本研究评估了一种基于生物素化GroEL-链霉亲和素生物层干涉（GroEL-BLI）的自动化方法，用于检测多种药理学相关单克隆抗体（mAb）溶液中瞬时形成的前聚集体。利用该方法对IgG1和IgG4 mAb的聚集倾向进行排序，并对最不稳定IgG4 mAb施加高温、酸性pH及盐酸胍等应力。结果显示，GroEL-BLI主要在尺寸排阻色谱（S...
有机磷农药三唑磷在农业中广泛使用，其环境残留和潜在健康风险受到关注，因此需要定期监测环境及农产品中的三唑磷残留。本文报道了一种用于痕量检测三唑磷的非竞争性直接表面等离子共振（SPR）免疫传感器。两种抗三唑磷单克隆抗体（mAb）被固定于传感芯片表面，并通过SPR动力学分析表征其与三唑磷的结合特性。基于解离速率较低、结合更稳定的抗体建立...
我们开发了一种低成本、便携的石墨烯基生物传感器，利用高特异性固定化单克隆抗体检测寨卡病毒。通过场效应生物传感（FEB），将单克隆抗体共价连接至石墨烯，实现对天然寨卡病毒（ZIKV）抗原的实时、定量检测。针对抗原（ZIKV NS1）剂量，电容变化百分比与临床显著水平一致，可在缓冲液中检测低至450 pM的抗原。通过在模拟人血清中测量寨...
本研究报道一种基于还原氧化石墨烯（rGO）通道化学电阻的生物传感器，用于直接免疫检测压力生物标志物皮质醇。皮质醇单克隆抗体（c-Mab）通过EDC/NHS共价偶联固定于rGO通道表面，并以乙醇胺（EA）封闭非特异性结合。当皮质醇与c-Mab特异性结合时，rGO通道电阻发生变化，通过测量源漏电流/电阻实现无标记直接检测。该传感器在rG...
表面等离子共振（SPR）生物传感器已广泛用于药物发现与开发的不同阶段，但高通量 SPR 生物传感器的缺乏仍是快速动力学筛选大量单克隆抗体（mAbs）的主要瓶颈。为进一步提高 Biacore 4000 生物传感器的通量，作者开发了三种动力学筛选方法，用于表征 mAb-抗原相互作用：16-mAb 捕获动力学、单循环动力学（SCK）和平行...
当前工业药物发现通常以候选药物库对靶标分子进行经验性筛选。相比平衡法，高通量动力学测量能够分别获得结合亲和力的各动力学组分。尽管仪器硬件提升了通量，数据处理仍存在三个瓶颈：现有商业分析模型未考虑导致体外生物物理质量差的分子固有性质；通过用户界面处理数据耗时且不利于并行采集；尚无商业方案能在动力学竞争分析中纳入历史动力学数据。本文提出...
本研究开发了一种基于表面等离子共振（SPR）的生物传感检测方法，用于在哺乳动物细胞培养上清中定量单克隆抗体曲妥珠单抗（Trastuzumab, TZM），并在同一传感实验中确认其生物活性，即与抗原 Her2 的结合能力。该方法利用 FcγRI（CD64）胞外域作为识别元件，通过部分质量传输限制条件，对转染后细胞培养过程中采集的未纯化...
新生儿Fc受体（FcRn）与重组人单克隆抗体（rhumAb）的结合是决定抗体药代动力学的重要因素，IgG Fc区保守结合基序可与FcRn发生pH依赖性结合。表面等离子共振（SPR）生物传感器常用于表征FcRn-rhumAb相互作用，通常将rhumAb（格式1）或FcRn（格式2）固定于传感器芯片。由于有证据提示rhumAb可变区也可...
表面等离子共振（SPR）长期用于药物候选分子的亲和力与动力学表征。随着治疗性单克隆抗体（mAbs）药物类别增长以及高通量无标记生物传感器出现，其应用已从单纯结合测量扩展到早期药物发现中的表位表征，包括 mAb 的表位分箱与映射。本文综述了表位表征在抗体药物发现早期的重要性，并提出成功发现先导化合物的策略：在克隆预筛选后对 mAbs ...
本文开发了一种用于灵敏检测肝癌细胞的新方法：将抗CD155和抗CD112单克隆抗体偶联到包埋罗丹明6G和荧光素的超亮荧光介孔硅纳米颗粒（FMSN）上。所得纳米颗粒直径为90 nm，量子产率为69%。由于荧光素的发射光谱与罗丹明6G的激发光谱高度重叠，且两种染料在纳米颗粒上距离足够接近，二者之间可发生荧光共振能量转移。该能量转移不仅保...
登革病毒非结构蛋白1（NS1）在感染患者血液样本中循环，可用于登革感染的早期诊断。本文报道利用直长程表面等离子体波导（LRSPP）检测感染患者血浆中天然存在的登革NS1抗原。研究采用三种商品化抗NS1单克隆抗体作为识别元件，并比较其检测性能。作者采用与常规登革NS1捕获酶联免疫吸附试验（ELISA）相似的阳性/阴性比值指标评价结果。...
肉毒神经毒素A和E（BoNT/A和BoNT/E）的酶活性可导致人类致命性麻痹症状，快速检测至关重要。作者基于表面等离子共振（SPR）监测底物切割产物的芯片方法，在已建立的BoNT/A活性检测基础上，开发了检测BoNT/E活性的类似格式。研究制备了特异性识别BoNT/E切割SNAP-25后新生表位的单克隆抗体mAb11C3，并将其用于...
岩藻毒素（OA）及其衍生物DTX-1和DTX-2是引起腹泻性贝类中毒的海洋生物毒素。目前常规监测依赖小鼠生物测定，但该方法技术可靠性差且涉及动物使用，因此需要便捷可靠的替代方法。本研究制备了一组抗OA单克隆抗体，并筛选出最适合用于表面等离子共振（SPR）生物传感器检测的抗体。所选抗体对DTX-1的交叉反应率为73%，表明其同时适用于...
本研究制备了一种无标记阻抗免疫传感器，用于霍乱弧菌（Vibrio cholerae, V. cholerae）检测。该传感器以草酸（oxalic acid, OA）包覆的氧化铁（Fe3O4）纳米棒为功能化平台，通过牛血清白蛋白（BSA）和抗霍乱弧菌单克隆抗体（Ab）修饰氧化铟锡（ITO）电极。采用 X 射线衍射（XRD）、透射电子显...
H5N1禽流感不仅造成严重经济损失，也对公共卫生、农业和野生动物构成重大威胁，因此亟需快速、灵敏且特异的检测平台用于疫情监测与控制。本研究开发了一种基于聚二炔（PDA）的高灵敏、高特异、快速比色生物传感器，用于检测H5流感病毒。该传感器由10,12-戊二炔酸（PCDA）与1,2-二肉豆蔻酰-sn-甘油-3-磷酸胆碱（DMPC）按优化...
食品防御要求能够高效筛查大量食品中的微生物病原体。即使快速检测方法也常需长时间富集，难以满足实际应用。因此，亟需快速、灵敏、特异且廉价的食品微生物病原体提取与浓缩方法。本研究针对大肠杆菌O157:H7建立了基于电活性磁性纳米颗粒（EAMNPs）的免疫磁分离（IMS）方法。EAMNPs由氧化铁核心和聚苯胺导电涂层构成，可偶联单克隆抗体...
早期筛查疑似病例是控制禽流感（AI）H5N1传播的关键。作者前期已开发基于叉指阵列微电极生物芯片的阻抗生物传感器，但存在芯片成本与可靠性、抗体对亚洲田间H5N1特异性及真实样品检测等局限。本研究开发低成本阻抗免疫传感器，用于1 h内快速检测鸡拭子中的亚洲田间AI H5N1病毒。通过融合小鼠骨髓瘤细胞与H5N1免疫小鼠脾细胞制备特异性...
本研究通过细胞融合制备了针对微囊藻毒素-亮氨酸-精氨酸（MC-LR）的单克隆抗体。免疫原采用两步法合成：首先以EDC/NHS反应将卵白蛋白（OVA）或牛血清白蛋白（BSA）与6-乙酰硫己酸偶联，透析后在碱性条件下通过自由基反应与MC-LR连接，所得蛋白偶联物用于低体积免疫。抗体经间接竞争ELISA（icELISA）鉴定，并用于自来水...
本文报道了一种基于分子伴侣GroEL的生物层干涉（BLI）检测方法，用于识别药理学相关蛋白的结构改变和/或聚集物种。研究首先优化了生物素化GroEL在链霉亲和素BLI传感器上的固定，并通过圆二色、ANS荧光、浊度和GFP重折叠实验证明天然与生物素化GroEL均保持稳定的结构和活性。以酸性成纤维细胞生长因子-1（FGF-1）为例，40...
本研究采用表面等离子共振（SPR）技术，以实时、无标记方式筛选针对恶性疟原虫重组组氨酸富集蛋白-II抗原（rHRP-II Ag）的单克隆抗体（MoabPf）和多克隆抗体（PoabPf），用于生物传感器应用。实验以4-巯基苯甲酸（4-MBA）修饰金SPR芯片，通过EDC/NHS化学活化将rHRP-II Ag共价固定于芯片表面，再注入不...