轮状病毒非结构蛋白4（NSP4）显著改变细胞钙稳态：增加内质网（ER）通透性、降低ER钙库并激活质膜（PM）钙内流通道，使胞质钙升高2至4倍。胞质钙升高是病毒复制必需，但钙内流机制不清。NSP4是ER定位病毒孔蛋白，其活性耗竭ER钙并导致钙内流。作者假设NSP4介导的ER钙耗竭通过激活ER钙传感器STIM1而激活store-oper...
表达重组G蛋白偶联受体（GPCR）的细胞被特异性配体激活后，胞质钙离子浓度会在30–60秒内短暂升高并恢复基线。黄色Cameleon 3.6（YC3.6）是遗传编码钙指示剂，可与GPCR共表达，通过Förster共振能量转移（FRET）实时监测胞质钙变化。作者据此设计通用GPCR激活微流控生物传感器原型，在表达神经激肽1受体（NK1...
人工气味传感器在灵敏度、选择性和可检测气味种类方面通常不及生物嗅觉系统，而生物系统的优异性能依赖于气味受体的分子识别及其后的神经元信息处理。本文提出一种新型混合气味生物传感器，将昆虫离子型气味受体表达于啮齿动物离体神经元培养物中。该策略兼具功能表达容易、使用寿命较长以及可放大弱离子电流等优势。研究通过脂质体转染，在大鼠皮层神经元-胶...
本研究探讨新生小鼠嗅上皮中ATP的组成性释放与ATP诱导释放机制。采用荧光素-荧光素酶发光法定量ATP释放，并用共聚焦成像观察荧光ATP标记物quinacrine标记的囊泡ATP释放。结果显示，生理条件下ATP通过胞吐、半通道和ABC转运体组成性释放，可被艰难梭菌毒素A和丙磺舒抑制；ADP经P2Y受体和cAMP/PKA通路负向调节组...
神经元、感觉细胞和内分泌细胞通过分泌神经递质和激素进行细胞间通讯，并协调器官与系统功能。要确认某物质是特定细胞使用的细胞外信号分子，必须直接证明其被分泌。本方案介绍利用生物传感器细胞实时检测内分泌细胞释放神经递质的方法。采用稳定表达毒蕈碱型乙酰胆碱受体 M3 的中国仓鼠卵巢（CHO）细胞作为 ACh 生物传感器，负载 Ca2+ 指示...
细胞基生物传感器的应用常受细胞表面受体在激动剂持续刺激下发生脱敏的限制。本文报道了一种用于液体环境中检测三磷酸腺苷（ATP）的微流控细胞基生物传感器（μCBB）。该传感器集成了毫秒级化学脉冲发生器，并以单个表达内源性 P2Y 受体的 NIH-3T3 细胞作为识别元件。研究采用 ATP 溶液模拟输入信号，通过控制十字形微流控芯片两个出...
目的：灌流液流动变化可升高肾上皮细胞内钙浓度，培养肾上皮细胞需初级纤毛感知细微流动变化；在灌流肾小管中该流动反应由核苷酸经P2Y2受体介导，但机械应力作用于初级纤毛是否释放核苷酸尚不清楚。本研究检测纤毛依赖的流动反应中是否释放核苷酸并参与流动诱导的钙信号。方法：MDCK细胞装载Fluo-4-AM，在37℃半开放单室或封闭双室灌流系统...
ATP和5-羟色胺（5-HT）分别由味蕾受体细胞（II型）和突触前细胞（III型）分泌，去甲肾上腺素（NE）也被认为是味蕾中的神经递质或旁分泌激素，但其释放刺激和分泌细胞类型尚不清楚。本研究将中国仓鼠卵巢细胞（CHO）稳定转染α1A肾上腺素能受体并装载fura-2，构建NE生物传感器，用于检测孤立小鼠味蕾和味觉细胞释放的NE。NE生...
味蕾中含有两类直接参与味觉转导的细胞：受体（Type II）细胞和突触前（Type III）细胞。受体细胞响应甜、苦和鲜味刺激，但此前直接响应酸味（酸）刺激的身份主要依据原位记录、行为研究和候选酸味转导分子的免疫染色推断。本研究利用单细胞钙成像和生物传感器细胞检测神经递质释放，证明突触前（Type III）细胞特异性地响应酸味刺激并...