D-氨基酸氧化酶（DAAO）可结合多种 D-氨基酸且亲和力不同，因此开发具有选择性的 DAAO 酶生物传感器仍是实际应用中的挑战。本文提出一种构建具有不同底物选择性生物传感器的方法。首先，通过理性设计在 DAAO 中引入点突变，提高其对 D-丝氨酸的选择性。随后，对野生型酵母 DAAO（RgDAAO WT）以及人源 DAAO W20...
酶基电化学生物传感器在实际应用中常面临底物特异性不足、批次间重现性差以及缺乏针对酶固定化效应的定量评价手段等挑战。本文提出一种快速、简便且通用的电化学方法，用于测量酶固定化及共价交联对酶催化活性和底物特异性的影响。该方法适用于催化循环中释放过氧化氢（H2O2）的酶基电化学生物传感器，通过检测 H2O2 在电极表面的氧化电流来定量酶促...
针对D-氨基酸（DAA）电化学生物传感器，需要在消旋溶液或手性混合物中实现手性识别，而常规手性识别往往只能在单一异构体溶液中进行。本文以D-氨基酸氧化酶（DAAO）为手性选择剂，以碳纳米管（CNTs）为信号放大器，构建了一种非介导型DAA电化学生物传感器。该传感器表现出优异的抗对映体干扰能力：在丙氨酸（Ala）对映体混合物中，当L-...
D-丝氨酸是哺乳动物中枢神经系统中主要的D-氨基酸，也是内源性NMDA受体甘氨酸位点的主要共激动剂，参与突触可塑性、学习与记忆，其水平异常与精神分裂症等神经精神疾病相关。为在活体中动态监测D-丝氨酸，本文报道了一种基于陶瓷基微电极阵列（MEA）的安培法自参考D-丝氨酸检测方案。该传感器在铂记录位点上固定来自红发念珠藻（Rhodoto...
本研究构建了一种用于检测D-丙氨酸的酶电化学生物传感器。该传感器以玻璃碳电极为基底，先滴涂多壁碳纳米管（MWCNTs）成膜，再在MWCNTs/GCE表面通过恒电位电沉积制备金纳米膜（Au-NF），形成Au-NF/MWCNT纳米复合修饰电极。随后将D-氨基酸氧化酶（DAAO）滴加于修饰电极表面，并用四乙氧基硅烷（TEOS）溶胶-凝胶网...
在突触中，D-丝氨酸是N-甲基-D-天冬氨酸受体（NMDAR）的内源性共激动剂，参与突触传递与可塑性，并与精神分裂症、亨廷顿病等病理状态相关。准确定量局部D-丝氨酸浓度变化对理解神经-胶质通讯至关重要。本文报道了一种盘状安培酶学生物传感器，用于检测D-丝氨酸。该传感器基于直径25 μm的铂盘微电极，表面电沉积聚间苯二胺（PPD）层，...
本文构建了一种高灵敏的D-氨基酸氧化酶（DAAO）/过氧化物酶（POD）双酶电化学生物传感器，选用五氰基铁酸盐结合聚(1-乙烯基咪唑)聚合物（PVI[Fe(CN)5]）作为电子介体。在DAAO/POD/PVI[Fe(CN)5]修饰电极上，于-0.1 V（vs. Ag|AgCl）测量与DAAO反应生成H2O2浓度相关的PVI[Fe(C...
本研究构建了一种改进的D-氨基酸生物传感器，通过将D-氨基酸氧化酶（DAAO）共价固定于羧基化多壁碳纳米管（c-MWCNT）/铜纳米颗粒（CuNPs）/聚苯胺（PANI）杂化膜修饰的金电极上实现。该杂化膜采用电沉积方式制备，c-MWCNT 经 EDC/NHS 活化后与 CuNPs 共同沉积于 PANI/金电极表面，随后 DAAO 通...
本文报道了一种基于镍六氰合铁酸盐/聚吡咯（NiHCNFe/PPy）杂化膜的电化学安培 D-氨基酸生物传感器。采用电化学两步法在玻璃碳电极（GC）表面沉积 NiHCNFe/PPy 杂化膜，随后将 D-氨基酸氧化酶（DAO）固定于膜上，构建 DAO/NiHCNFe/PPy/GC 电极。通过扫描电镜、电化学阻抗谱和傅里叶变换红外光谱对修饰...
食品中 D-氨基酸可由高温、极端 pH 等加工过程或掺假、微生物污染产生，因此食品质量控制日益重要。常规食品分析需要简单、易用的方法，生物传感器常能满足要求。基于酶促立体特异性反应的生物传感器可用于检测和定量食品中的 D-氨基酸。来自酵母 Rhodotorula gracilis 的 D-氨基酸氧化酶（DAAO）具有绝对立体特异性、...
D-丝氨酸作为脑内信使/胶质递质，促进神经信号和突触可塑性，需要灵敏工具监测脑内D-丝氨酸以理解胶质细胞释放机制。本文开发用于直接固定电位安培监测D-丝氨酸的生物传感器，将哺乳动物D-氨基酸氧化酶（DAAO）固定在Nafion包覆的聚邻苯二胺（PPD）修饰Pt–Ir微盘电极上。PPD与Nafion复合层使酶活性和传感器效率较单层提高...
测定食品和生物样品中D-氨基酸含量具有重要意义。本研究开发了一种基于红发酵母（Rhodotorula gracilis）黄素酶D-氨基酸氧化酶（RgDAAO）的生物传感器。为使D-氨基酸组成不改变检测结果，作者同时采用野生型及通过理性设计和定向进化获得的突变体。对D-氨基酸氧化酶突变体在不同中性、酸性和碱性底物比例混合物中的活性分析...