表面等离子共振（SPR）生物传感器方法非常适合片段库先导发现，但通用实验流程和详细方案仍然缺乏，尤其针对结构或理化性质困难靶点以及缺乏工具化合物的情况。成功取决于同时考虑靶点与化合物库特征，专门设计筛选实验以鉴定和验证具有所需特异性和作用模式的命中，并具备正交方法确认片段命中。采用多重策略，使用多个互补表面或实验条件，可显著扩大适合...
本文建立了以克氏锥虫法尼基焦磷酸合酶（tcFPPS）为靶标、用于表面等离子共振（SPR）生物传感器驱动片段筛选的方法体系。针对初始蛋白稳定性差和缺乏合适参考化合物的问题，作者优化了表达、纯化、储存与处理条件，获得纯度高于90%、折叠完整且呈二聚体的重组tcFPPS，并确定其可长期稳定保存。通过差示扫描荧光、固有荧光、圆二色和动态光散...
表面等离子共振（SPR）生物传感器是一种高灵敏度、无标记技术，可实时测定蛋白质、核酸及小分子相互作用的亲和力与动力学。本文系统回顾并建立了一套用于 RNA–小分子相互作用研究的 SPR 方法学。作者首先介绍 SPR 基本原理、实验设计与执行要点，重点说明利用链霉亲和素–生物素捕获体系将 5′-生物素标记 RNA 固定于 CM5/SA...
表面等离子共振（SPR）生物传感器可用于实时监测分析物与固定配体之间的相互作用，通过测量分析物结合过程中传感器芯片表面折射率的变化来反映结合事件。本研究将 SPR 技术与酶学测定相结合，用于从药用植物中筛选新的血管紧张素转换酶（ACE）抑制剂。首先以马尿酸-L-组氨酰-L-亮氨酸（HHL）水解法评估 30 种植物提取物，选出 5 种...
过去十年，表面等离子共振（SPR）生物传感器技术被越来越多地用于表征药物靶标与小分子调节剂之间的相互作用。本文报道了SPR方法在分析小分子与两种治疗相关cAMP磷酸二酯酶（PDE）结合中的应用：布氏锥虫PDEB1（与非洲昏睡病相关）和人类PDE4D（与哮喘、慢性阻塞性肺疾病及中枢神经系统疾病等相关）。作者建立了利用His标签PDE催...
比卡鲁胺（Casodex®）是一种用于治疗前列腺癌的非甾体抗雄激素药物，前列腺癌是全球男性第二常见恶性肿瘤。本研究采用光学生物传感器分析若干新合成比卡鲁胺类似物与雄激素受体（AR）的结合能力。雄激素受体通过胺偶联反应共价固定于羧甲基葡聚糖（CM5）基质上，制备成固定化受体芯片，用于比卡鲁胺类似物的结合实验。参考化合物（R）-比卡鲁胺...
本研究建立了一种表面等离子共振（SPR）生物传感器方法，用于研究51种组胺能和15种GABA能配体与同源寡聚β3 GABAA受体的相互作用。去垢剂溶解的受体通过亲和捕获固定在生物传感器表面。组胺能和GABA能配体的相互作用动力学很快，但可通过稳态分析确定亲和力。多个GABA能配体结合结果与既往数据一致。组胺和16种组胺能配体被检测到...
本研究设计并实验验证了一种用于表面等离子共振（SPR）生物传感器筛选的新片段库。该库从460万种可购买商品化合物中，经一系列理化性质和药物化学过滤，最终选出930个片段化合物。作者将片段库针对3个典型药物靶标——HIV-1蛋白酶、凝血酶和碳酸酐酶——以及1个非靶标蛋白人血清白蛋白进行筛选。在筛选条件下，化合物溶解性良好。高灵敏度传感...
本研究采用生物传感器筛选策略和专门设计的片段库，鉴定了基质金属蛋白酶12（MMP-12）的小分子抑制剂。作者将三种MMP-12变体（野生型、ilomastat稳定野生型和E219A失活突变体）以及含活性位点锌离子的参考蛋白碳酸酐酶II（CA II）固定于表面等离子共振（SPR）传感器芯片上，连续监测片段与靶标及参考蛋白的相互作用。该...