从真菌 Malbranchea aurantiaca 的生物碱部分，作者以较高收率分离得到新类似物 isomalbrancheamide B（3）及已知化合物 malbrancheamide（1）、isomalbrancheamide（2）和 premalbrancheamide（4）。采用酶学、荧光、圆二色、核磁共振和分子模拟方法...
本研究报道了一种高灵敏度、可重复使用的硅纳米线场效应晶体管（SiNW-FET）生物传感器，用于无标记检测蛋白-蛋白相互作用。该器件利用谷胱甘肽（GSH）与谷胱甘肽S-转移酶（GST）标签钙调蛋白（CaM-GST）之间的可逆结合，将CaM可逆固定于GSH修饰的晶体管表面，形成CaM/SiNW-FET。该传感器对Ca2+（≥1 μM）和...
本研究利用表达外源肌球蛋白轻链激酶（MLCK）荧光共振能量转移（FRET）活性生物传感器的转基因小鼠，研究完整肠系膜动脉中 Ca2+/钙调蛋白（Ca2+/CaM）对 MLCK 的激活与调节。高外钾使细胞内 Ca2+（fura-2 比值或 fluo-4 荧光）和 MLCK FRET 比值均快速升至峰值后先快后慢下降；张力先出现相性峰值...
本研究确定参与Ca2+/钙调蛋白（CaM）依赖性平滑肌肌球蛋白调节轻链（RLC）磷酸化的信号过程关系。作者在转基因小鼠平滑肌中表达基因编码生物传感器MLCK，实时测量神经刺激3 s的小鼠膀胱平滑肌条中[Ca2+]i、MLCK激活与张力。[Ca2+]i和激酶激活潜伏期分别为55±8 ms和65±6 ms，二者在100 ms随RLC磷酸...
本文报道了一种用于发现潜在钙调蛋白（CaM）抑制剂的荧光检测新方法。作者通过定点突变将人钙调蛋白第124位甲硫氨酸替换为半胱氨酸，获得 hCaM M124C，并经疏水交换层析和阳离子交换层析纯化。随后用硫醇反应性荧光探针单溴双咪胺（mBBr）共价修饰 Cys124，得到 hCaM M124C–mBBr。该标记蛋白在远紫外圆二色和 C...
Förster 共振能量转移（FRET）生物传感器分子是揭示细胞内特定分子相互作用的重要工具，但通常用于培养细胞，而培养细胞与完整机体中的细胞在基因表达和生理刺激/输出测量方面存在差异。本研究利用表达 FRET 型肌球蛋白轻链激酶（MLCK）生物传感器分子的转基因小鼠，报道了一种在完整、功能小鼠小动脉平滑肌细胞中动态观察 MLCK ...