细胞靶点所介导的细胞信号转导。本文综述了活细胞光学传感在细胞生物学和配体药理学研究中的应用,重点介绍共振波导光栅(RWG)生物传感器细胞检测在高通量筛选中的应...
实时检测细胞内病毒复制仍是研究难点。Epic系统是一种高通量、无标记光学检测平台,既能用于生化分析中的分子相互作用测量,也能通过细胞动态质量重分布(DMR)测量细胞整体响应。DMR此前已用于受体刺激后的细胞信号研究。本文首次报道利用Epic系统测量病毒复制诱导的细胞响应,证明该平台不仅能灵敏、定量地检测细胞内病毒复制,还可用于病毒抑...
靶向肿瘤中失调的信号通路已推动信号转导抑制剂的发展,包括表皮生长因子受体(EGFR)抑制剂。为解析致癌通路、识别关键通路决定因素并评价靶向药物疗效,需要在生理条件下检测时间依赖性信号事件。本文报道了一种无标记光学生物传感器的应用,用于揭示癌细胞对表皮生长因子(EGF)的快速响应,该响应以动态质量重分布(DMR)信号表达。在EGF刺激...
当前 GPCR 细胞学检测常依赖荧光染料装载、荧光标记靶标或报告基因表达,这些操作可能改变靶 GPCR 的细胞生理状态,并受化合物脱靶干扰。无标记光学生物传感器技术可提供非侵入性方法研究 GPCR 激活与信号转导。该平台仅用一套检测体系即可评价药物对耦联不同信号通路(Gs、Gi、Gq)的多种 GPCR 的作用,具有较高灵敏度,并能检...
在基础研究和药物发现中,通过G蛋白偶联受体(GPCR)实现通路选择性的胞内信号转导,已成为精确调控细胞功能的新策略。GPCR在信号转导上常具有多效性,即内源性递质或外源性药物刺激受体后可同时激活多条胞内生化通路。本研究考察了一类新型GPCR激活剂的信号行为,该类化合物被设计为同时结合毒蕈碱型乙酰胆碱受体的正构递质结合位点和别构位点。...
当前针对G蛋白偶联受体(GPCR)的药物发现高度依赖人工细胞系统,常具有通路偏倚。作者开发无标记光学生物传感器细胞检测,用于在生理及疾病相关环境中研究内源受体的系统细胞生物学和GPCR配体的系统细胞药理学。共振波导光栅(RWG)生物传感器可检测传感器表面附近局部折射率的微小变化;由于细胞内折射率取决于生物量(蛋白质、分子复合物)的密...
本文报道了一种双联无标记光学生物传感器细胞检测法,用于在 A431 细胞中同时检测两个内源 G 蛋白偶联受体:Gq 偶联的组胺 H1 受体(H1R)和 Gs 偶联的 β2 肾上腺素受体(β2AR)。检测分为两步:首先使用 Sigma LOPAC 化合物库进行激动剂筛选,随后用含 H1R 激动剂组胺和 β2AR 激动剂肾上腺素的混合溶...
Epic细胞检测技术(Corning Epic)采用共振波导光栅(RWG)光学生物传感器,通过测量细胞内容物动态质量重分布(DMR)来检测细胞对配体的响应。该DMR测量是一种无创、无标记方法,可用于评价化合物的药理学性质。本研究在384孔微孔板中,利用Corning Epic系统对12种化合物在两种重组表达G蛋白偶联受体(GPCR)...
配体导向的功能选择性研究需要高分辨率工具来解析受体生物学与配体药理学。本研究采用无标记光学生物传感器,监测人表皮样 A431 细胞在多种 β2 肾上腺素受体(β2AR)配体作用下的动态质量重分布(DMR)。该传感器基于倏逝波检测细胞近表面折射率变化,可在活细胞中无偏地监测内源受体激活。多参数分析显示,不同激动剂诱导的受体激活与信号传...
细胞信号通过细胞靶点介导,并由下游信号网络的空间与时间动态编码;时间动态与信号活性空间梯度的耦联引导细胞对刺激的响应。若能实时监测细胞信号的整合过程,将为理解细胞生物学与生理学提供新维度。光学生物传感器,尤其是共振波导光栅(RWG)生物传感器,可呈现与细胞物质动态重分布相关的、具有生理相关性的整合细胞响应,从而为细胞信号研究提供无创...