Protein-Ligand Interactions Using SPR Systems.
表面等离子共振（SPR）生物传感器技术已成为药物发现和基础研究的重要工具。SPR 仪器可用于测定相互作用的结合动力学与亲和力、特异性研究、筛选、方法开发以及浓度测定。相互作用分子可以是蛋白、肽、脂质、病毒、核酸，也可以是片段或候选药物等小分子有机物。由于能够实时获得信息，SPR 使抗体和小分子/片段相互作用分析从依赖标记及亲和力/I...
Physicochemical and immunochemical assays for monitoring consistent production of tetanus toxoid.
破伤风毒素经甲醛脱毒是生产破伤风类毒素的关键步骤，所得化学修饰蛋白在很大程度上决定疫苗的最终效力与安全性。目前破伤风类毒素批次的质量主要依靠动物效力与安全性试验评价。本文提出一组体外方法，用于提供破伤风类毒素质量的详细信息。作者采用递增浓度的甲醛和甘氨酸制备10个实验批类毒素，使其在抗原性、免疫原性、残余毒性和蛋白结构上存在差异。随...
Label-free monitoring of cell-based assays: combining impedance analysis with SPR for multiparametric cell profiling.
无标记方法监测细胞实验能够以时间分辨和非侵入方式观察哺乳动物细胞对化学、生物或物理刺激的响应。目前应用最广的技术是阻抗分析和基于倏逝波的光学传感，如表面等离子共振（SPR）。本研究将两种技术整合到同一实验装置中，使同一细胞群可被同时监测电学与光学变化。器件基于商用SPR芯片，经光刻加工，在同一基底上形成用于阻抗分析的电极和用于激发表...
A gravity-induced flow injection system for surface plasmon resonance biosensor.
便携式表面等离子共振（SPR）设备常用于即时检测，但集成微泵、管路及外部控制单元体积较大。本文提出一种基于重力驱动流动注射（gFI）系统的无源流动注射分析（FIA）方法，用于SPR检测。该系统无管路且无需外部控制，液体依靠自身重力进入检测区；通过过渡通道增大入口与出口储液池之间的液位差，使样品在过渡通道中加速，并在到达传感表面前达到...
Imidazolium-based ionic liquid surfaces for biosensing.
本文设计并合成了咪唑基离子液体自组装单分子层（IL-SAM），用于金表面生物传感。首先合成生物素化离子液体 IL-biotin，其自组装于金膜后可通过表面等离子共振（SPR）检测链霉亲和素；IL-biotin-SAM 能高效形成完整链霉亲和素单分子层，并降低非特异性吸附。其次合成羧基化离子液体 IL-COOH，经 EDC/NHS 活...
The role of the C-terminal helix of U1A protein in the interaction with U1hpII RNA.
既往动力学研究为剪接体A蛋白（U1A）N端RNA识别基序（RRM）与其靶RNA U1发夹II（U1hpII）的结合提供了‘诱捕-锁定’模型证据。该模型认为，未结合状态下紧邻RRM C端的α螺旋（helix C）遮蔽RNA结合表面；结合时helix C必须发生构象位移以容纳RNA，并形成新的疏水核心、蛋白内氢键以及U1A与U1hpII...
Label-free biosensing in complex media: a referencing approach.
本文提出一种用于复杂介质中无标记亲和生物传感的参考补偿新方法，称为单表面参考（SSR）。与传统方法在检测通道和参考通道使用不同生物功能表面不同，SSR将同一功能化表面划分为检测通道和参考通道：检测通道引入复杂样品，参考通道引入与过量分析物结合生物分子混合的同一复杂样品，使分析物被抑制而不能结合到表面。该方法确保只有检测通道捕获分析物...
Development of an oligopeptide functionalized surface plasmon resonance biosensor for online detection of glyphosate.
本文报道了一种基于寡肽识别元件的表面等离子共振（SPR）生物传感器，用于在线检测草甘膦。传感元件表面修饰了通过噬菌体展示库筛选获得的寡肽 TPFDLRPSSDTR。该寡肽对草甘膦具有较高结合特异性，平衡解离常数 KD 为 8.6 μM，可能与其序列中精氨酸（R）和天冬氨酸（D）残基的氢键及静电作用有关。为检测缓冲液中的草甘膦，将寡肽...
Biosensors in clinical practice: focus on oncohematology.
生物传感器是一类能够检测特定生物分析物，并将其存在或浓度转换为易于分析的电信号、热信号、光信号或其他信号的装置。首个生物传感器由Clark和Lyons于1962年设计，用于测定葡萄糖。此后，生物传感器技术取得显著进展，其应用潜力几乎无限。本综述聚焦于生物传感器的临床应用，尤其是血液肿瘤学领域。近年来，为改善血液恶性肿瘤患者的诊断与治...
An aptamer based surface plasmon resonance biosensor for the detection of bovine catalase in milk.
本研究报道了一种基于适配体的表面等离子共振（SPR）生物传感器，用于牛奶样品中牛过氧化氢酶（bovine catalase, CAT）的低前处理检测。生物素标记的单链DNA适配体通过链霉亲和素-生物素亲和捕获固定于金表面，形成无标记识别界面。在缓冲液体系中，传感器对CAT的检出限为20.5 nM（RSD 15.2%），动态范围为15...
Rapid and sensitive detection of maize chlorotic mottle virus using surface plasmon resonance-based biosensor.
玉米花叶斑驳病毒（MCMV）是重要检疫性植物病毒，现有ELISA和PCR方法常需复杂样品前处理、抗原/抗体标记且耗时较长。本文报道一种基于表面等离子共振（SPR）的无标记免疫传感器用于MCMV快速选择性检测。金SPR芯片经氨水/过氧化氢清洗后，用11-巯基十一烷酸（11-MUA）和11-巯基十一烷醇（11-MUO）形成自组装单分子层...
Determination of imidocarb residues in bovine and ovine liver and milk by immunobiosensor.
咪多卡星（imidocarb, IMD）是一种用于防治巴贝斯虫病和无形体病等寄生虫病的兽药，在牛和羊的可食组织及乳中残留可长达6个月，若休药期执行不当可能通过食品链影响人类健康。欧盟已对牛乳（50 μg/kg）和牛、羊肝（2 mg/kg）设定最大残留限量，因此需要可靠的食品监测方法。本文开发了一种基于免疫生物传感器的定性检测方法，用...
Discrimination of single base mismatched oligonucleotides related to the rpoB gene of Mycobacterium tuberculosis using a surface plasmon resonance biosensor.
本文报道了一种基于表面等离子共振（SPR）的生物传感器系统，用于检测并区分与结核分枝杆菌rpoB基因相关的单碱基错配寡核苷酸。该类突变可导致结核分枝杆菌药物耐药。研究将硫醇修饰的寡核苷酸探针P2和1-巯基-6-己醇固定在金传感表面上，考察固定探针P2与完全匹配靶标T2以及单碱基错配靶标TN在不同严格度缓冲液中的杂交行为。由于完全匹配...
Design, synthesis, and DNA binding characteristics of a group of orthogonally positioned diamino, N-formamido, pyrrole- and imidazole-containing polyamides.
正交定位的双氨基/双阳离子多胺（PAs）相比单氨基/单阳离子类似物具有更好水溶性、更强结合亲和力，并保持DNA小沟结合与序列特异性。本文报道了f-IPI(3a)、f-IPP(4)、f-PIP(5)和f-PPP(6)的合成及DNA结合特性，其中P表示在杂环N1位连接1-丙基氨基的位置。采用DNase I足迹、热变性、圆二色滴定、生物传...
Real-time detection of the chemokine CXCL12 in urine samples by surface plasmon resonance.
基于表面等离子共振（SPR）的生物传感器是实时测量无标记分析物生物分子相互作用的成熟工具，因此适合评估G蛋白偶联受体（GPCR）结合相互作用。本研究以携带趋化因子受体CXCR4的慢病毒颗粒为载体，使CXCR4保持其天然质膜环境，利用该颗粒作为特异性受体，通过SPR监测CXCR4与其配体CXCL12的相互作用。该方法在5–40 nM范...
Global analytical strategy to measure drug-plasma protein interactions: from high-throughput to in-depth analysis.
选择具有改善药代动力学性质的候选药物是降低药物研发失败率的关键，血浆蛋白结合（PPB）对体内药效和药物分布具有重要影响。目前制药行业最常用的 PPB 测定方法是平衡透析（ED）和超滤（UF），但二者存在平衡时间长、需额外定量方法、非特异性吸附、Donnan 效应等局限。本文提出一种全局化、易操作的分析策略，用于药物–血浆蛋白相互作用...
Structure-dependent activities of hydroxylated polybrominated diphenyl ethers on human estrogen receptor.
多溴联苯醚（PBDEs）可影响雌激素受体（ER）信号通路，羟基化PBDE（OH-PBDE）直接结合ER是可能机制之一。本研究用表面等离子共振（SPR）生物传感器定量测定22种不同溴代程度OH-PBDE与ER的结合亲和力。7种OH-PBDE可直接结合ER，KD为1.46×10−7 M至7.90×10−6 M，亲和力顺序为6-OH-BD...
Biosensor based on hydrogel optical waveguide spectroscopy for the detection of 17β-estradiol.
激素在亚ng/mL浓度下的快速检测对临床诊断、质量控制和环境监测具有重要意义。本文报道了一种基于水凝胶光波导光谱（HOWS）的新型无标记生物传感器，用于高灵敏检测17β-雌二醇（E2）。该传感器采用羧基化聚(N-异丙基丙烯酰胺)（PNIPAAm）三元共聚物薄水凝胶层，将其固定于金属传感表面，使其同时充当生物分子结合基质和光波导。当水...
Surface plasmon resonance sensing of nucleic acids: a review.
基于表面等离子共振（SPR）的生物传感器已成为研究并定量生物分子及其相互作用的核心工具。核酸（NA）在遗传信息存储、传递、表达及调控等生物过程中发挥关键作用，因此一直是SPR生物传感器的重要检测对象。本文综述了核酸SPR传感技术的发展进展，系统讨论了其在涉及核酸的分子相互作用研究中的应用，包括核酸–核酸、核酸–蛋白和核酸–小分子相互...
Label-free, real-time interaction and adsorption analysis 1: surface plasmon resonance.
蛋白质纳米技术需要理解单个蛋白如何与其他分子结合并组装成更大结构。为检测生物分子而引入标记物可能影响生物分子相互作用，因此需要无标记相互作用与吸附分析。本章及下一章综述两种生物传感器技术：表面等离子共振（SPR）和石英晶体微天平（QCM）。二者均可实时分析生物分子相互作用且无需标记。SPR 是光学技术，对受光照金表面附近蛋白或其他分...