Methods in enzymology
2020
Bozdogan A, Hageneder S, Dostalek J
等离激元纳米结构被用于多种分析技术,以检测化学和生物物种,其中也包括气味结合蛋白(OBP)及其与气味分子相互作用的表征。由于气味分子分子量低,常规表面等离子共振(SPR)难以直接检测,因此需要采用其他等离激元传感模式。本章提供基于两种利用 OBP 与亲和伙伴特异性结合后发生构象变化的实验指南。首先讨论用 SPR 监测生物分子构象变化...
Chemistry (Weinheim an der Bergstrasse, Germany)
2014
Sulmann S, Dell'Orco D, Marino V, Behnen P 等 5 人
信号通路中的关键蛋白通过构象开关控制信号转导的启动、持续与终止。钙离子(Ca2+)传感器蛋白是典型开关蛋白,可响应胞内 Ca2+ 浓度振荡而发生构象变化。本文利用动态光散射(DLS)和基于表面等离子共振(SPR)的新方法,比较了钙调蛋白(CaM)、肌钙蛋白 C(TnC)、recoverin 和鸟苷酸环化酶激活蛋白(GCAP1)等典型...
Growth factors (Chur, Switzerland)
2012
Walker F, Rothacker J, Henderson C, Nice EC 等 14 人
表皮生长因子受体(EGFR)激酶激活需要配体结合其细胞外域(ECD)。已有晶体结构显示 EGFR-ECD 可呈 tethered 单体或配体存在下的 untethered back-to-back 二聚体。本研究利用 Biacore 表面等离子共振生物传感器分析不同 C 端延伸的截短 EGFR1–501-ECD 和全长 EGFR1–...
Analytical chemistry
2012
Dell'Orco D, Sulmann S, Linse S, Koch KW
钙离子传感蛋白通过响应胞内钙离子浓度的精细变化而采取特定构象,从而调控多种细胞过程。本文报道了一种基于表面等离子共振(SPR)的方法,可在 0.1−0.6 μM 钙离子浓度范围内同时检测四种参与脊椎动物光转导级联的钙离子传感蛋白(钙调蛋白、recoverin、GCAP1 和 GCAP2)的构象动力学。在定量模拟细胞条件的体系中,该方...
International immunopharmacology
2011
Ling Y, Yang ZY, Yin T, Li L 等 7 人
高迁移率族蛋白1(HMGB1)是炎症晚期介质,其细胞因子活性主要由晚期糖基化终末产物受体(RAGE)介导。由于HMGB1具有肝素结合活性,本研究探讨肝素是否干扰HMGB1/RAGE相互作用并抑制其细胞因子活性。作者采用荧光光谱、圆二色谱和表面等离子共振(SPR)生物传感器技术评估肝素对HMGB1构象及HMGB1/RAGE结合的影响。...
Biochemistry
2010
Geitmann M, Retra K, de Kloe GE, Homan E 等 7 人
本研究以淡水螺 Lymnaea stagnalis 的乙酰胆碱结合蛋白(AChBP)作为 Cys-loop 配体门控离子通道胞外域模型,采用乙酰胆碱、尼古丁、epibatidine 及一系列取代奎宁环化合物作为配体,建立了基于表面等离子共振(SPR)生物传感器的直接相互作用测定方法。该方法可实时表征固定化 AChBP 与小分子激动剂...
Analytical biochemistry
2009
Christopeit T, Gossas T, Danielson UH
本研究利用表面等离子共振(SPR)生物传感器表征钙离子(Ca2+)与C反应蛋白(CRP)的相互作用。将CRP固定于传感器芯片上,依次注入不同浓度的Ca2+或磷脂酰胆碱(phosphocholine)。Ca2+结合产生的信号比仅按其分子量估算高约10倍,作者将其归因于Ca2+结合诱导的构象变化。稳态数据可用两个独立结合位点模型拟合:高...