脱嘌呤/脱嘧啶内切酶1（APE1）可特异性切割DNA中的脱嘌呤/脱嘧啶位点（AP位点），在碱基切除修复和维持基因组稳定性中发挥关键作用。APE1表达异常与心血管疾病、神经系统疾病及多种癌症相关，但现有痕量APE1检测方法在部分应用中仍不理想。为此，作者开发了一种无酶、无标记的超灵敏APE1生物传感平台，将APE1特异性位点识别与杂交...
本研究提出一种基于CRISPR/Cas12a检测3′–5′外切酶活性的方法。3′–5′外切酶（Exo III）参与DNA修复、复制校对等细胞过程，其表达失衡与癌症等疾病风险增加相关。作者将Cas12a激活序列构建于发夹探针（HP）的5′端，使探针形成平末端。当HP的3′端被Exo III水解时，原本隐藏的Cas12a激活序列被暴露，...
乙酰胆碱酯酶（AChE）是阿尔茨海默病（AD）发生和治疗中的关键酶。本文通过席夫碱反应，以超支化聚乙烯亚胺（PEI）和焦性没食子酸（pyrogallol）在水溶液中自组装，制备了高荧光发射、水溶性非共轭聚合物点（NCPDs）。所采用的一锅法使 NCPDs 制备过程更简便、节能且环境友好。作者系统研究了 NCPDs 的本征荧光机制及其...
等温核酸扩增技术对现代生物与生物医学中的高灵敏生物传感具有重要意义。本文提出一种简便、稳健的指数滚环扩增（RCA）策略，即通过修复酶与聚合酶共同实现引物重塑扩增（PAJRP），并以尿嘧啶-DNA糖基化酶（UDG）为模型分析物。预先将环状模板（CT）分别与含尿嘧啶发夹探针和含四氢呋喃无碱位点模拟物（AP位点）的荧光淬灭探针（AFP）杂...
亮氨酸氨基肽酶（leucine aminopeptidase, LAP）是一种可水解 N 端含亮氨酸残基的肽或蛋白的水解酶，也是多种病原体致病能力的关键毒力因子，为感染性疾病的诊断和治疗提供了新视角。本研究开发了一种新型荧光探针 DDBL，其以 DDAO 为荧光团、亮氨酸为识别基团，用于 LAP 检测。通过实时视觉传感 LAP，该方...
转录因子（TFs）是调控基因表达的关键蛋白，其水平异常与多种疾病密切相关。本文开发了一种基于CRISPR/Cas12a的荧光生物传感器，用于在核酸外切酶保护实验辅助下定量检测转录因子水平。作者设计了一种双链DNA激活剂，其中嵌入TFs结合域，并包含可激活Cas12a的PAM及crRNA可识别序列。当TFs与激活剂结合时，蛋白-DNA...
本文报道了一种基于目标诱导转录放大触发 CRISPR/Cas13a 反式切割活性的超灵敏碱性磷酸酶（ALP）荧光传感策略（TITAC-Cas）。该体系以整合 T7 启动子（5′-磷酸）和转录模板的双链 DNA（5′P-dsDNA）作为 ALP 底物。无 ALP 时，5′P-dsDNA 被 λ 外切酶（λexo）降解，导致 T7 转录...
乙酰胆碱酯酶（AChE）在生物信号传递中起关键作用，其异常表达与多种神经退行性疾病相关。本文基于二氧化锰纳米片（MnO2 NSs）的氧化酶样活性，发现 MnO2 NSs 无需过氧化物即可直接氧化硫胺素生成强荧光硫色素。当引入 AChE 后，乙酰硫代胆碱（ATCh）被水解生成硫代胆碱（TCh），TCh 可将 MnO2 NSs 还原为 ...
本文报道了一种用于检测胰蛋白酶的新型传感器，采用专门设计的荧光素标记肽与经酸氧化修饰的带负电荷碳纳米颗粒（CNPs）构建。荧光素标记肽的荧光被CNPs淬灭。传感器与胰蛋白酶反应后，肽链被切割，染料部分释放，荧光强度显著增强，且该增强随胰蛋白酶浓度和反应时间变化，从而可定量胰蛋白酶。相应地，该生物传感器发展出一种简便高效的荧光法测定胰...
DNA腺嘌呤甲基转移酶（Dam MTase）可催化DNA甲基化并影响基因调控，其活性检测对临床诊断和治疗具有重要意义。本研究开发了一种基于甲基化敏感切割引物触发超支滚环扩增（HRCA）的无标记荧光生物传感器，用于检测Dam MTase活性。设计了一种发夹DNA探针（HP），其茎部含有Dam MTase特异性识别序列，作为甲基化底物。...
本文展示大环主体葫芦[8]脲（CB[8]）与荧光染料二甲基二氮杂吖丙啶双阳离子（MP）自组装形成结合型生物传感体系，其空腔可同时捕获吲哚胺 2,3-双加氧酶 1（IDO1）的上游底物色氨酸（Trp），从而提供一种无标记、实时监测 IDO1 活性的方法。将过表达 IDO1 的恶性 HeLa 和 HepG2 细胞与该结合型生物传感器孵育...
本文报道了一种基于目标激活DNA聚合酶活性的核糖核酸酶H（RNase H）活性检测方法。该方法以由DNA聚合酶特异性适配体（DPA）和含RNA链（RS）杂交形成的检测探针为核心；初始状态下，DPA-RS探针抑制Taq DNA聚合酶活性。当RNase H存在时，其特异性水解RNA/DNA杂交双链中的RNA区，使检测探针去稳定，从而恢复...
本研究建立了一种用于高灵敏、高选择性检测肾上腺素（adrenaline, Adr）的新型简单荧光生物传感器。首先通过水热法合成 L-半胱氨酸（L-Cys）包覆的水溶性 CuInS2 量子点（QDs）。由于静电相互作用和氢键作用，正电荷肾上腺素可组装在 CuInS2 QDs 表面，形成 Adr-CuInS2 QD 静电复合物。加入酪氨...
蛋白激酶A（PKA）可通过磷酸化底物肽或蛋白调控多种细胞生物过程。本文基于11-巯基十二烷酸封端金纳米簇（MUA-Au NCs）和氧化石墨烯（GO）开发了一种低背景噪声的荧光生物传感方法，用于检测PKA活性。该策略中，特殊设计的肽可通过Au-S键锚定在MUA-Au NCs表面，同时因静电作用吸附于GO表面。因此，以肽为桥，MUA-A...
基于熵驱动 toehold 介导发夹置换（ETHDA），提出一种简便、敏感的一步荧光传感平台，用于评估甲基转移酶（MTase）催化的 DNA 甲基化过程。在该体系中，发夹探针先被 DNA 腺嘌呤甲基化（Dam）MTase 甲基化，再被 DpnI 内切酶切割，释放催化链以启动信号放大。催化链触发 ETHDA 循环过程，使荧光强度增加。...
可逆蛋白质乙酰化是重要的翻译后修饰，主要由组蛋白乙酰转移酶（HATs）和组蛋白去乙酰化酶（HDACs）催化。本文建立了一种无标记荧光均相检测方法，用于检测 HAT/HDAC 活性及其抑制剂。该方法基于 G-四联体（G4）与乙酰化相关肽之间的静电相互作用，引起 G4/硫黄素 T（ThT）复合物荧光强度显著变化。HAT（p300）活性检...
石墨相氮化碳（g-C3N4）纳米片是一类新兴类石墨烯碳基二维纳米材料，具有高荧光量子产率和较大比表面积，在生物传感器领域具有应用潜力。然而，现有基于g-C3N4的生物传感器多局限于金属离子配位检测，面向通用生物标志物的新设计具有重要意义。本文报道了一种基于g-C3N4纳米片的新颖纳米传感策略，用于高灵敏、单步、无标记检测酪氨酸酶（T...
本文描述了用于富亮氨酸重复激酶2（LRRK2）的选择性活性探针的设计、合成与评价。LRRK2是帕金森病治疗的潜在分子靶点。作者的最优化学传感器设计称为Nictide-S2，其在底物序列的工程化半胱氨酸位点引入磷酸化敏感的磺酰胺-8-羟基喹啉荧光团。该设计允许对LRRK2激酶活性进行直接、实时分析，检测限为2.5 nM。在优化条件下，...
本文报道了一种基于金纳米颗粒（AuNPs）荧光偏振增强效应和λ核酸酶（λ exo）切割反应的荧光偏振（FP）纳米传感器，用于检测T4多聚核苷酸激酶（T4 PNK）活性及其抑制。该传感器以3'端修饰AuNPs的DNA发夹探针为T4 PNK底物，在ATP存在下，T4 PNK将DNA 5'-羟基磷酸化，λ exo随即切割5'-磷酸化末端，...
环二鸟苷酸（c-di-GMP）是细菌中调控毒力表达、生物膜形成等过程的重要第二信使，其胞内水平由 GGDEF 结构域二鸟苷酸环化酶（DGC）合成和 EAL/HD-GYP 结构域磷酸二酯酶（PDE）降解共同控制。目前体外检测 DGC/PDE 酶活多依赖放射性标记 c-di-GMP 或 HPLC，操作复杂且通量低。本文基于铜绿假单胞菌 ...