Biophysical journal
2008
Dillingham MS, Tibbles KL, Hunter JL, Bell JC 等 6 人
单链DNA(ssDNA)的形成与维持是复制、转录、修复和重组等DNA过程的关键环节。DNA解旋酶通过耦合ATP水解催化双链DNA(dsDNA)解链,使碱基暴露并进一步加工。为理解相关生物学过程,需要能够实时、高灵敏地监测解旋酶活性及其机制的探针。本文报道了一种无试剂荧光生物传感器的开发与应用,该传感器基于大肠杆菌单链DNA结合蛋白(...
Molecular endocrinology (Baltimore, Md.)
2008
Willets JM, Taylor AH, Shaw H, Konje JC 等 5 人
组胺可刺激子宫收缩,但子宫组胺受体信号调控机制尚不清楚。本研究在人子宫平滑肌 ULTR 细胞系和原代人子宫平滑肌细胞中,利用肌醇 1,4,5-三磷酸(IP3)荧光生物传感器 eGFP-PHPLCβ 和钙敏感染料 Fluo-4,检测组胺刺激的 Gq/11 偶联 H1 组胺受体信号。结果显示,组胺引起浓度依赖性的 IP3 生成和胞内钙升...
Journal of the American Chemical Society
2008
Chan PH, So PK, Ma DL, Zhao Y 等 13 人
荧光素标记的 PenPC β-内酰胺酶 E166C 突变体(E166Cf)是从非变构蛋白构建“开关型”荧光生物传感器的成功模型。本文重点研究 E166Cf 在 β-内酰胺抗生素结合与水解过程中荧光变化的传感机制。利用电喷雾质谱和停流荧光研究 E166Cf 与头孢呋辛、青霉素 G 及 6-氨基青霉烷酸(6-APA)的相互作用,发现酶-...
Biotechnology progress
2008
Ge X, Rao G, Tolosa L
尽管毫摩尔级灵敏度葡萄糖传感器仍为主流,但微摩尔级灵敏度传感器因快速微透析、离子导入和激光打孔提取组织间液等微创采样技术而受到关注。葡萄糖结合蛋白(GBP)对葡萄糖的结合常数处于微摩尔范围,因而特别相关。GBP是革兰氏阴性菌周质空间中的可溶性结合蛋白之一。由于其铰链样三级结构,葡萄糖结合会诱导显著构象变化;将极性敏感荧光探针连接至对...
Biosensors & bioelectronics
2008
Arcidiacono S, Pivarnik P, Mello CM, Senecal A
本研究评估荧光标记抗菌肽(AMP)能否替代标记抗体,用于大肠杆菌O157:H7的三明治检测。AMP天然结合细菌细胞壁脂多糖(LPS),且分子量小于抗体,可在细胞表面更高密度结合,从而提高光学信号和灵敏度。作者将抗菌肽cecropin P1、SMAP29和PGQ经C端半胱氨酸与Cy5荧光染料通过马来酰亚胺连接化学标记。全细胞溶液结合初...
Vision research
2008
Prow TW, Bhutto I, Grebe R, Uno K 等 7 人
细胞自身的抗氧化反应元件(ARE)可用于评估糖尿病并发症。本文检验了合成 ARE 能否作为基因开关或生物传感器,用于开启或关闭治疗基因。线粒体氧化应激(MOS)被认为是糖尿病最早损伤之一。用于监测 MOS 的荧光探针显示,将葡萄糖以生理水平加入内皮细胞培养体系即可诱导高于正常水平的 MOS,并呈剂量依赖性。进一步数据显示,葡萄糖水平...
Biosensors & bioelectronics
2008
Schultz E, Galland R, Du Bouëtiez D, Flahaut T 等 9 人
本文报道了一种面向环境监控等现场应用的新型荧光阵列生物传感器,并成功用于DNA杂交检测。该传感器以普通显微镜玻璃片同时作为换能器和生物阵列载体,利用聚焦的532 nm LED对玻璃片表面的多个传感区进行正交激发,激发产生的荧光通过全内反射在玻璃片内导引至边缘直接连接的光电倍增管(PMT)检测。系统无需机械扫描或成像光学元件,即可对四...
Science (New York, N.Y.)
2008
Yeung T, Gilbert GE, Shi J, Silvius J 等 6 人
带多碱性簇或阳离子结构域的蛋白可被负电荷膜通过静电作用靶向到特定亚细胞区室。磷脂酰丝氨酸(PS)是细胞膜中主要的阴离子磷脂,但其在完整细胞各膜表面电荷中的贡献长期未知,部分原因是缺乏可在完整细胞中分析其分布的试剂。作者开发了一种遗传编码荧光生物传感器,用于研究PS的亚细胞分布。该探针由乳粘附素C2结构域(Lact-C2)与绿色荧光蛋...
Sensors (Basel, Switzerland)
2007
Scognamiglio V, Aurilia V, Cennamo N, Ringhieri P 等 13 人
大肠杆菌D-半乳糖/D-葡萄糖结合蛋白(GGBP)是一种约32 kDa的单体蛋白,其结构由两个主结构域和铰链区组成,糖结合位点位于两个结构域之间的裂隙中,能以微摩尔级亲和力结合葡萄糖。本文报道利用GGBP第182位氨基酸突变体作为荧光探针,构建非消耗型葡萄糖荧光生物传感器,用于糖尿病血糖监测。通过定点突变在糖结合位点附近引入单个半胱...