Nanoscale bacteriophage biosensors beyond phage display.
噬菌体传统上用于噬菌体展示技术,以筛选高亲和性抗原特异性肽。近年来,其纳米尺寸、易于遗传改造以及可在衣壳外表面表达任意蛋白或肽的特性,使其在多种生物传感器中受到关注。噬菌体较短的复制周期可经济、快速、可重复地大规模生产工程化噬菌体传感器。随着临床生物标志物不断涌现,发展用于检测和定量这些标志物的现有及新技术十分必要。本综述按形态将噬...
噬菌体传统上用于噬菌体展示技术,以筛选高亲和性抗原特异性肽。近年来,其纳米尺寸、易于遗传改造以及可在衣壳外表面表达任意蛋白或肽的特性,使其在多种生物传感器中受到关注。噬菌体较短的复制周期可经济、快速、可重复地大规模生产工程化噬菌体传感器。随着临床生物标志物不断涌现,发展用于检测和定量这些标志物的现有及新技术十分必要。本综述按形态将噬...
随着污染物种类不断增加,环境监管与早期预警迫切需要精确、灵敏、特异、快速且易用的分析装置。光学生物传感器作为传统分析技术的重要替代手段,可在无需复杂样品前处理的情况下,实现对污染物的高灵敏、实时和高频监测。本文综述了用于环境污染物检测的功能性生物识别材料的重要进展,包括酶、抗体、适配体、DNAzyme和全细胞等,并讨论了这些材料如何...
Id蛋白是基本螺旋-环-螺旋转录因子的负调控因子,其保守的HLH结构域通过形成无DNA结合能力的异源二聚体抑制细胞分化相关基因转录,在肿瘤发生中发挥重要作用。本研究以已报道的Id1抑制剂肽3C为模板,通过固相肽合成法合成其N端丙氨酸取代类似物及第3位取代类似物,并经反相HPLC纯化、MALDI-TOF质谱鉴定。采用基于表面等离子共振...
本文研究一种变入射角亚波长光栅基多层表面等离子共振生物传感器(SPRB)的灵敏度增强。所提设计在多层SPR生物传感器的石墨烯层上方集成周期性亚波长光栅阵列,以增强表面等离子体激发和近场耦合,从而提高对生物分子相互作用的响应。传感器采用Kretschmann构型,由熔融石英棱镜、50 nm金膜、2 nm石墨烯层及PMMA亚波长光栅组成...
快速、可控地固定化生物活性小分子对生物传感器和微阵列应用非常重要。本研究利用反式环辛烯(TCO)与1,2,4,5-四嗪(Tz)之间高效、共价的生物正交[4+2]环加成反应,实现TCO/Tz衍生分子在微流控芯片上的固定化,并通过表面等离子共振(SPR)在连续流动条件下实时监测固定化过程。为获得可逆固定化并扩展传感表面实验范围,作者将非...
生物传感器对灵敏度和特异性的不断提高,使多价生物受体成为研究热点。在噬菌体亲和肽领域,整个噬菌体颗粒可被用作受体,而非仅使用单个展示肽。然而,完整噬菌体颗粒的结合动力学尚未得到系统研究,而这对于设计高效应用至关重要。本文利用自研光纤表面等离子共振(FO-SPR)生物传感器,研究展示肽库的噬菌体对增强绿色荧光蛋白(eGFP)的亲和力与...
核糖核苷酸还原酶(RNR)因在癌细胞 DNA 合成、增殖、转移和耐药中的核心作用而成为抗肿瘤靶点。现有临床 RNR 抑制剂存在半衰期短、易耐药和铁螯合等不足。本研究报道一类新型高效 RNR 抑制剂。通过计算机建模提出 RNR 小亚基 RRM2 C 端尾部附近存在新配体结合口袋,并经定点突变和核磁共振(NMR)验证。通过虚拟筛选美国国...
本研究提出一种基于混合自组装单分子层(mSAM)和金纳米颗粒(AuNPs)增强的表面等离子共振(SPR)免疫传感器,用于高灵敏检测缺血修饰白蛋白(IMA)。在清洁金芯片表面构建MHA/MUOH混合自组装单分子层,经NHS/EDC活化后共价固定抗IMA抗体,并用乙醇胺封闭未反应基团。检测时,样品中的IMA与表面抗体特异性结合;进一步将...
本研究构建了一种基于金纳米棒(GNRs)和氧化石墨烯(GO)的波长调制表面等离子共振(SPR)生物传感器,用于检测牛免疫球蛋白G(牛IgG)。GNRs通过种子介导法制备,并借助1,6-己二硫醇(HDT)以硫醇-金作用共价固定于Au膜表面;GO采用改进Hummers法制备,依靠静电作用组装到带正电的GNRs表面,并作为抗体固定支持物。...
单纯疱疹病毒(HSV)进入宿主细胞由四种糖蛋白执行并严格调控。虽然多种病毒糖蛋白可介导黏附,但只有 gD 与细胞受体结合才能激活核心融合蛋白 gB 和 gH/gL,完成膜融合与病毒进入。gD 与受体结合的原子结构显示,gD 胞外域 C 端必须先被移开,受体才能结合 gD,但哪些构象变化激活膜融合仍不清楚。我们理性设计 gD 突变以移...
降钙素原(PCT)是鉴定脓毒症病原来源与严重程度的有前景生物标志物。本文报道了一种表面等离子共振(SPR)生物传感器,利用分子印迹聚合物表面实现 PCT 的快速、可靠检测。微接触印迹过程中,PCT 先固定于玻璃支撑表面,再与含 2-羟乙基甲基丙烯酸酯(HEMA)和乙二醇二甲基丙烯酸酯(EGDMA)的单体溶液接触,并在 SPR 传感器...
胰岛素样生长因子结合蛋白6(IGFBP-6)可通过抑制IGF-II作用降低肿瘤细胞增殖与存活,但近年发现其还能以IGF非依赖方式促进横纹肌肉瘤(RMS)细胞迁移,且涉及MAPK通路,具体分子机制不清。本研究报道膜蛋白prohibitin-2(PHB2)是IGFBP-6诱导RMS细胞迁移的关键调控因子。PHB2与IGFBP-6在RMS...
本研究提出一种基于表面等离子共振(SPR)生物传感器的方法,用于实时评价过敏原提取物与免疫球蛋白E(IgE)的相互作用,并比较天然屋尘螨(Dermatophagoides pteronyssinus)提取物与去色素聚合(Dpg-Pol)过敏原提取物的IgE结合稳定性。实验在Biacore T100上进行,使用预处理C1芯片,将抗人I...
炭疽保护性抗原(PA)前孔七聚体的第2结构域在内体酸化过程中发生展开与再折叠,形成可插入内体膜的约100 Å β桶状孔,并促进致死因子(LF)和/或水肿因子(EF)从内体向细胞质转位。作者构建了PA前孔与LF结合域LFN的固定化复合物,利用表面等离子共振(SPR)和生物层干涉(BLI)实时监测前孔向孔转变的动力学。当溶液pH从7.5...
基于表面等离子共振(SPR)原理的仪器被广泛用于实时监测分子间相互作用:一个组分固定在传感器芯片表面,另一个组分在缓冲液连续流动中注入。经典SPR实验通常进行多轮结合与再生,以测定反应速率和平衡常数。2006年Karlsson等提出单周期动力学(SCK)方法,即按递增浓度依次注入分析物,仅在完整结合循环结束后进行一次再生。本文以10...
Trebananib(AMG 386)是一种实验性肽Fc融合蛋白,通过中和血管生成素-1(Ang1)和血管生成素-2(Ang2)与Tie2受体的相互作用抑制血管生成,可能在癌症患者中引发免疫反应。早期临床试验采用电化学发光桥联抗药抗体(ADA)测定,但在后期高剂量给药时灵敏度和药物耐受性不足。为此,作者开发了基于表面等离子共振(SP...
本研究强调吸附等温线估算中正确数据处理的重要性。作者对液相色谱(LC)和生物传感器两个密切相关平台上五个已有案例的吸附数据进行了重新评估与再处理,采用三步数值程序:(i)吸附数据预处理,(ii)吸附数据分析,(iii)最终竞争模型拟合。对每个案例,讨论实际测量的是什么,以及通过数值处理还能获得哪些额外信息。这些案例表明,对LC和生物...
PQS(铜绿假单胞菌喹诺酮信号分子)及其前体HHQ是铜绿假单胞菌群体感应系统的信号分子,它们通过结合受体PqsR诱导毒力因子产生和生物膜形成。PqsD酶催化HHQ的生物合成。本研究采用酶动力学分析和表面等离子共振(SPR)生物传感器实验,确定HHQ生物合成的机制和底物顺序;通过比较分析鉴定参与PqsD功能的关键结构域,并建立动力学循...
肺癌对人类健康构成严重威胁,近十年其死亡率未下降。早期诊断或预后评估有助于降低死亡率。若能在临床诊断前检测到 microRNA、肿瘤相关抗原(TAA)及相应自身抗体,生物传感器的高灵敏度可使癌症早期诊断和预后成为可能。本文综述了肿瘤相关生物标志物的识别方法以及当前可用的生物传感器技术,重点介绍利用生物传感器进行肺癌早期诊断的实验室研...
本文报道了一种基于表面等离子共振(SPR)的溶菌酶灵敏、选择性检测方法。传感器由50 nm金膜上沉积的薄层还原氧化石墨烯(rGO)构成,rGO通过氧化石墨烯(GO)在150 V下电泳沉积制备,沉积过程使GO部分还原为rGO,薄膜厚度随沉积时间变化;20 s短脉冲可获得数纳米厚度的rGO膜,适合SPR传感。抗溶菌酶DNA适配体通过π-...